首页 > 文献资料
-
青蒿琥酯联合三氧化二砷对NB4细胞增殖与凋亡的影响
目的 研究青蒿琥酯联合三氧化二砷对NB4细胞增殖与凋亡的影响.方法 将不同浓度的青蒿琥酯和三氧化二砷分别作用于NB4细胞48 h,应用MTT法检测细胞增殖情况.将细胞分为空白对照组、青蒿琥酯组、三氧化二砷组、三氧化二砷联合青蒿琥酯组.青蒿琥酯组以0.4 μmol/L青蒿琥酯进行干预,三氧化二砷组以1 μmol/L三氧化二砷干预,三氧化二砷联合青蒿琥酯组以0.4 μmol/L青蒿琥酯及1 μmol/L三氧化二砷进行干预.采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,采用蛋白免疫印迹法检测细胞Bcl-2与Bax蛋白表达.结果 MTT检测显示,与对照组比较,青蒿琥酯0.25、0.50、1.00、2.00、4.00μmol/L组细胞增殖抑制率[分别为(19.26±3.59)％、(36.53±2.67)％、(61.32±2.50)％、(70.30±3.15)％、(86.92±0.02)％]升高(P＜0.05);三氧化二砷1、2、4、8、16 μmol/L组细胞增殖抑制率[分别为(12.69±2.43)％、(64.26±2.02)％、(85.10±2.67)％、(92.06±2.21)％、(93.67±3.36)％]升高(P＜0.05);与三氧化二砷组比较,三氧化二砷联合青蒿琥酯组增殖抑制率[(40.17±5.49)％比(32.23±3.52)％]、细胞G0/G1期细胞比例[(74.20±1.43)％比(66.14±1.78)％]、细胞凋亡率[(58.00±2.41)％比(34.57±1.22)％]升高(P＜0.05);细胞Bcl-2蛋白[(0.45±0.09)比(1.03±0.10)]表达降低(p＜0.05),Bax蛋白[(1.35±0.09)比(1.13±0.09)]表达升高(P＜0.05).结论 青蒿琥酯可明显增强三氧化二砷对NB4细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与下调抗凋亡Bcl-2蛋白表达及上调促凋亡蛋白Bax表达有关.
-
光化学疗法对人白血病细胞凋亡及Fas表达的影响
目的 观察光化学疗法(PUVA)诱导人白血病细胞HL-60、K562、NB4凋亡时对Fas表达的影响.方法 人白血病细胞分别与不同浓度补骨脂素(PS0)、接受或不接受长波紫外线(UVA)照射后共同培养,电镜下观察细胞超微结构改变,荧光定量PCR技术检测细胞Fas基因的表达,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率和Fas蛋白的表达,采用多因素方差分析法进行统计学处理.结果 PUVA处理后的人白血病细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变;PSO、UVA照射及PUVA可使细胞凋亡率增加,可上调白血病细胞Fas在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者(P<0.01).结论 PUVA可诱导人白血病细胞发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射.PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一为上调HL-60细胞Fas基因表达.
-
丹参酮ⅡA诱导白血病NB4细胞分化分子机制研究
目的:探讨丹参酮ⅡA诱导白血病NB4细胞分化的分子机制.方法:0.5 mg·L-1丹参酮ⅡA体外处理NIM细胞72 h后,分别采用显微镜观察细胞形态分化;MTT检测细胞增殖抑制作用;收集细胞并提取总RNA,反转录获得cDNA,再转录并标记成cRNA(Cy3荧光标记),与Express ChipTM.HO4芯片杂交,后对芯片进行扫描和数据分析,检测丹参酮ⅡA诱导NB4细胞分化前后相关基因谱表达的变化.结果:0.5 mg·L-1丹参酮ⅡA可诱导92.8%NB4细胞向终末细胞分化.其中,中、晚幼粒细胞占27.0%;杆状及分叶核粒细胞占68.2%;细胞生长被明显抑制.基因芯片检测发现:3 360条基因中有183条基因差异表达,其中包括23条(5条上调和18条上调)分化相关基因和与细胞凋亡、周期调控、DNA转录、DNA损伤/修复、蛋白转运、信号传导、核受体、细胞因子和生长因子、癌基因和抑癌基因等相关基因.结论:丹参酮ⅡA可能通过调控多种相关基因、特别是分化相关基因的表达诱导白血病细胞分化,本研究有助于阐明丹参酮ⅡA诱导分化抗肿瘤的分子机制.
