葛根素和丹参酮ⅡA组分配伍对糖尿病肾病大鼠肾组织P27 kip1蛋白的调控作用

目的 探讨葛根素、丹参酮ⅡA组分配伍对糖尿病肾病大鼠p27kip1表达的影响,为中医药治疗糖尿病肾病提供实验依据.方法 单次腹腔注射链脲佐菌素(65 mg/kg)建立糖尿病肾病大鼠模型,实验分为对照组、模型组、葛根素低、高剂量组(50 mg/kg,200 mg/kg)、丹参酮ⅡA低、高剂量组(10 mg/kg,40 mg/kg)、葛根素+丹参酮ⅡA低、高剂量组(葛根素50 mg/kg+丹参酮ⅡA 10 mg/kg,葛根素200 mg/kg+丹参酮ⅡA 40 mg/kg),8 周末处死大鼠,测定血糖、24 h尿量及24 h尿蛋白,通过RT-PCR和Western blot法检测各组大鼠肾组织p27kip1mR-NA及蛋白的表达.结果 葛根素+丹参酮ⅡA高剂量组可明显降低糖尿病肾病大鼠血糖,减少尿量,减轻尿蛋白排泄,抑制糖尿病肾病大鼠肾组织P27kip1蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01),且优于其他各组.结论 葛根素和丹参酮ⅡA组分配伍具有抗糖尿病肾病的作用,其机制可能是通过下调糖尿病肾病大鼠肾组织 p27kip1的表达实现的.

尼美舒利对食管癌Eca-109细胞增殖及COX-2和P27kip1表达的影响

目的观察选择性COX-2抑制剂尼美舒利对食管癌Eca-109细胞增殖、凋亡及COX-2表达的影响,并探讨与抑癌基因P27kip1的关系.方法用MTT法测定Eca-109细胞增殖;透射电镜及流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2 mRNA表达变化;Western blot检测COX-2和P27kip1蛋白表达变化.结果尼美舒利以时间、剂量依赖方式抑制Eca-109增殖,增加G0/G1期细胞比例;呈剂量依赖性诱导细胞凋亡,降低COX-2 mRNA和蛋白表达,上调P27kop1蛋白表达.结论尼美舒利可抑制食管癌Eca-109细胞增殖,使细胞周期受阻于G0/G1期并诱导细胞凋亡.其机制可能是通过下调COX-2表达和上调P27kip1蛋白表达水平实现的.

反转录病毒载体介导的P27kip1促HepG2细胞凋亡

目的 研究反转录病毒介导的P27kip1基因过表达对HepG2细胞的影响.方法 构建携带有人P27kip1基因的反转录病毒载体,经脂质体介导转染PA317包装细胞,C-418筛选获得稳定产毒细胞系,病毒感染HepG2细胞,筛选出P27kip1阳性克隆,Western blot检测P27kip1在HepG2中的表达,并通过细胞形态学观察、MTT、FCW等方法,检测P27kip1对HepG2细胞的影响.结果 成功构建了含有人P27kip1基因的pLNCX-P27反转录病毒载体并导入包装细胞获得了稳定产毒细胞系,病毒感染HepG2后P27kip1基因可在细胞内高表达,过表达P27kip1基因的细胞生长速度受阻,较多细胞阻滞于G1期,且凋亡增多.结论 构建的pLNCX-P27载体能稳定高效地将P27kip1基因导入HepG2细胞,过表达P27kip1可抑制细胞生长,加速凋亡.

Skp2和p27kip1与肿瘤间关系的研究进展

目的:探讨Skp2和p27kip1与恶性肿瘤发生、发展的关系.方法:查阅相关中外文献,分析Skp2和p27kip1的生物学特性和功能以及与常见恶性肿瘤的关系.结果:Skp2通过泛素蛋白酶体途径降解磷酸化的p27kip1,促使细胞由G1期进入S期, 导致肿瘤的发生.结论:Skp2-p27kip1可能代表一种致癌通路,其与肿瘤的关系正受到越来越多的重视.

