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小鼠单纯疱疹病毒性脑炎模型的建立
目的探讨单纯疱疹病毒-1引起小鼠单纯疱疹病毒性脑炎的发病机制.方法4周龄雄性Balb/c小鼠和昆明小鼠各50只,通过尾静脉和颅内分别接种单纯疱疹病毒-1.结果颅内接种病毒组可导致Ballb/c小鼠和昆明小鼠体重不增、抽搐、死亡.脑组病理切片经HE染色可发现有出血、坏死、软化等改变.脑组织匀浆用PCR方法检测单纯疱疹病毒-1均阳性.尾静脉接种单纯疱疹病毒-1后Balb/c小鼠和昆明小鼠体重均有增加,没有抽搐等症状,小鼠存活时间均超过7天.结论Balb/c小鼠和昆明小鼠均可感染单纯疱疹病毒-1,造成单纯疱疹病毒脑炎模型,颅内接种病毒可短期内引起单纯疱疹病毒性脑炎发病,PCR检测方法是诊断单纯疱疹病毒脑炎的有效手段.
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单纯疱疹病毒性角膜基质炎的鼠模型建立
目的建立单纯疱疹病毒性角膜基质炎(HSK)的鼠模型,为研究HSK的发病机制及临床治疗奠定基础.方法用HSV-1 RE株感染Balb/c鼠角膜,建立HSK的鼠模型,并在感染后1天、3天、7天观察病变.结果实验组鼠角膜有HSK病变发生,而空白对照组鼠角膜上皮愈合、完整光滑.结论 HSV-1 RE株感染Balb/c鼠有效,可致HSK发生.
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溶瘤病毒在肿瘤治疗中的研究进展
溶瘤病毒能特异性感染和裂解肿瘤细胞,且对正常细胞无损伤.其溶瘤特性和肿瘤靶向性在肿瘤治疗中的潜力值得关注.本文综述新城疫病毒、单纯疱疹病毒-1和溶瘤腺病毒治疗肿瘤的新进展.
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无环鸟苷对脑脊液单纯疱疹病毒DNA影响初探(附8例报告)
目的:探究无环鸟苷对脑脊液(CSF)中单纯疱疹病毒(HSV-1)DNA的影响.方法:应用定量聚合酶链反应(PCR)技术检测了8例单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)患者系列CSF中HSV-1,并将无环鸟苷治疗前后的HSV-1DNA量作比较分析.结果:无环鸟苷治疗后的CSF中,HSV-1DNA量较治疗前减低.结论:无环鸟苷可使CSF中HSV-1DNA量减低,CSF中HSV-1DNA定量检测可作为判断无环鸟苷疗效及给药与否的依据之一.
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咖啡鞣酸在单纯疱疹病毒感染的小胶质细胞中抗炎机制研究
目的:研究咖啡鞣酸(chlorogenic acid,CGA)在单纯疱疹病毒-1(herpes simplex virus-1,HSV-1)感染的BV2小胶质细胞中的抗炎作用.方法:用HSV-1刺激的BV2小胶质细胞建立单纯疱疹病毒性脑炎(herpes simplex virus encephalitis,HSE)的细胞模型,然后用不同浓度梯度的CGA进行处理.通过MTT法测定细胞存活率.分别通过real-time PCR(RT-PCR)和Western blotting测定Toll样受体TLR2、TLR9 mRNA和蛋白质的表达.结果:HSV-1感染的BV2小胶质细胞经CGA处理后细胞存活率显著升高(P<0.05).与正常组相比,HSV-1组TLR2、TLR9的mRNA和蛋白的水平显著升高(P<0.05),而CGA作用后显著降低HSV-1诱导的TLR2、TLR9表达(P<0.05).结论:CGA通过降低TLR2、TLR9的表达抑制HSE中的炎症反应,可为HSE的抗炎治疗提供新的治疗策略.
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咖啡鞣酸对单纯疱疹病毒-1诱导单纯疱疹病毒感染过程中Toll样受体9信号通路的干预机制
目的 探讨咖啡鞣酸(CGA)对单纯疱疹病毒-1((HSV-1)感染BV2小胶质细胞诱导单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)细胞模型过程中Toll样受体9(TLR9)信号通路的干预机制.方法 用HSV-1刺激的BV2细胞建立HSE的细胞模型,然后用不同浓度梯度(25、50、100 ng/ml)的CGA进行处理.通过噻唑蓝(MTF)法测定细胞存活率.分别通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot测定TLR9、骨髓分化因子88 (Myd88) mRNA和蛋白的表达.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)以及RT-PCR测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.结果 CGA治疗后细胞存活率显著改善[模型组为:(43.0±8.7)%;CGA组分别为(57.0±8.4)%、(64.0±7.6)%、(84.0±4.2)%],模型组TLR9、Myd88、TNF-α水平显著高于正常组(蛋白表达分别为:0.84±0.05比0.18±0.13,P=0.000;0.89±0.03比0.76 ±0.11,P=0.002;292.34±8.16比20.76±5.72,P=0.000;mRNA相对表达量分别为:3.01±0.87,P=0.000;5.79±0.72,P=0.000;20.12±10.17,P=0.000),CGA干预后,其水平显著低于模型组(P =0.000).结论 在HSV-1感染BV2小胶质细胞诱导HSE细胞模型中,咖啡鞣酸可以通过抑制TLR9信号通路中TLR9、Myd88分子的表达,从而抑制促炎因子TNF-α的释放,减轻炎性反应.