-
用抑制性差减杂交构建As_2O_3诱导的NB4细胞凋亡相关基因文库
目的: 构建三氧化二砷(As_2O_3)诱导的急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞凋亡相关基因文库.方法:用含4 μmol·L~(-1)As_2O_3和正常培养基培养NB4细胞24 h,抽提总RNA,经逆转录酶合成双链cDNA,分别以砷诱导凋亡组和对照组作为tester和driver,进行双向抑制性差减杂交(supptess-ion sublxactive hybridization,SSH),筛选As_2O_3诱导的NB4细胞凋亡相关基因,将差异表达基因进行PCR扩增并与pGEM-Teasy克隆载体连接,转化DH5 α大肠杆菌,经蓝白斑筛选获得白色阳性克隆,PCR扩增出未知基因片段.结果:成功构建了分别代表在NB4细胞中表达上调和下调的基因文库.结论: 经双向抑制性差减杂交获得了NB4细胞差异表达基因文库,为克隆NB4细胞凋亡相关基因奠定了基础.
-
β-榄香烯衍生物(ET)诱导NB4细胞凋亡的机制研究
目的:于NB4细胞株中,对β-榄香烯衍生物ET(β-榄香烯13-色氨酸)进行抗肿瘤作用研究.方法:体外细胞培养,凋亡检测、流式细胞术和蛋白免疫印迹等技术进行机制研究.结果:ET在低于40μmol·L-1时可以抑制白血病细胞NB4生长并诱导凋亡;ET可以引起细胞内H2O2的蓄积并活化caspase-3;过氧化氢酶可以阻断ET引起的H2O2蓄积和凋亡.结论:ET主要通过H2O2的蓄积引起细胞凋亡.
-
补骨脂素加长波紫外线的光化学疗法诱导NB4细胞凋亡及对Caspase-8、3蛋白表达的影响
目的 研究补骨脂素(psoralen,PSO)加长波紫外线(ultraviolet A,UVA)的光化学疗法(PUVA)对人白血病NB4细胞凋亡和细胞凋亡信号通路的影响.方法体外培养NB4细胞,利用流式细胞术检测不同浓度的PSO(0、5、1 0、20、40 μL)、在不同照射时间(0、5 min)、波长为360 nm的UVA干预后的细胞凋亡率；利用透射电镜检测细胞超微结构的改变；采用免疫细胞化学法(ICC)检测凋亡信号通路中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Cas pase-8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cas pase-3)蛋白表达情况.结果不同浓度的PSO经0、5 min UVA照射后,NB4细胞的凋亡率呈剂量与时间依赖性的增加,而于40 μg/mL浓度的PSO联合5 min UVA照射时达峰值,且二者呈现交互作用(P＜0.01).PUVA处理后的NB4细胞超微结构出现明显的凋亡形态学的改变.PSO、UVA及PUVA均上调Caspase-8、Caspase-3蛋白的表达,但PUVA上调Caspase-3的作用于12h显著强于前两者(P＜0.01),呈时间依赖性,PSO浓度与时间呈现交互作用(P＜0.01).结论 PUVA的佳方案组合为40 μg/mL浓度的PSO联合5 min UVA照射,PUVA可体外激活Caspase-8、Caspase-3基因,具有诱导NB4细胞凋亡作用.
-
三七总甙对NB4细胞促凝活性及诱导分化的影响
目的:研究三七总甙对NB4细胞促凝活性和组织因子表达及诱导分化作用的影响.方法:用三七总甙处理NB4细胞,测定复钙时间观察NB4细胞的促凝活性(procoagulant activity, PCA),RT-PCR检测TF-mRNA的表达;采用四唑蓝(MTT)法检测三七总甙对NB4细胞增殖抑制作用;以NBT还原实验、细胞形态学观察及流式细胞术分析研究三七总甙对NB4细胞诱导分化的影响.结果:(1)不同浓度三七总甙均可显著延长NB4细胞的复钙时间,降低NB4细胞的PCA水平,呈时间浓度依赖性,同时下调组织因子TF-mRNA的表达;(2)三七总甙可部分抑制NB4细胞的增殖;(3)三七总甙可提高NB4细胞NBT还原能力(P＜0.05),细胞形态方面显示单核/巨噬细胞分化趋势.结论:三七总甙可降低NB4细胞的促凝活性及TF-mRNA的表达,诱导NB4细胞部分分化,有望作为新的抗凝药物.