Skp2和p27Kip1表达异常与乳腺癌发生及临床病理特征的相关性研究

目的 从蛋白水平研究Skp2和p27Kip1表达异常与乳腺癌发生及临床病理特征的相关性.方法 采用EnVision两步法检测30例乳腺正常组织,30例导管上皮不典型增生组织(ADH)、30例导管原位癌(DCIS)和56例浸润性导管癌(非特殊类型)(IDC)中Skp2和p27Kip1的表达水平,并分析Skp2和p27Kip1表达异常与乳腺癌发生及临床病理特征的关系.结果 ①ADH组、DCIS组及IDC组的Skp2阳性率均高于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),IDC组和DCIS组高于ADH组(P＜0.01,P＜0.05),IDC组又高于DCIS组(P＜0.01).ADH组、DCIS组和IDC组p27kip1阳性率均低于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),IDC组和DCIS组均低于ADH组(P＜0.01,P＜0.05),IDC组又低于DCIS组(P＜0.01).②IDC伴淋巴结转移组Skp2阳性率显著高于DCIS淋巴结转移组(P＜0.05);IDCⅢ级高于IDC Ⅰ～Ⅱ级(P＜0.01).反之,p27kip1阳性率在IDC伴淋巴结转移组低于无淋巴结转移组(P＜0.05);IDCⅢ级低于Ⅰ～Ⅱ级(P＜0.01).结论 Skp2与p27Kip1异常表达与乳腺癌发生、病理分级和淋巴结转移有密切相关性.

P27kip1与细胞周期蛋白G在急性白血病中的表达及相关性研究

为了探讨P27kip1与细胞周期蛋白G(cyclin G)在急性白血病患者中的表达及其相关性,采用逆转录聚合酶链反应(RU-PCR)检测89例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27kip1与cyclin G mRNA水平,采用Wes-tern blot检测39例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27kip1与cyclin G蛋白表达水平.结果显示:急性白血病初治/复发组的cyclin G mRNA与蛋白表达水平均明显高于缓解组和正常对照组(P<0.05或P<0.01);缓解组与正常对照组之间无显著差异(P>0.05).急性白血病初治/复发组的P27kip1mRNA水平与缓解组和正常对照组比较均无明显差异(p>0.05).而急性白血病缓解组和正常对照组的P27kip1的蛋白表达水平高于初治/复发组(P<0.05),缓解组与正常对照组之间无显著差异(p>0.05),P27kip1与cyclin G的表达呈低度负相关.结论:P27kip1与cyclin G在白血病患者中有异常表达,与白血病的发生发展有一定联系;P27kip1的低表达与cyclin G的异常高表达可能是白血病预后不良的因素之一.

As2O3和/或TGF-β1诱导NB4细胞凋亡中P27Kip1、cyclin E、内源性TGF-β1的变化及其意义

本研究探讨三氧化二砷(As2O3)和/或转化生长因子-β1(TGF-β1)作用于NB4细胞后的细胞凋亡情况、P27Kip1、cyclin E及内源性TGF-β1 mRNA水平的变化及其意义.用MTT法检测As2O3,对NB4细胞的细胞毒性及IC50,用瑞氏-姬姆萨染色观察凋亡细胞形态学的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,半定量RT-PCR检测P27Kip1、cyclin E以及内源性TGF-β1的mRNA水平.结果表明:As2O3、TGF-β1均能明显抑制NB4细胞的生长,促进NB4细胞的凋亡;As2O3对NB4细胞的抑制及促凋亡作用均呈剂量-时间依赖关系,24小时的IC50约为12μmol/L,48小时的IC50约为5μmol/L,72小时的IC50约为3 μmol/L.As2O3和/或TGF-β1均可使NB4细胞出现细胞周期阻滞,5 μmol/L As2O3使NB4细胞阻滞在G2/M期,5 ng/ml TGF-β1使NB4细胞阻滞在G1期,两者联合处理组主要使S期阻滞.As2O3、TGF-β1分别作用于NB4细胞时均可见P27Kip1及内源性TGF-β1的mRNA表达上调,而cyclin E的mRNA表达下调;联合处理组结果显示TGF-β1可增强As2O3上述作用.结论:As2O3及TGF-β1均可诱导NB4细胞凋亡,引起细胞周期分布异常;As2O3及外源性TGF-β1可能通过上调内源性TGF-β1使P27Kip1高表达以诱导细胞凋亡;TGF-β1可能直接抑制了cyclin E的表达,或者通过上调P27Kip1的表达而反馈抑制cyclin E的活性,从而导致NB4细胞周期阻滞.

