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p53异构体与胃癌发生发展的相关性及其机制
目的:探讨p53异构体与胃癌发生、发展中的相关性及其机制.方法:收集胃癌、萎缩性胃炎、正常胃黏膜组织各30例,应用NT-PCR法及免疫组织化学方法检测3组中的p53异构p53β、Δ133p53和PTEN、Bax、p21 waf1/cipl基因的表达情况,并进行统计学分析.结果:p53β在胃癌、慢性萎缩性胃炎及正常胃黏膜组织中的表达率分别为26.7％、33.3％和70.0％,胃癌组织p53β的表达明显低于正常胃组织(P＜0.01);Δ133p53在胃癌、慢性萎缩性胃炎及正常胃黏膜组织中的表达率分别为70.0％、50.0％,23.3％,胃癌组织Δ133p53的表达明显高于正常胃组织(P＜0.01);PTEN在胃癌、慢性萎缩性胃炎及正常胃黏膜组织中的表达率分别为53.3％、76.7％、86.7％; Bax在胃癌、慢性萎缩性胃炎及正常胃黏膜组织中的表达率分别为36.7％、73.3％、83.3％;p21waf1/cip1在胃癌、慢性萎缩性胃炎及正常胃黏膜组织中的表达率分别为46.7％、50.0％、86.7％,胃癌组织中PTEN、Bax及p21waf1/cip1的表达均明显低于正常胃组织(P＜0.05).p53p和PTEN、Bax、p21waf1/cip1在胃癌中表达均呈正相关关系,而Δ133p53和PTEN、Bax、p21waf1/cip1在胃癌中表达均呈负相关关系(P＜0.05).结论:p53异构体p53β、Δ133p53在胃癌中的差异性表达,可能通过调控Bax、p21waf1/cip1及PTEN等下游基因而抑制p53的活性,对胃癌的发生发展产生了重要作用.
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RNA激活上调p21WAF1/CIP1基因表达对肺癌细胞增殖和凋亡影响的研究
目的:探讨应用RNA激活(RNAa)技术上调p21WAF1/CIP1(p21)表达对人肺癌H441细胞增殖和凋亡的影响.方法:设计靶向抑癌基因p21WAF1/CIP1启动子DNA序列互补的双链RNA分子(dsp21),转染H441细胞后应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法检测p21WAF1/CIP1基因mRNA及蛋白质的表达变化,噻唑蓝(MTT)法检测H441细胞增殖速度的变化,流式细胞仪检测H441细胞凋亡率的变化.结果:dsp21转染H441细胞72 h后p21WAF1/CIP1表达显著上调.RT-PCR灰度比值结果显示,空白对照组、阴性对照组和实验组p21WAF1/CIP1 mRNA相对表达量分别为(38.1士2.5)％、(33.5±3.9)％和(96.5±2.3)％,差异有统计学意义,F=87.0,P＜0.01；蛋白质印迹法结果显示,空白对照组、阴性对照组和实验组p21WAF1/CIP1蛋白相对表达量分别为(45.7±2.2)％、(43.2±3.1)％和(93.6±2.5)％,差异有统计学意义,F＝79.0,P＜0.01；经dsp21作用的H441细胞增殖受到明显抑制,凋亡率较对照组明显升高,F＝10.2,P＜0.01.结论:RNAa技术激活p21WAF1/CIP1基因表达并抑制肺癌H441细胞增殖,诱导细胞凋亡,为肺癌的基因治疗提供了新的思路和方法.
