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人肾癌细胞株miRNA表达差异临床意义研究
目的 miRNA的异常表达会导致肿瘤包括肾癌的产生与增殖.但是miRNA如何促进肾细胞癌的产生与增殖目前仍不十分明确.本研究旨在比较769-P人肾癌细胞株与正常肾组织中表达的miRNA,找出表达差异的miRNA.进一步研究这些表达差异的miRNA在肾细胞癌中表达的临床意义.方法 采用高通量测序技术检测769-P人肾癌细胞株与正常肾脏组织中的miRNA进行测序并对比,比较两者miRNA的表达差异.同时选取2015-06-02-2017-07-02厦门市第二医院20例肾透明细胞癌及癌旁组织(距离组织1 cm),镜下证实为正常的肾脏组织的临床液氮保存标本.进一步比较miRNA在肾透明细胞癌与正常肾组织中的表达差异.结果 769-P人肾癌细胞株与正常肾脏组织中的miR-NA进行测序对比后共检测到19个表达差异有统计学意义的miRNA,均P＜0.05.其中miR-141-3p和miR-199a-5p在769-P人肾癌细胞株中表达明显低于正常肾组织,两者相比差异有统计学意义,P值分别为0.0 218和0.0 069.进一步研究发现,19个miRNA在肾透明细胞癌与正常肾组织仅有miR-141-3p和miR-199a-5p表达差异有统计学意义,P值分别为0.0 057和0.0 369.结论 肾癌中异常表达的miRNA很多,其作用机制复杂,不明确.肾癌中miR-141-3p和miR-199a-5p表达下降促进肾透明细胞癌的增殖,可能成为一类新的临床诊断与基因治疗的分子标志物.
关键词： miR-141-3p miR-199a-5p 肾透明细胞癌 高通量测序 -
miR-141-3p靶向TGF-β2对人前列腺癌C4-2B细胞恶性生物学行为的影响
目的:探讨miR-141-3p与转化生长因子-β2(transforming growth factor β2,TGF-β2)基因的靶向关系及其对人前列腺癌细胞株C4-2B恶性生物学行为的影响.方法:转染miR-141-3pmimic后,qRT-PCR检测C4-2B细胞miR-141-3p和TGF-β2mRNA的表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-141-3p与TGF-β2的靶向关系.miR-141-3p mimic与TGF-β2过表达载体单独或共转染C4-2B细胞后,Western blotting检测转染C4-2B细胞中TGF-β2蛋白的表达水平,Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力.结果:miR-141-3p mimic转染后,C4-2B细胞miR-141-3p的相对表达水平明显提高、TGF-β rnRNA的相对表达水平明显降低(均P＜0.01).miR-141-3p mimic与野生型报告载体共转后,荧光素酶的活性显著降低(P＜0.01);miR-141-3p mimic与突变型报告载体共转后,荧光素酶的活性没有明显变化(P＞0.05);miR-141-3p mimic添加到pc-TGF-β2转染的C4-2B细胞后,细胞增殖倍数明显降低、凋亡细胞数目显著增加、细胞侵袭能力显著降低(均P＜0.01).结论:miR-141-3p与TGF-β2存在靶向关系,且两者协同影响人前列腺癌C4-2B细胞增殖、侵袭能力并诱导其凋亡.
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miR-141-3p在胃癌组织和患者血浆中的表达及其临床意义
目的:检测miR-141-3p在胃癌组织及患者血浆中的表达水平,探讨其表达水平与患者病理特征和预后的关系.方法:收集河北医科大学第四医院普外科2012年5月至2013年1月胃癌根治性手术切除的组织标本及术前外周静脉血标本44例,每例标本采集肿瘤组织(非坏死部分)和配对的癌旁组织.采用实时荧光定量PCR法检测miR-141-3p在胃癌组织、癌旁组织、血浆及健康志愿者血浆(25例)的表达情况,分析miR-141-3p的表达水平与胃癌患者DFS及临床病理特征的关系.结果:miR-141-3p在胃癌组织中的表达明显降低,在血浆中的表达水平明显升高(均P＜0.01).在胃癌组织中miR-141-3p高表达组DFS明显高于低表达组(21.8 vs 10.3个月,P＜0.01),且miR-141-3p在癌组织中的表达水平与患者DFS呈正相关(P＜0.01).在血浆中miR-141-3p的高表达组DFS明显低于低表达组(9.1 vs 21.0个月,P＜0.01),且miR-141-3p血浆中的表达水平与患者DFS呈负相关(P＜0.01).miR-141-3p在胃癌患者血浆中表达水平与肿瘤TNM分期、淋巴结转移及脉管瘤栓相关(P＜0.01).结论:miR-141-3p在胃癌组织中表达显著降低且与患者预后呈正相关,其在患者血浆中表达显著升高且与患者预后呈负相关,表明miR-141-3p可作为胃癌早诊早治及患者临床预后判定的潜在标志物.
关键词： 胃癌 miR-141-3p 癌组织 血浆 预后 -
结直肠癌患者血浆中miR-141-3p及其靶基因的表达变化及相关性分析
目的 探讨miR-141-3p及其靶基因在结直肠癌患者血浆中的表达,及其与临床病理和治疗预后的关系.方法 收集结直肠癌患(试验组)者手术前后的血浆和健康志愿者(对照组)血浆各150例,利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血浆中miR-141-3p、磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)、转化生长因子Ⅱ型受体(TGF-β2)和p53的表达水平,统计分析其与结直肠癌病理特征和手术疗效的相关性.结果 手术前与对照组比较,试验组血浆中miR-141-3p和p53的表达显著上升(P＜0.01),而PTEN和TGF-β2的表达则显著下降(P＜0.01).手术后,试验组血浆中miR-141-3p和p53的表达显著下调(P＜0.05),而PTEN和TGF-β2的表达则显著上调(P＜0.05).miR-141-3p的表达水平与结直肠癌肿瘤分化和浸润程度、TNM分期及转移等有显著相关性(P＜0.05).miR-141-3p高表达患者的术后复发率较高、生存率也较差(P＜0.05).结论 血浆miR-141-3p在结直肠癌临床诊断和治疗预后中有潜在应用价值.
关键词： 结直肠肿瘤 miR-141-3p 血浆 消化系统外科手术 靶基因 -
miR-141-3p靶向调控前列腺癌LNCaP细胞雄激素受体的表达
目的 检测LNCaP细胞内miR-141-3p对雄激素受体(AR)基因靶向调控作用,明确AR是否为miR-141-3p的靶基因.方法 将miR-141-3p mimics转染LNCaP细胞后,利用反转录PCR和Western blot法分别检测LNCaP细胞中AR的mRNA和蛋白表达.采用PCR方法扩增得到含有miR-141-3p结合位点的AR mRNA 3'非翻译区(3'UTR)片段,并插入到pmiR-report载体萤光素酶基因的3'下游区,并将所构建载体命名为pmiR-AR-3' UTR;萤光素酶报告基因检测试剂盒检测miR-141-3p对pmiR-AR-3'UTR靶向抑制效果.结果 转染miR-141-3p mimics可降低LNCaP细胞内源AR的mRNA和蛋白水平;萤光素酶活性检测结果显示:与对照组相比,miR-141-3p可明显抑制pmiR-AR-3'UTR萤光素酶活性.结论 AR是miR-141-3p的靶基因.
关键词： 前列腺癌 雄激素受体 miR-141-3p