他克莫司对人肾小球系膜细胞细胞周期相关蛋白表达的影响

目的 探讨他克莫司对体外培养的人肾小球系膜细胞细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E 及p27kip1的影响及可能机制.方法 设正常对照组和他克奠司处理组,他克莫司组设为三个组(浓度分别为10 μmol/L、25 μmol/L、50μmol/L).四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测他克莫司组处理12 h后肾小球系膜细胞的增殖情况；流式细胞仪检测他克莫司组分别作用12、24、48 h后系膜细胞的上述三种蛋白质及与其结合的CDK2和CDK4的表达情况；选择有明显抑制作用的时间点(12 h),Western blot检测上述三种蛋白质的表达情况.结果 (1)作用12 h,他克莫司组均能抑制系膜细胞的增殖.(2)作用12、24、48 h,与对照组相比,浓度为10 μmol/L他克莫司对细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin E及抑制因子p27kip1的表达无明显影响,而浓度为25、50 μmol/L时,cyclin D1及cyclin E明显降低,p27kip1表达明显升高,呈一定的剂量效应关系；且相同浓度的他克莫司在作用三个时间点后,cyclin D1、cyclinE及p27kip1的表达无明显差异.(3)作用12 h,与对照组相比,浓度为10μmol/L他克莫司对周期蛋白依赖性激酶CDK2、CDK4的表达无明显影响,而浓度为25、50 μ mol/L时,CDK2、CDK4的表达明显降低.结论 一定浓度的他克莫司可抑制系膜细胞的增殖,其作用机制至少部分与其影响细胞周期相关蛋白的表达有关.

结直肠癌PTEN基因表达及与ERK2、p27kip1的相关性

目的:研究结直肠癌中的PTEN、ERK2及p27kip1蛋白的表达及相互关系,初步探讨他们在结直肠癌发生发展中的生物学意义.方法:用免疫组织化学染色快捷法,检测40例结直肠癌组织、18例结直肠腺瘤、13例结直肠正常黏膜中PTEN蛋白、p27kip1和ERK2蛋白的表达,比较PTEN蛋白表达与临床病理指标的关系,及其与p27kip1、ERK2蛋白表达的相关性.结果:结直肠癌癌组织PTEN,ERK2和p27kip1蛋白表达的阳性率与腺瘤及正常组织间比较差异有显著性(57.5% vs 72.2%,100%;70.0% vs 61.1%,23.1%;62.5% vs 77.8%,100%;P＜0.05);PTEN蛋白表达强度与ERK2蛋白表达强度之间呈负相关(r=-0.452,P＜0.05),与p27蛋白表达强度呈正相关(r=0.379,P＜0.05);PTEN,p27kip1蛋白与结直肠癌分化程度、淋巴结转移及Dukes分期相关(P＜0.05);ERK2蛋白随结直肠癌淋巴结转移、Dukes分期的进展而增高.结论:抑癌基因PTEN的表达与结直肠癌生物学行为密切相关;在结直肠癌发生、发展过程中,可能由于PTEN蛋白的低表达或失表达抑制p27kip1蛋白表达及Ras/Raf/MEK/ERK信号通路的异常激活,使细胞发生癌变,并促进癌变细胞的浸润、转移.

PI3K/Akt信号通路抑制剂对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用及其机制

目的:研究磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路抑制剂渥曼青霉素对人肝癌HepG2细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响以及相关基因pAkt、Skp2 及P2 7kip1表达的变化.方法:将不同浓度的渥曼青霉素(O、10、50、100、200 nmol/L)分别作用于对数生长期的人肝癌HepG2细胞3、10、24 h,MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期的变化,Western blot检测pAkt、Skp2及P27kip1蛋白表达变化,RT-PCR检测Skp2及P27kip1mRNA表达变化.结果:渥曼青霉素可明显抑制HepG2细胞的增殖,在一定范围内具有时间和浓度依赖性.渥曼青霉素可导致G0/G1期HepG2细胞比例明显升高,S期细胞比例明显降低(P＜0.05).随着渥曼青霉素浓度的增加及作用时间的延长,HepG2细胞凋亡率逐渐升高(8.46％±1.17％至28.03％±2.67％)(P＜0.05).Western blot结果显示渥曼青霉素可下调pAkt和Skp2蛋白的表达,上调P27kip1蛋白表达(P＜0.05).RT-PCR结果显示渥曼青霉素可明显下调Skp2 mRNA的表达,而P27kip1mRNA表达无明显变化.结论:PI3K/Akt信号通路抑制剂渥曼青霉素可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,引发G0/G1期阻滞并诱导其凋亡,其机制可能与PI3K/Akt信号通路参与Skp2及P27kip1调控有关.