-
ATRA诱导SP100蛋白表达及其对白血病NB4细胞增殖的影响
目的：探讨SP100蛋白在全反式维甲酸（ ATRA）作用NB4细胞过程中的表达及其对NB4细胞增殖和周期的影响。方法实时定量PCR检测SP100 mRNA的表达；Western blot 检测SP100蛋白的表达；免疫荧光检测SP100的定位；CCK-8检测NB4细胞的增殖；流式细胞术检测NB4细胞的周期。结果 ATRA能明显促进NB4细胞中SP100 mRNA水平和蛋白水平，并将SP100由弥散的小点状转变为较大的斑块状；感染SP100-shRNA的NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和病毒空载组（ P＜0.05），并使G2／M期的细胞增多。结论 ATRA促进NB4细胞中SP100蛋白的表达，SP100蛋白可能参与NB4细胞增殖活力的调节。
关键词： 急性早幼粒细胞白血病 SP100-shRNA NB4细胞 增殖 -
重组慢病毒表达PML核定位信号缺失体抑制急性早幼粒白血病细胞系c-Myc蛋白表达
目的 构建携带PML(△NLS)基因的重组慢病毒,研究其对NB4细胞中c-Myc蛋白表达的影响.方法 以质粒pCMV-HA-PML(△NLS)为模板,PCR扩增PML(△NLS)基因,克隆入慢病毒载体LV5-EF1a-GFP/puro,与pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染293T细胞,包装病毒.收取病毒上清液,纯化后感染NB4细胞,荧光倒置显微镜观察感染效率,RT-PCR法检测PML(△NLS) mRNA的转录水平,Western blot检测PML(△NLS)、β-catenin、γ-catenin和c-Myc蛋白表达的变化.CCK-8实验观察细胞增殖.结果 成功构建PML(△NLS)过表达慢病毒,病毒感染NB4细胞,感染效率达82.74％,LV5-PML(△NLS)携带的PML(△NLS)能够在NB4细胞中稳定表达;感染LV5-PML(△NLS)的NB4细胞中β-catnin、γ-catenin和c-Myc蛋白表达下降(P＜0.05);NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和空病毒载体组(P＜0.05).结论 成功构建了重组慢病毒PML(△NLS),PML(△NLS)过表达可促进NB4细胞体外增殖,并抑制c-Myc蛋白表达.
-
重组慢病毒LV5-NE的构建及NE促进NB4细胞增殖
目的 构建重组慢病毒LV5-NE筛选纯NB4/LV5-NE细胞株,探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖的影响,为研究NE致白血病的可能机制奠定基础.方法 以质粒pCMV-myc-NE为模板得到PCR产物NE,将NE基因连接到穿梭载体pGLV10/U6/GFP/Puro后酶切验证,将序列正确的质粒与包装质粒pGag/Pol、pRey、pVSV-G共转染293T细胞.测定病毒滴度.实验分为空白组、LV5-NC组和LV5-NE组,病毒感染NB4细胞72 h后用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞.用Westemblot检测NE在NB4细胞中的蛋白表达以及其切割作用;CCK-8法观察NB4细胞增殖能力;流式细胞术测定NB4细胞周期和凋亡;Western blot检测pAkt和Akt以及Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 成功构建表达NE的慢病毒LV5-NE,筛选得到纯NB4/LV5-NE细胞株,NE对NB4细胞的增殖有明显促进作用(P＜0.05)结论NE在NB4细胞株中稳定表达后中可促进NB4细胞的增殖,其增殖作用可能通过激活PI3K/Akt通路调节.
