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抗诱变中草药的配伍研究
目的:选择具有抗诱变作用的中草药进行配伍,筛选出抗诱变作用佳的配伍方案,用于肿瘤的预防.方法:根据诱变剂敏感性与肿瘤易感性的关系的理论,通过增强染色体的稳定性来降低肿瘤易感性.采用诱变剂敏感性实验方法,用博莱霉素作为诱变剂,将不同剂量的具有抗诱变作用的中草药组合成配伍,采用L9(34)正交表进行实验,以染色体断裂率为效应指标,观察各剂量组合的配伍的抗诱变效果.结果:经极差分析,配伍中各中草药主次因素排列为.佳配比A1B3C3D1.结论:对诱变剂敏感的人群,可用此配伍增加染色体对诱变剂的拮抗作用,而增加染色体的稳定性.
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猴头多糖(HEPS)遗传毒性评价及抗突变实验研究
目的与方法采用经典Ames试验评价猴头多糖(HEPS)的遗传毒性及抗突变作用.结果 HEPS 30 mg/皿、15 mg/皿、7.5 mg/皿、3.75 mg/皿、1.875 mg/皿5个剂量组在+S9和-S9时,均未能引起TA 98和TA 100两测试菌株回变菌落数增加,亦未观察到剂量反应关系.本次研究HEPS 20 mg/皿、10 mg/皿、5 mg/皿三个剂量组都可显著抑制阳性物敌克松和叠氮钠引起的TA 100回变菌落数增加(P＜0.05).结论本实验条件下HEPS致突变作用阴性,HEPS具有抗突变作用.
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葡萄籽原花青素及其与酪蛋白联合对大鼠辐射损伤的保护作用
背景:辐射损伤可使机体体内产生大量的活性氧自由基,从而对机体各部位造成过氧化损伤.葡萄籽原花青素(GSP)具有极强的抗氧化及清除自由基活性,但对辐射损伤的保护作用研究尚少.目的:观察GSP及其与酪蛋白联合对60Co-γ射线照射损伤大鼠过氧化损伤的保护作用.设计:以实验动物为研究对象的观察对比研究.单位:第三军医大学大坪医院营养科.材料:实验于2004-06/2004-07在第三军医大学野战外科研究所三室完成.研究对象为80只清洁级健康Wistar大鼠,雌雄各半,体质量180～220 g.方法:实验设正常对照、照射对照、GSP、GSP+酪蛋白联合4组,每组20只,GSP组在常规饲料基础上添加1%的GSP,联合组添加1%的GSP和5%的酪蛋白,各组自由进食.10d后除正常对照组外,其余大鼠均接受7Gy的60Co-γ全身一次性照射,照射后第7 d,每组随机各取存活大鼠6只宰杀取材.主要观察指标:血清丙二醛(MDA)水平、血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、脾脏指数以及外周血白细胞计数(WBC).结果:受照后大鼠血清MDA显著升高,SOD活力显著下降,GSP组和联合组MDA显著低于照射对照组(P＜0.01),SOD活力显著高于照射对照组(P＜0.01).辐射损伤后,大鼠脾脏明显萎缩,脾脏指数下降,WBC严重降低.GSP组和联合组脾脏指数明显高于照射对照组(P＜0.05),WBC显著高于照射对照组(P＜0.01).结论:单独应用GSP和GSP与酪蛋白联合应用均可有效减轻放射对大鼠的过氧化损伤作用,并对放射引起的白细胞下降具有改善作用,而联合应用效果更好.