AIM We have previously reported that inducible over-expresaion of Bak may prolong cell cycle in G1 phase and lead to apoptosis in HCC-9204 cells. This study is to investigate whether p27KIP1 plays an important role in this process. MEHODS In order to elucidate the exact function of p27KIP1 in this process, a zinc inducible p27KIP1 stable transfectant and transient p27KIP1- GFP fusion transfectant were constructed. The effects of inducible p27KIP1 on cell growth, cell cycle arrest and apoptosis were examined in the mock, control pMD vector, and pMD-KIP1 transfected HCC-9204 cells. RESULTS This p27KIP1-GFP transfectant may transiently express the fusion gene. The cell growth was reduced by 35% at 48 h of p27KIP1 induction with zinc treatment as determined by trypan blue exclusion assay. These differences remained the same after 72 h of p27KIP1 expression, p27KIP1 caused cell cycle arrest after 24 h of induction, with 40% increase in G1 population. Prolonged p27KIP1 expression in this cell line induced apoptotic cell death reflected by TUNEL assay. Fourty-eight h and 72 h of p27KIP1 expression showed a characteristic DNA ladder on agarose gel electrophoresis.

曲古菌素A对血管平滑肌细胞p27kip1表达的调控机制研究

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(Trichostatin A,TSA)对血管平滑肌细胞(VSMC)的p27kip1表达的影响和调控机制.方法 半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测p27kip1的mRNA水平,蛋白印迹测定p27kip1和S-phase kinase-associated protein-2(skp2)蛋白表达,荧光分光光度法测定20S蛋白酶体活性.结果 100ng/ml TSA不影响VSMC中p27kip1的mRNA水平.100 ng/mlTSA显著抑制血清诱导的p27kip1蛋白下调,并延长p27kip1蛋白的半衰期.100ng/mlTSA抑制血清诱导的skp2表达上调,且skp2表达与相应时点p27kip1蛋白呈负相关.100ng/mlTSA对20S蛋白酶体活性物影响.结论 TSA对VSMC的p27kip1表达调控不是在转录水平上,而是通过翻译后机制抑制血清诱导VSMC的p27kip1蛋白降解,其机制可能与TSA抑制泛素连接酶亚单位skp2表达有关.

腺病毒介导的人p27kip1基因转染对球囊损伤后兔颈动脉新生内膜增生的抑制作用

目的研究腺病毒介导的p27kip1基因及其蛋白产物高表达对球囊损伤后兔颈动脉新生内膜增生的抑制作用.方法建立兔颈动脉球囊损伤模型,将LacZ重组腺病毒(AdLacZ)和人p27kip1重组腺病毒(Adhp27kip1)在体内分别转染损伤动脉节段,以Western blot、x-gal染色、HE染色、免疫组化及计算机图像处理方法观察转染动脉节段中外源性p27kip1蛋白表达及其对新生内膜增生的影响.结果与AdLacZ转染组及未转染组比较,Adhp27kip1转染的动脉节段内p27kip1蛋白呈高表达,表达高峰在7～14 d,持续4周以上;转染4周后未转染组、AdLacZ转染组及Adhp27kip1转染组的新生内膜面积分别为1.106 mm2、0.988 mm2及0.278 mm2;管腔狭窄率分别为87.07%、65.40%及32.14%.结论外源性p27kip1基因及其蛋白产物在损伤动脉节段内高表达可显著抑制新生内膜增生及管腔狭窄.

重组腺病毒介导的人p27kip1基因高表达对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响

目的探讨重组腺病毒介导的p27kip1基因及其蛋白产物高表达对血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移的抑制作用.方法将含人p27kip1cDNA的重组腺病毒(Adhp27kip1)及含β-半乳糖苷酶基因的重组腺病毒(AdLacZ)在体外转染原代大鼠主动脉VSMCs,用Western blot及Boyden趋化小室检测外源性p27kip1蛋白在细胞内的表达及对VSMCS迁移的影响.结果转染后24h,Adhp27kip1转染的VSMCs内p27kip1蛋白高表达,而AdLacZ转染的VSMCs内仅显示极低水平的内源性p27kip1蛋白表达;Boyden趋化小室检测显示未转染的VSMCs、AdLacZ及Adhp27kip1转染的VSMCs血清诱导后的迁移细胞数分别为139±26、106±16及68±14.结论外源性p27kip1基因及蛋白产物在VSMCs内高表达可显著抑制VSMCs的迁移.

