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ROC曲线分析miRNA-221/222作为侵袭性甲状腺乳头状癌诊断标志物的临床价值
目的 研究miRNA-221/222在侵袭性甲状腺乳头状癌诊断中的意义及与患者临床病理特征的关系.方法 选取甲状腺乳头状癌(PTC)患者87例,其中,47例患者腺外浸润(I-PTC),40例患者肿瘤局限于包膜内(L-PTC);再选取同期27例结节性甲状腺肿(MNG)患者和18例正常甲状腺患者的甲状腺组织(NT).应用实时荧光定量PCR检测法检测各组患者甲状腺组织中miRNA-221/222的表达量,分析miRNA-221/222的表达与PTC患者的临床病理特征的关系,构建ROC曲线评估miRNA-221/222在乳头状甲状腺癌诊断和判断有无腺外浸润中的应用价值.结果4组患者甲状腺组织中miRNA-221/222表达情况比较,差异有统计学意义(P﹤0.05).有淋巴结转移和(或)腺外浸润的患者miRNA-221/222的表达高于无淋巴结转移和(或)无腺外浸润的患者,差异有统计学意义(P﹤0.05).miRNA-221诊断PTC的曲线下面积(AUC)为0.803,miRNA-222诊断PTC的AUC为0.802;miRNA-221的截断值为0.487时,诊断灵敏度为80.7%,特异度为74.8%;miRNA-222的截断值为0.502时,诊断灵敏度为78.3%,特异度为73.2%.miRNA-221判断甲状腺肿瘤侵袭性的AUC为0.660,miRNA-222判断甲状腺肿瘤侵袭性的AUC为0.653;miRNA-221的截断值为0.846时,诊断灵敏度为63.6%,特异度为52.5%;miRNA-222的截断值为0.851时,诊断灵敏度为63.6%,特异度为73.8%.结论 miRNA-221/222在PTC患者组织中表达上调,与PTC的侵袭程度和淋巴结转移情况有关,支持其作为侵袭性PTC潜在的生物标志物,但利用特异性miRNA判断甲状腺癌的侵袭和转移风险性,仍有待进一步深入研究.
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反义miRNA-221/222上调p27kip1抑制胶质瘤细胞生长的体外研究
目的 探讨敲低miRNA-221/222表达上调p27kip1抑制U251人脑胶质瘤细胞株生长的效果及机制.方法 脂质体共转染反义miRNA-221/222下调U251人脑胶质瘤细胞株miRNA-221、miRNA-222的表达.使用Northern blot方法 鉴定转染后U251细胞miRNA-221、miRNA-222表达水平下调;MTT法评价反义miRNA-221/222抑制U251细胞生长效果;流式细胞术检测转染后U251细胞周期分布;Western blot分析p27kip1蛋白的表达变化.结果 Northern blot显示反义miRNA-221/222共转染组使miRNA-221、miRNA-222的表达水平明显下降.反义miRNA-221转染组仅使miRNA-221的表达水平明显下降,反义miRNA-222转染组仅使miRNA-222的表达水平明显下降.转染无意序列组及对照组的miRNA-221、miRNA-222表达水平没有改变.MTT结果 显示反义miRNA-221/222共转染组肿瘤细胞生长速度小于对照组、转染无意序列组、转染反义miRNA-221组、转染反义miRNA-222组.流式细胞术检测可见反义miRNA-221/222共转染组细胞周期存在G0/G1期阻滞且明显高于其他各组.Western blot显示反义miRNA-221/222共转染组的p27kip1蛋白表达明显上调.结论 反义miRNA-221/222通过上调p27kip1蛋白表达来抑制胶质瘤细胞U251的生长.
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miRNA-221和miRNA-222与甲状腺癌侵袭转移的相关性研究
目的 探讨miRNA-221和miRNA-222与甲状腺癌侵袭转移的相关性.方法 选择2013年10月至2016年10月接受甲状腺次全手术切除治疗的病理确诊的甲状腺癌患者168例作为研究对象,于确诊后收集患者外周静脉血与新鲜标本提取miRNA,进行RT-PCR检测血浆及组织miRNA-221及miRNA-222表达水平.结果 癌组织miRNA-221及miRNA-222与血浆miRNA-221及miRNA-222表达呈正相关(r=0.226,P<0.05);血浆miRNA-221及miRNA-222表达水平在不同年龄、淋巴结转移与否、腺体外浸润与否、肿瘤大小及TNM分期均有差异,且有统计学意义(P<0.05).结论 miRNA-221及miRNA-222在甲状腺癌组织及血浆中高表达,与甲状腺癌侵袭转移的明显相关,可能可以作为生物标志物.