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抗诱变中草药的正交实验
目的:通过正交实验确定抗诱变中草药人参、五加皮、猪苓和甘草保护染色体稳定性的佳配伍方案.方法:采用徐道觉(Hsu TC)建立的以博来霉素(BLM)为诱变剂的诱变剂敏感性实验方法,将上述4味中草药药量取3个水平:大剂量(常用量2倍)、常用剂量及零水平;把此4味中药随机分组,人参: C、五加皮:D、猪苓:A、甘草:B;分别在培养的人外周血淋巴细胞中加入不同剂量配比的人参、五加皮、猪苓和甘草,比较各剂量配比中草药干预后的染色体断裂率(b/c:每分裂相染色体的断裂数),观察它们的抗诱变效果.结果:人参、五加皮、甘草和猪苓的极差分别为16、14、 9和6,配伍中4味中草药主次顺序依次为人参、五加皮、猪苓、甘草;佳配比A1B2C1D2.结论:采用佳染色体稳定剂配比方案(A1B2C1D2)进行药物配伍可以大限度地抵抗诱变剂BLM的作用,增强染色体的稳定性.
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人参合剂的抗诱变作用
目的:探讨人参、五加皮、甘草及猪苓4味中药合剂对诱变剂导致染色体损伤的拮抗作用.方法:选择20例健康献血者为实验对象,分为正常对照组、博来霉素(BLM)诱变组、中药合剂组和中药合剂抗诱变组.利用诱变剂敏感性实验方法,所有实验对象均于实验当日常规采集外周血,肝素抗凝,将0.3 mL外周血接种于培养液中,37℃恒温培养箱中静置培养72 h.收获细胞及制玻片后,姬姆萨染液染色.检测BLM对正常人外周血淋巴细胞染色体的影响,观察以人参、五加皮、甘草、猪苓4种中药的混合制剂作为染色体稳定剂的抗诱变作用.结果:BLM诱变组每细胞染色单体断裂(0.733±0.275)(b/c值)明显高于正常对照组(0.018±0.076)(P＜0.01),BLM诱变组(0.733±0.275)与中药合剂抗诱变组(0.566±0.761)比较b/c值差异有显著性(P＜0.01).结论:BLM导致正常人外周血淋巴细胞染色体的断裂率明显增高,人参、五加皮、甘草及猪苓4种中药合剂可以明显抑制BLM诱发的染色体断裂,提示此人参合剂可以作为染色体稳定剂,能够提高机体基因组稳定性.
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头颈部肿瘤患者及其一级亲属对诱变剂的敏感性和人参茎叶皂苷Rg3的抗诱变作用
目的:研究头颈部肿瘤的遗传因素及人参茎叶皂苷Rg3的抗诱变作用.方法:采用诱变剂敏感性实验检测肿瘤高危人群.结果:患者组与一级亲属组中博莱霉素(BLM)所致的每细胞染色单体断裂率(chromatid breaks per cell,b/c值)比较差异无显著性(P＞0.05),但明显高于健康对照组(P＜0.01),而人参茎叶皂苷Rg3对BLM所致的每细胞染色单体断裂率均有明显的抑制作用(P＜0.01).结论:头颈部肿瘤患者的一级亲属应列为肿瘤易患高危人群,人参茎叶皂苷Rg3可以提高机体抗癌能力.
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NADH对DENA所致L02 细胞H-ras基因突变及c-erbB-2表达的影响
目的:研究还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)对二乙基亚硝胺(N-nitrosodiethylamine,DENA)诱变L02细胞过程中H-ras基因突变及c-erbB-2表达的影响.方法:聚合酶链式反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)法检测NADH对DENA所诱发的L02细胞H-ras基因突变的影响;Southern印迹法分析其对c-erbB-2基因表达的影响;RT-PCR法检测NADH对rasp21、c-erbB-2 mRNA表达水平的调控.结果:经NADH防护的DL02-Ⅲ细胞和DL02-B 细胞的H-ras exon1突变率分别降至25.0%(3/12)和41.7%(5/12),与DENA致突变组相比,差异有统计学意义(P<0.05);Southern 检测结果显示,NADH可下调由DENA所诱变的L02细胞中c-erbB-2基因的表达提高;RT-PCR检测结果提示,DENA诱变组细胞的rasp21、c-erbB-2 mRNA表达水平上调,而经NADH处理后,与DENA诱变组相比,可明显降低rasp21和c-erbB-2 mRNA表达水平上调的程度.结论:NADH抗突变作用的可能机制,与其在基因突变以及在转录水平对H-ras、c-erbB-2等相关癌基因的调控有关.
