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RNA激活(RNA activation文献资料
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RNA激活上调p21WAF1/CIP1基因表达对肺癌细胞增殖和凋亡影响的研究
目的:探讨应用RNA激活(RNAa)技术上调p21WAF1/CIP1(p21)表达对人肺癌H441细胞增殖和凋亡的影响.方法:设计靶向抑癌基因p21WAF1/CIP1启动子DNA序列互补的双链RNA分子(dsp21),转染H441细胞后应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法检测p21WAF1/CIP1基因mRNA及蛋白质的表达变化,噻唑蓝(MTT)法检测H441细胞增殖速度的变化,流式细胞仪检测H441细胞凋亡率的变化.结果:dsp21转染H441细胞72 h后p21WAF1/CIP1表达显著上调.RT-PCR灰度比值结果显示,空白对照组、阴性对照组和实验组p21WAF1/CIP1 mRNA相对表达量分别为(38.1士2.5)％、(33.5±3.9)％和(96.5±2.3)％,差异有统计学意义,F=87.0,P＜0.01；蛋白质印迹法结果显示,空白对照组、阴性对照组和实验组p21WAF1/CIP1蛋白相对表达量分别为(45.7±2.2)％、(43.2±3.1)％和(93.6±2.5)％,差异有统计学意义,F＝79.0,P＜0.01；经dsp21作用的H441细胞增殖受到明显抑制,凋亡率较对照组明显升高,F＝10.2,P＜0.01.结论:RNAa技术激活p21WAF1/CIP1基因表达并抑制肺癌H441细胞增殖,诱导细胞凋亡,为肺癌的基因治疗提供了新的思路和方法.