关键词： 中性粒细胞弹性蛋白酶 慢病毒构建 增殖 凋亡 NB4细胞 -
PML-RARα多肽和NB4细胞体外诱导CTL细胞杀伤活性分析
目的了解PML-RARα多肽和NB4细胞体外诱导体外诱导增殖的T细胞的特异性细胞毒作用.方法采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,经丝裂霉素C处理的NB4细胞或PML-RARα 多肽(LSSCITQGKAIETQSSSSEE)作为刺激原体外诱导脐血单个核细胞增殖.利用LDH方法检测诱导后T细胞的细胞毒性.结果 PML-RARα多肽诱导组第10d和第15d T细胞对NB4细胞的杀伤活性为:49.65±6.7%(p<0.01)和73.13±8.42%(p<0.01),NB4细胞诱导组第10d和第15d T细胞对NB4细胞的杀伤活性为:53.33±8.82%(p<0.01)和74.46±9.57%(p<0.01),而无诱导组的第10d和第15d T细胞对NB4细胞的杀伤活性为:15.93±9.25%和38.19±10.54%,前两组T细胞对NB4细胞的杀伤作用均明显高于对照组.结论 PML-RARα多肽和NB4细胞体外可诱导出特异性T细胞,他们对表达PML-RARα的NB4细胞具有选择性杀伤作用.
关键词： PML-RARα多肽 MLTC NB4细胞 T细胞 细胞毒活性 -
氯法拉滨对NB4细胞的增殖抑制作用及对Bcl-2表达的影响
本研究观察氯法拉滨对人急性髓系白血病NB4细胞的增殖抑制作用并探讨其可能的作用机制.用MTT法观察氯法拉滨0.01 -0.1 μmol/L作用于NB4细胞48 h的增殖抑制作用；氯法拉滨0.01- 0.1 μmol/L作用于NB4细胞24h后,用流式细胞术分析其细胞的凋亡水平,Western blot检测细胞内Bcl-2的蛋白表达.结果表明,氯法拉滨对NB4细胞具有浓度依赖性增殖抑制作用.氯法拉滨作用24h后,NB4细胞凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白表达下调.结论:氯法拉滨能抑制NB4细胞增殖,其作用机制可能与下调Bcl-2的蛋白表达,诱导NB4细胞凋亡有关.
-
全反式维甲酸下调NB4细胞膜联蛋白Ⅱ表达及其机制探讨
目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)的表达影响,分析在ATRA的作用下AnnexinⅡ启动子的荧光素酶活性.方法:培养NB4细胞,用RT-PCR和Western blot技术分别检测1 μmol/L ATRA作用的NB4细胞在不同时间点的AnnexinⅡ表达.构建AnneixnⅡ启动子,用电转染将重组质粒pGL4.15-AnnexinⅡ-promoter瞬时转染NB4细胞,在24 h后用1μmol/L ATRA处理转染的NB4细胞,分析AnnexinⅡ启动子的荧光素酶活性.结果:在转录水平,AnnexinⅡ的表达在48 h时逐渐下降;在蛋白水平,AnnexinⅡ的表达在24h开始下降,而在48 h时下降明显.同时通过ATRA作用AnnexinⅡ启动子,发现ATRA可使AnnexinⅡ启动子活性下降,且随时间的延长荧光素酶活性越来越弱.结论:ATRA可诱导NB4细胞中AnnexinⅡ下调;ATRA可使转染细胞NB4中Annexin启动子荧光素酶活性随时间的延长而逐渐减弱,本研究为深入探讨其分子机制奠定了基础.
-
BCL-2、Caspase-3、NF-κB在黄芪总苷诱导人白血病NB4细胞凋亡过程中作用
本研究探讨黄芪总苷(astragaloside,AST)对急性早幼粒细胞白血病(APL) NB4细胞株的凋亡诱导作用及其分子机制.采用AST处理人APL细胞株NB4,CCK-8比色法检测细胞增殖抑制率,FITC-Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;不同浓度AST作用NB4细胞后RT-PCR检测BCL-2 mRNA表达,Western blot检测NF-κB、BCL-2、caspase-3蛋白表达水平.结果表明,AST作用NB4细胞48 h后,浓度依赖性地抑制NB4细胞的增殖,且随着AST的浓度增加,细胞凋亡率也由4.69％上升到40.85％.RT-PCR结果显示,BCL-2 mRNA表达减弱;Western blot结果显示,NF-κB及BCL-2蛋白表达减弱,caspase-3表达增强.结论:降低NF-κB、BCL-2表达并终激活caspase-3的表达可能是AST诱导NB4细胞株凋亡的机制之一.