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miR-222在结直肠癌组织中的表达及意义
目的 探讨miRNA-222(miR-222)在结直肠癌组织中的表达及意义.方法 采用实时定量PCR检测44例结直肠癌组织及癌旁正常组织中miR-222的表达水平,分析其与临床病理指标之间关系.结果 miR-222在44例癌组织标本中的表达量为0.0085(0.0041,0.0428),低于癌旁正常组织中的0.0188(0.0120,0.0326) (P＜0.01).miR-222在黏液性腺癌中的表达量为0.1461(0.0478,0.4251),低于非黏液性腺癌的0.4373(0.2012,1.1882)(P＜0.05).miR-222表达与患者的性别、年龄和结直肠癌的分化程度、临床分期、浸润深度、淋巴结和远处转移均无明显相关性(P＞0.05).结论 miR-222参与结直肠癌发生和发展的调控.
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不同肝癌细胞株中miRNA-221和miRNA-222的差异表达及意义
目的 研究miRNA-221、miRNA-222在不同人肝癌细胞株中的表达情况,同时分析其在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达情况,探讨二者与HCC复发转移的关系.方法 从体外培养的人肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H和46例手术切除的HCC组织及毗邻癌旁组织中提取总的RNA,用微小RNA的引物反转录后,用miRNA-221、miRNA-222特异性引物作荧光定量聚合酶链反应,分析miRNA-221、miRNA-222在肝癌细胞株中的表达水平.结果 肝癌细胞株MHCC-97H中miRNA-221、miRNA-222的表达较肝癌细胞株HepG2、Huh7显著升高;HCC组织中miRNA-221、miRNA-222的平均表达水平较癌旁组织分别上调(1.72±1.17)、(1.76±1.14)倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 miRNA-221、miRNA-222显著高表达可能在HCC发生、发展中发挥重要作用,尤其与HCC细胞的复发转移有关.
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miR-222下调高糖下小鼠系膜细胞TIMP3表达
目的 探讨miR-222是否通过靶向调控TIMP3表达参与糖尿病肾病的发生过程,从而进一步揭示糖尿病肾病的发病机制. 方法 运用qRT-PCR检测经25 mmol/L葡萄糖处理的小鼠系膜细胞(HG组)和对照小鼠系膜细胞(5 mmol/L葡萄糖,NG组)中miR-222和TIMP3的表达;将miR-222 mimics转染小鼠系膜细胞,以TIMP3 siRNA为阳性对照,采用Western blot检测其对TIMP3蛋白表达水平的影响. 结果 qRT-PCR检测结果显示,miR-222在经高糖处理的小鼠系膜细胞中的表达相对比正常浓度糖处理的小鼠系膜细胞中明显上调,而TIMP3在经高糖处理的小鼠系膜细胞中mRNA的表达相对比正常浓度糖处理的小鼠系膜细胞中明显下调;Westernblot结果显示,过表达miR-222或干扰TIMP3可抑制TIMP3蛋白的表达(P＜0.05). 结论 miR-222可能通过调控TIMP3的表达参与糖尿病肾病的发生发展.
关键词： miRNA-222 糖尿病肾病 金属蛋白酶组织抑制因子3 -
miRNA-221和miRNA-222在肝细胞肝癌中的表达及临床意义
目的:研究miRNA-221、miRNA-222在人肝癌细胞株及肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达,探讨二者与患者临床病理特征间的关系.方法:从体外培养的人肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97和46例手术切除的HCC组织及毗邻癌旁组织中提取总的RNA,用微小RNA的引物反转录后,用miRNA-221、miRNA-222特异性引物做荧光定量聚合酶链反应,并分析miRNA-221、miRNA-222表达水平与各临床病理参数间的关系.结果:肝癌细胞株MHCC-97中miRNA-221、miRNA-222的表达较肝癌细胞株HepG2、Huh7显著升高;HCC组织中miRNA-221、miRNA-222的平均表达水平较癌旁组织分别上调1.72±1.17,1.76±1.14倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).miRNA-221、miRNA-222表达水平与HCC肿瘤TNM分期和包膜浸润有关,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:miRNA-221、miRNA-222显著高表达可能在HCC发生、发展中发挥重要作用,尤其与肝癌细胞的侵袭、转移有关.