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细胞周期G1/S转换调控因子在喉癌癌变过程中的表达
目的:探讨喉癌癌变过程中p21WAF1/CIP1、p53和cyclin Dl表达的临床病理学意义.方法:用免疫组化检测20例正常粘膜、40例不典型增生病变和60例喉癌组织中p21WAF1/CIP1、p53和cyclin Dl表达.结果:①p21WAF1/CIP1、p53和cyclin Dl阳性表达定位于细胞核;②在喉癌癌变过程中,喉正常粘膜、不典型增生病变和喉癌中p21WAF1/CIP1阳性表达率分别为95.0%(19/20),75.0%(30/40)和63.3%(38/60)(P<0.05);p53阳性表达率分别为:0%、30.0%(12/40)和61.7%(37/60)(P<0.001);cyclin Dl阳性表达率分别为5.0%(1/20)、30.0%(12/40)、53.3%(32/60)(P<0.001);③p21WAF1/CIP1在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率分别为76.2%(16/21)、65.5%(19/29)和30.0%(3/10)(P<0.05);④cyclin Dl和p21WAF1/CIP1阳性表达显著相关,p21WAF1/CIP1和p53表达无相关性.结论:①喉癌癌变过程中p53和cyclin Dl阳性表达率呈逐渐升高的趋势,而p21WAF1/CIP1阳性表达率呈逐渐降低的趋势;②p53和cyclin Dl异常表达是喉癌发生中早期分子事件;③p21WAF1/CIP1表达与喉癌细胞分化程度有关;④细胞周期调控因子p21WAF1/CIP1、p53和cyclin Dl相互调控机制在喉癌发展中起重要作用.
关键词： 喉肿瘤 p21waf1/cip1基因 p53基因 细胞周期蛋白D1 免疫组织化学 -
经胎盘诱发大鼠脑肿瘤抑癌基因p21的表达
目的:通过ENU诱发子代大鼠脑肿瘤的模型,对子代鼠脑肿瘤发生前、后p21基因的变化进行连续地观察,探讨抑癌基因p21与胶质瘤发生、发展的关系.方法:(1)通过对孕18d大鼠腹腔注射亚硝基乙基脲(ENU,75mg/kg)的方法,建立子代鼠脑肿瘤模型;(2)应用免疫组化的方法,对子代鼠90d、120d和150d鼠脑p21蛋白表达进行观察.结果:p21蛋白的表达减弱或消失,见于子代鼠出生后90d、120d和150d,特别是90d组,且150 d组中肿瘤内与瘤周组织之间有统计学差异.结论:异常p21蛋白的表达存在于肿瘤发生前、发生早期及发生后各阶段,进一步说明p21WAF1/CIP1发生突变、其表达减弱或消失是脑胶质瘤起源的重要原因.p21基因的功能失常可能是导致基因链活动紊乱的因素之一,而肿瘤的形成还可能需要其它因素参与.
关键词： 胶质瘤 p21waf1/cip1基因 亚硝基乙基脲(ENU) -
腺病毒介导的p21基因联合顺铂对胃癌细胞的影响
目的:探讨腺病毒介导的p21WAF1/CIP1基因(p21基因)在人胃癌细胞系SGC-7901中的表达及其联合顺铂化疗对胃癌细胞生长和荷瘤小鼠的作用.方法:采用腺病毒载体携带p21基因感染人胃癌细胞系,用流式细胞仪测定p21基因对SGC-7901细胞周期的影响,并与DDP联合应用,观察p21基因和(或)DDP对SGC-7901细胞系和荷瘤小鼠的作用.结果:腺病毒介导的p21基因可在胃癌细胞系SGC-7901中过度表达,使胃癌细胞系S期含量下降,抑制其生长,并可诱导胃癌细胞的凋亡;p21基因联合DDP作用使SGC-7901细胞G2/M含量明显下降,并可抑制荷瘤小鼠肿瘤细胞的生长,且联合作用比单一用药作用更明显.结论:腺病毒介导的p21基因可抑制人胃癌细胞系的生长,抑制瘤体的生长,结合化疗药物其作用更强,为临床应用提供了依据.