-
地西他滨对NB4及K562细胞增殖和凋亡的影响
本研究旨在观察去甲基化药物地西他滨(DAC)对NB4及K562细胞增殖和凋亡的影响.用台盼蓝染色法检测DAC对NB4及K562细胞的增殖抑制作用；流式细胞术检测不同浓度DAC作用后细胞周期的变化和CD11b的表达水平；瑞氏染色法观察药物作用后细胞形态变化；DNA梯形片段电泳分析细胞凋亡.结果表明,DAC显著抑制NB4及K562细胞的增殖(P＜0.05),且呈浓度和时间依赖性,DAC作用NB4及K562细胞72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.113 μmol/L和0.138 μmol/L;不同浓度DAC作用72 h后,0.15 μmol/L DAC处理组两种细胞株G0/G1期细胞比例均显著增高,而S期细胞比例降低(P＜0.05)；两种细胞株的髓系分化抗原CD11b表达水平均升高(P＜0.05)；两种细胞株经不同浓度DAC处理48 h后,0.15μmoVL DAC处理组均出现典型的凋亡梯形DNA条带.结论:DAC抑制NB4及K562细胞增殖,诱导细胞分化,促进细胞凋亡；DAC对NB4细胞作用更明显.
-
EGCG对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖、细胞周期及DAPK1基因甲基化影响的研究
目的:探讨表没食予儿荼素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖、细胞周期的影响及其作用机制.方法:应用EGCG 0、50、75、100及125 μmol/L分别处理NB4细胞24、48、72、96 h后,使用CCK-8法检测各时间点和浓度的细胞增殖水平,流式细胞术检测不同浓度EGCG处理NB4细胞48 h后的细胞周期情况,RT-PCR检测DNMT1、DNMT3a、DAPK1 mRNA的表达水平,甲基化特异性PCR检测DAPK1基因的甲基化状态,Western blot检测DAPK1蛋白的表达情况.结果:EGCG明显抑制NB4细胞增殖并诱导细胞阻滞于G0/G1期,且呈时间-浓度依赖性(r =0.916).EGCG呈浓度依赖性下调NB4细胞DNMT1、DNMT3a的表达,且对DNMT3a的作用更为明显.随EGCG浓度增加,DAPK1基因的甲基化程度减弱(r=-0.813),DAPK1 mRNA和蛋白表达上调(r=0.96,r=0.991).结论:EGCG通过抑制DNMT1和DNMT3a基因的表达,下调DAPK1S基因的甲基化程度,从而抑制NB4细胞增殖和诱导其细胞周期阻滞.
-
应用NB4细胞株建立SCID beige小鼠急性早幼粒细胞白血病病理模型
目的:本研究旨在建立稳定、有效、重复性好的人急性早幼粒白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠移植瘤模型,观察模型的病程特点和生物学行为.方法:将3-5周龄SCID beige小鼠随机分为实验组和对照组;实验组鼠尾静脉注射对数生长期的NB4细胞5×106个/只,动态监测小鼠外周血白细胞数和外周血涂片中人早幼粒细胞阳性率;应用形态学和组织病理学方法确认白血病细胞浸润肝、脾、肺、肾、脑等器官情况,Western blot检测组织中PML-RARa融合蛋白表达情况.结果:接种NB4细胞2周内的实验组SCID小鼠外周血白细胞计数与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);同时,血涂片姬姆萨染色后镜检未见到NB4细胞;接种第21天和第28天实验组SCID小鼠外周血白细胞计数分别为(4.79±1.13)×109/L和(7.62±2.24)×109/L,显著高于对照组(P＜0.05);血涂片吉姆萨染色后可见NB4细胞比例分别占(2.14±0.63)％和(6.6±2.76)％;形态学观察显示,接种21 d后实验组SCID小鼠体内出现单个或多个肿瘤实体包块;同时,组织切片HE染色表明,肝、脾、肺、肾、脑组织均有不同程度的瘤细胞浸润;细胞免疫荧光结果显示,实验组小鼠骨髓细胞CD33表达呈阳性(P＜0.05);Western blot数据证实,肝、肾、脑组织中检测到不同水平的PML-RARa融合蛋白表达.结论:SCID小鼠鼠尾静脉注射NB4细胞可成功构建人急性早幼粒细胞白血病小鼠模型,该模型能模拟临床白血病累及骨髓和弥漫生长特点,是研究人类白血病发病机理及实验治疗的良好模型.