多发性内分泌腺瘤病1型相关的甲状旁腺肿瘤p27KiP1及β-连环蛋白的表达

目的 分析p27Kip1及β-连环蛋白(β-catenin)在多发性内分泌腺瘤病1型(MEN1)相关的甲状旁腺肿瘤(MHPT)组织中的表达,以探索其在MHPT发病机制中的作用.方法 收集2002年至2013年北京协和医院收治的31例MHPT患者的MHPT组织31份以及5份正常甲状旁腺(NP)组织的石蜡标本,应用免疫组织化学染色法检测p27Kip1及β-catenin的表达情况.结果 MHPT组织中,p27Kip1在细胞核表达为缺失、弱阳性或中等阳性(分别为12.9％、32.3％、54.8％);细胞膜β-catenin表达为强阳性或中等阳性,细胞质β-catenin表达为中等阳性或弱阳性,未见有β-catenin表达于细胞核.MHPT组织p27 Kip1表达水平显著低于NP组织(P=0.001),但细胞膜及细胞质β-catenin表达在MHPT组织与NP组织差异无统计学意义(P值分别为0.087,0.357).结论 MHPT组织p27Kip1蛋白表达显著减少,未发现β-catenin异位聚集于细胞核现象.

胃肠道间质瘤中P27KIP1和Bax的表达及临床意义

目的：探讨胃肠道间质瘤中P27KIP1和Bax的表达与生物学行为的关系。方法：运用免疫组化SP法检测P27KIP1和Bax在胃肠道间质瘤中的表达情况,并分析其在良性、潜在恶性、恶性病例中的表达差异。结果：55例GIST中,P27KIP1和Bax的阳性表达率分别为36.3%和60%。P27KIP1和Bax的阳性表达率与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关，在良性和潜在恶性及恶性之间有显著差别。结论：检测P27KIP1和Bax可作为预测胃肠道间质瘤恶性潜能、判断预后的重要参考指标。

P27kip1及相关分子Jab1在大鼠损伤脊髓中的表达变化及意义

目的：观察大鼠脊髓损伤过程中P27kip1及相关分子Jab1在脊髓中的表达及细胞定位情况，探讨其在脊髓损伤后胶质细胞增生及胶质瘢痕生成中的作用。方法：取56只雄性SD大鼠，随机分为实验组与对照组，其中实验组按脊髓损伤时间分为6h、12h、1d、3d、5d、7d、14d组，实验组按照Allen′s法制作SD大鼠脊髓损伤模型，对照组则仅打开椎板，不损伤脊髓。首先利用Western Blot观察P27kip1及相关分子Jab1在脊髓损伤后的表达水平变化，然后利用免疫组化观察脊髓损伤后3d时的P27kip1及5d时Jab1的阳性细胞表达变化，后利用免疫荧光双标观察脊髓损伤后5d时Jab1的细胞定位变化。结果：Western Blot结果显示P27kip1在脊髓损伤后6h、12h、1d、3d、5d、7d、14d组的相对灰度值分别是1.00±0.10、0.82±0.05、0.27±0.03、0.34±0.03、0.25±0.02、0.28±0.03、0.57±0.05，其中1d、3d、5d、7d、14d 组与对照组（0.98±0.08）相比均明显降低（P<0.05），而 Jab1的6h、12h、1d、3d、5d、7d、14d 组的相对灰度值分别是0.58±0.08、0.53±0.04、0.89±0.11、1.06±0.24、1.22±0.26、0.85±0.16、0.25±0.03，其中6h、12h、1d、3d、5d、7d组与对照组（0.19±0.04）相比明显升高（P<0.05），P27kip1于脊髓损伤后表达下降，Jab1在脊髓损伤后表达上升。3d时实验组P27kip1免疫组化阳性细胞数为130.8±29.8个，与对照组（406.8±56.6个）相比减少（P<0.05）；5d时实验组Jab1免疫组化阳性细胞数为383.5±68.8个，与对照组（123.5±42.6个）相比增多（P<0.05），从形态学上进一步证明了这种变化。在免疫荧光双标实验中，5d时实验组Jab1与GFAP双阳性细胞数量为383.3±39.1个，较对照组（114.3±35.6个）明显增多（P<0.05）。结论：在大鼠脊髓损伤中，Jab1与P27kip1存在相互作用，Jab1参与脊髓损伤后P27kip1的降解，这可能与脊髓损伤后星形胶质细胞的过度增殖及胶质瘢痕的生成相关。