关键词： 胃肿瘤 p21waf1/cip1基因 基因治疗 -
细胞周期蛋白D1和p21WAF1/CIP1在喉癌癌变过程中表达及其意义
目的:研究喉癌变过程中细胞周期蛋白(cyclin)D1和p21WAF1/CIP1表达及其临床病理学意义.方法:用免疫组化检测20例正常黏膜、40例不典型增生病变和60例喉癌组织中cyclinD1和p21WAF1/CIP1的表达.结果:①cyclin D1和p21WAF1/CIP1阳性表达定位于细胞核.②在喉癌癌变过程中,喉正常黏膜、不典型增生病变和喉癌中cyclin D1阳性表达率分别为:5.0%(1/20),30,0%(12/40),53.3%(32/60)(P＜0.001);p21WAF1/CIP1阳性表达率分别为:95.0%(19/20),75.0%(30/40)和63.3%(38/60)(P＜0.05).③p21WAF1/CIP1在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率分别为:76.2%(16/21),65.5%(19/29)和30.0%(3/10)(P＜0.05);p21WAF1/CIP1阳性表达与肿瘤细胞的分化有关.④cyclin D1和p21WAF1/CIP1阳性表达显著相关.结论:①喉癌癌变过程中cyclin D1阳性表达率呈逐渐升高的趋势,而p21WAF1/CIP1阳性表达率呈呈逐渐降低的趋势.②cyclin D1异常表达是喉癌发生中早期分子事件.③p21WAF1/CIP1表达与喉癌细胞分化程度有关.④cyclin D1和p21WAF1/CIP1阳性表达显著相关.
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冷休克对 PG、HeLa细胞周期调控及p21WAF1/cip1蛋白表达的影响
目的研究冷休克对p53基因突变的PG细胞、p53野生型的HeLa细胞的周期调控及p21WAF1/cip1蛋白表达的影响.方法将PG、HeLa细胞置4℃冷冻4 h,使细胞发生冷休克,用流式细胞仪分析细胞DNA含量及凋亡细胞百分率,Westernblot检测p21WAF/cip1蛋白的表达.结果冷休克诱导PG、HeLa细胞发生G2/M期周期阻滞及凋亡,p21WAF/cip1蛋白表达增高(PG以12 h、HeLa以18 h为显著).冷休克诱导PG、HeLa细胞发生G2/M期周期阻滞及凋亡与p21WAF/cip1蛋白表达增高同步.结论冷休克诱导PG、HeLa细胞发生G2/M期阻滞及凋亡、p21WAF/cip1表达的增高与细胞的p53状态无关.
关键词： 冷休克 p21waf1/cip1基因 G2/M期阻滞 -
P21WAF1/CIP1和P53基因表达与膀胱癌生物学行为的关系
目的:探讨膀胱癌P21WAF1/CIP1、P53基因的表达、相互间的调控及其与生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学ABC方法检测122例有随访结果的膀胱癌患者的P21WAF1/CIP1、P53基因表达,并采用双变量相关分析、Logistic回归分析和Kaplan-Meier法分析.结果:P53野生型肿瘤中P21WAF1/CIP1阳性表达率明显高于P53突变型肿瘤;P53突变型肿瘤中保持P21WAF1/CIP1阳性表达者具有与P53野生型肿瘤同样低的复发率和较长的生存期.结论:维持P21WAF1/CIP1的表达可清除P53突变蛋白的有害作用;根据P21WAF1/CIP1表达状况,结合临床分期可对膀胱癌的恶性程度及预后作出更准确的评估,对拟定治疗方案有重要的指导意义.