关键词： 早幼粒细胞白血病 小鼠模型 NB4细胞 SCID beige小鼠 -
重亚硫酸氢盐测序法检测Wnt信号通路抑制基因在急性早幼粒细胞白血病细胞中甲基化变化
目的:应用重亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测急性早幼粒细胞白血病细胞株(NB4) Wnt信号通路抑制基因启动子区CPG岛的甲基化状态,筛选NB4细胞中高甲基化的Wnt信号通路抑制基因,并探讨BSP法作为定量研究基因甲基化方法的优缺点.方法:以NB4细胞为研究对象,20例健康人单个核细胞为对照;常规提取DNA并用亚硫酸氢盐处理,然后用PCR扩增目标序列,应用重亚硫酸氢盐测序法(BSP)分析在NB4细胞中Wnt信号通路抑制基因基因的甲基化状态.并通过与甲基化特异性PCR (methylation specific PCR,MSP)、焦磷酸测序技术(pyrosequencing)比较、评价BSP法检测NB4细胞Wnt信号通路抑制基因甲基化状态的优缺点.结果:BSP产物克隆测序检测NB4细胞Wnt信号通路抑制基因甲基化发生率分别为:WIF-1基因95.26％,DKK3基因86％,SFRP1基因81.67％,SFRP2基因95.71％,SFRP4基因85％,SFRP5基因95％;20例健康人单个核细胞为对照组中Wnt信号通路抑制基因甲基化发生率分别为:WIF-1基因1.5％,DKK3基因4.2％,SFRP1基因0％,SFRP2基因0.9％,SFRP4基因2.5％,SFRP5基因1.75％.与正常人MNC相比,NB4细胞的Wnt信号通路相关抑制基因启动子甲基化率明显增高.结论:急性早幼粒细胞株NB4细胞中存在Wnt信号通路多个抑制基因高甲基化状态.此类基因异常甲基化有可能成为急性早幼粒细胞白血病的早期诊断指标和治疗靶点.
-
亚硒酸钠和三氧化二砷诱导人急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞凋亡机制的比较
为比较亚硒酸钠(Na2SeO3)和三氧化二砷(As2O3)诱导NB4细胞凋亡的作用机制,本研究应用MTT实验、DNA琼脂糖电泳、细胞内DNA含量检测研究细胞生长抑制和细胞凋亡,用化学发光法、化学比色法检测细胞内活性氧和还原型谷胱甘肽,用流式细胞术检测细胞内线粒体膜电位.结果显示:5μmol/L亚硒酸钠和1μmol/L三氧化二砷作用24小时后均能诱导NB4细胞凋亡.在诱导细胞凋亡的过程中,亚硒酸钠和三氧化二砷组均伴有细胞内活性氧水平的提高和线粒体膜电位下降,但在亚硒酸钠组还伴有细胞内还原型谷胱甘肽下降.用N乙酰半胱氨酸提高细胞内还原型谷胱甘肽后,增强了硒诱导NB4细胞凋亡和氧化应激的作用,但是抑制了砷诱导细胞凋亡和氧化应激的作用.结论:亚硒酸钠和三氧化二砷同样可以诱导NB4细胞的凋亡,但是二者的作用机制可能存在差异.
关键词： 亚硒酸钠 三氧化二砷 急性早幼粒细胞白血病细胞系 NB4细胞 细胞凋亡 -
亚硒酸钠在诱导NB4细胞凋亡的过程中抑制了转录因子NFκB的激活
本实验研究亚硒酸钠在诱导NB4细胞凋亡过程中对转录因子NFκB活性的影响.用Westem印迹法检测细胞核提取物中NFκB亚基P65的含量;用形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡;用MTT法观察对细胞的生长抑制.结果显示:亚硒酸钠(≥5μmol/L)可抑制NB4细胞生长和诱导细胞凋亡,同时亚硒酸钠作用时间和浓度相关性地抑制了转录因子NFκB的激活.结论:抑制NFκB激活可能是亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的途径之一.