Survivin和p27kipl在胆囊癌中的表达及相关性研究

目的 检测胆囊癌中Survivin和p27kip1的表达,研究它们与胆囊癌临床病理特征的关系.并探讨两者的相关性.方法 采用免疫组织化学技术检测50例胆囊癌组织、20例胆囊息肉、20例胆囊炎组织中Survivin和p27kip1表达.结果 50例胆囊癌组织中39例Survivin蛋白表达阳性,22例p27kip1蛋白表达阳性.二者表达呈负相关系;Survivin在胆囊息肉和胆囊炎标本中不表达,p27kip1在胆囊息肉和胆囊炎标本中呈高表达;Survivin在胆囊癌中的表达与病人性别、年龄、病理分级、Nevin分期、淋巴结转移无关(P>0.05),p27kip1在胆囊癌中的表达与病理分级、Nevin分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄、性别无明显相关性.结论 Survivin和p27kip1表达异常可能在胆囊癌的发生、发展中起重要的作用,二者在胆囊癌的发生、发展中可能有相互作用;Survivin在胆囊癌中的高表达提示其可能与肿瘤的发生有关;p27kip1有可能成为判断胆囊癌预后的有效指标之一.

过氧化物酶增殖物活化受体γ活化对胰腺癌细胞周期停滞的诱导作用

目的探讨过氧化酶增殖物活化受体γ(PPARγ)在诱导胰腺癌细胞周期停滞中的调节作用.方法胰腺癌细胞系SW1990经10 μmol/L PPARγ配体15-脱氧-前列腺素J2(15 d-PGJ2)、20 μmol/L维甲酸受体α(RXRα)配体9-顺式-维甲酸(9-cis-RA)及其联合培养48 h后,应用流式细胞仪研究细胞周期的改变;通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞周期G1期调节因子p27Kip1、p21Waf1的表达.30只雌性裸鼠皮下接种1×107 SW1990细胞.2周后待肿瘤可触及时,将其随机分为对照组和干预组,后者予以PPARγ激动剂罗格列酮处理.11周后处死裸鼠并取下移植瘤,应用RT-PCR检测罗格列酮对p27Kip1、p21Waf1 mRNA表达的影响.应用免疫组化观察移植瘤组织中p27Kip1、p21Waf1及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果流式细胞术检测提示15d-PGJ2、9-cis-RA及其联合应用可引起细胞周期G1期停滞,S期比例下降.RT-PCR结果显示,同对照组相比,15d-PGJ2组、9-cis-RA组、联合应用组中p27Kip1表达明显增强,p21Waf1表达无明显改变.体内实验也证实罗格列酮仅上调移植瘤组织中p27Kip1 mRNA的表达,而对p21Waf1mRNA表达水平无影响.免疫组化显示p27Kip1、p21Waf1蛋白仅表达于治疗组裸鼠移植瘤组织中,在对照组无表达.治疗组和对照组移植瘤组织中均表达PCNA,但治疗组的阳性表达强度和表达区域均呈下降趋势.结论 PPARγ的活化可诱导胰腺癌细胞周期G1期停滞及抑制S期发展,其机制可能是通过上调p27Kip1和p21Waf1表达、下调PCNA表达而实现的.提示PPARγ可能是胰腺癌治疗的一个新分子靶点.

P27kip1在胰腺癌中的表达及临床意义

目的研究P27kip1在胰腺癌发生发展中的作用及预后意义.方法用免疫组织化学方法研究P27kip1在39例胰腺癌手术切除标本及5例正常胰腺标本中的表达,其结果与临床病理资料及Cyclin D1的表达进行相关性分析.结果 39例胰腺癌中,26 例(66.7%)P27kip1呈低水平表达(阳性细胞数＜50%),仅13 例(33.3%)表达水平与正常胰腺组织相似(阳性细胞数>50%).相关分析显示: P27kip1 表达缺失或下调与肿瘤的不良分化相关(P=0.03 ), 但与性别、年龄及TNM分期无关.Kaplan-Meier生存曲线表明,肿瘤呈高表达的病人术后总体生存期较低表达者明显延长(P<0.01).此外,还发现P27kip1与Cyclin D1的表达呈负相关趋势,但未达到显著性水平(P=0.098).结论 P27kip1在胰腺癌发生、发展中有重要的作用,可作为胰腺癌切除后一种新的预后指标.