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咖啡鞣酸对单纯疱疹病毒感染过程中TLR2信号通路的干预
目的 研究咖啡鞣酸(CGA)对单纯疱疹病毒-1(HSV-1)感染BV2小胶质细胞诱导单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)细胞模型过程中Toll样受体2(TLR2)信号通路的干预机制.方法 将细胞分为正常对照组、模型对照组和CGA低、中、高浓度组(25,50和100 ng·mL-1).用HSV-1刺激的BV2细胞建立HSE的细胞模型,然后用不同浓度梯度的CGA进行处理.分别通过RT-PCR和Western blotting测定TLR2、Myd88 mRNA和蛋白质的表达.通过ELISA以及实时PCR(RT-PCR)测定IL-6的表达.结果 模型对照组TLR2、Myd88、IL-6水平显著高于正常对照组(P<0.05),咖啡鞣酸干预后,其水平显著低于模型对照组(P<0.05).结论 在HSV-1感染BV2小胶质细胞诱导HSE细胞模型中,咖啡鞣酸可以通过抑制TLR2信号通路中TLR2、Myd88分子的表达,从而抑制促炎因子IL-6的释放,减轻炎性反应.
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小鼠单疱病毒角膜炎行羊膜移植MMPS及TIMPS表达的变化
目的:探讨羊膜移植对BalB/c小鼠感染单纯疱疹病毒-1(HSV-1)后基质金属蛋白酶-2,-8,-9及组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-1,TIMP-2表达变化及其在单疱病毒角膜炎(HSK)病程中所起的作用.方法:将40只小鼠随机分为实验组和对照组,将5μl(105PFU)HSV-1感染小鼠单侧右眼角膜,建立单疱病毒角膜炎的动物模型.对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术.分别在HSV-1感染后的第2,7,14 d处死小鼠,用免疫组化方法对小鼠感染HSV-1后MMP-2、MMP-9、MMP-8、TIMP-1、TIMP-2的表达变化进行研究,探讨它们在单疱病毒性角膜炎发展过程中所起的作用.结果:在对照组,角膜中MMP-2、MMP-8、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2在第2天出现表达且表达主要位于浅表基质层及上皮下的炎性细胞中.感染后第14天可见坏死性角膜炎及角膜溃疡形成,同时角膜基质和浸润的炎性细胞中尤其溃疡处,可见MMP-2、MMP-9 及TIMP-1、TIMP-2表达显著增加.溃疡区域有大量MMP-8阳性染色的中性粒细胞.实验组各时间点MMP-2,-9, -8活性均低于对照组,TIMPS表达高于对照组.结论:行羊膜移植可抑制角膜细胞和浸润的炎性细胞分泌产生MMPs ,促进TIMPS表达,可能对上皮性角膜炎与溃疡形成过程起重要的抑制作用.
关键词: 单纯疱疹病毒-1 基质金属蛋白酶 组织金属蛋白酶抑制剂 单疱病毒角膜炎 羊膜移植 -
天花粉蛋白对体内体外单纯疱疹病毒-1的抑制作用
目的 探讨天花粉蛋白对体内体外单纯疱疹病毒-1(HSV-1)的抑制作用.方法 动物随机分为模型对照组和天花粉蛋白治疗组,小鼠颅内接种HSV-1建立病毒性脑炎模型,治疗组于接种HSV-1前30 min腹腔注射天花粉蛋白注射液,接种病毒后12、24、48和96 h、7 d分别测定各组脑组织病毒滴定度.培养神经细胞分为正常对照组、病毒对照组、药物预处理组,接种病毒后12、24、48和96 h分别测定各组培养神经细胞的病毒滴定度.结果 天花粉蛋白治疗组于小鼠颅内接种HSV-1后12、24、48和96 h、7 d脑组织病毒滴度分别为(1.32±0.39)、(1.27±0.44)、(1.33±0.41)、(1.29±O.48)、(1.16±0.45),明显低于模型组(2.91±0.55)、(2.95±O.56)、(2.93±O.54)、(2.89±0.58)、(2.89±O.44),差异有显著性(P<0.001).药物预处理组在12、24、48和96 h后培养神经细胞病毒滴度分别为(1.12±0.34)、(1.18±0.40)、(1.24±0.38)、(1.26±O.42),明显低于病毒对照组(2.65±0.64)、(2.59±O.53)、(2.83±0.55)、(2.82±O.57),差异有显著性(P