关键词： 膀胱肿瘤 p21waf1/cip1基因 p53基因 生物学 -
胃癌中p21WAF1/CIP1、细胞周期素D1、p53表达的相关性
目的探讨p21WAF1/CIP1、细胞周期素D1(cyclin D1)、p53在胃癌中表达之间的相关性.方法应用原位杂交技术检测p21WAF1/CIP1 mRNA、细胞周期素D1 mRNA及免疫组化技术检测p53蛋白在胃癌中的表达.结果 p21WAF1/CIP1 mRNA在癌组织及癌旁正常粘膜中阳性表达率各为93.15%(68/73)及76.71%(56/73),二者相比具有显著差异(P<0.05).Cyclin D1 mRNA在癌组织及癌旁正常粘膜中阳性表达率各为54.79%(40/73)及30.16%(22/73),二者具有显著差异(P<0.05).p53蛋白在胃癌中的阳性表达率为32.87%(24/73), p53过表达者,其p21WAF1/CIP1 mRNA表达较p53阴性者为低,二者存在显著差异(P<0.05).p21WAF1/CIP1表达与细胞周期素D1表达呈负相关.结论 p21WAF1/CIP1、Cyclin D1、p53的异常表达及它们之间可能存在的相互作用,对于胃癌的发生发展具有重要意义.
关键词： 胃癌 p21waf1/cip1基因 细胞周期素D1 p53基因 -
腺病毒介导的P21WAF1/CIP1基因诱导血管平滑肌细胞凋亡
目的应用重组腺病毒载体介导的P21WAF1/CIP1基因转染血管平滑肌细胞(VSMC),探讨P21WAF1/CIP1基因对平滑肌细胞凋亡的诱导作用. 材料与方法 P21WAF1/CIP1的重组腺病毒载体转染体外培养的猪主动脉平滑肌细胞,应用RT-PCR检测外源性P21WAF1/CIP1基因的表达,并通过细胞形态、原位细胞凋亡分析、流式细胞仪和细胞生长曲线等方法观察P21诱导VSMC凋亡,抑制VSMC增殖的情况. 结果 P21WAF1/CIP1基因的重组腺病毒载体可以有效地转入平滑肌细胞中,诱导平滑肌细胞凋亡,并能显著地抑制平滑肌细胞增殖. 结论外源性P21WAF1/CIP1基因转移可以诱导平滑肌细胞凋亡,显著地抑制平滑肌细胞增殖.
关键词： p21waf1/cip1基因 腺病毒 血管平滑肌细胞 凋亡 -
p21WAF1/CIP1和p53在喉癌癌变过程中表达及其临床病理意义
研究证实细胞周期调控异常是肿瘤发生发展的内在原因[1].p21WAF1/CIP1和p53是细胞周期调控的重要的负性调控因子.本实验以喉正常粘膜、喉粘膜不典型增生病变和喉癌为研究对象,采用免疫组化方法检测两种基因蛋白产物,观察在喉癌癌变过程中变化及相互关系.
关键词： 喉肿瘤 p53基因 p21waf1/cip1基因 免疫组织化学 -
地西他滨对白血病Kasumi-1细胞的毒性作用及其机制研究
目的:探讨地西他滨对白血病Kasumi-1细胞的毒性作用及其机制.方法:应用CCK-8法检测0.5~100 μmol/L地西他滨作用Kasumi-1细胞24、48、72 h后的细胞存活率,AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法检测0.5~20 μmol/L地西他滨处理Kasumi-1细胞48 h后的细胞凋亡率,流式细胞碘化丙啶单染色法观察G0/G1期、S期、G2/M期Kasumi-1细胞比例;逆转录PCR法检测p21WAF1/CIP1基因表达水平的变化.结果:0.5~100 μmol/L地西他滨均可抑制Kasumi-1细胞增殖,并呈现剂量依赖性与时间依赖性,作用24、48、72 h的IC50浓度分别为6.92、5.03、4.47 μmol/L;0.5~20 μmol/L地西他滨诱导Kasumi-1细胞凋亡水平较低,但能以剂量依赖的方式阻滞Kasumi-1细胞G2/M期,上调p21WAF1/CIP1基因表达.结论:地西他滨对Kasumi-1细胞具有毒性作用,其机制可能与上调p21WAF1/CIP1表达以及阻滞细胞周期有关.
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外源性p21WAF1/CIP1基因转染对人胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响
目的:探讨外源性p21WAF1/CIP1基因对胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响.方法:采用脂质体介导法将p21WAF1/CIP1基因质粒转导入人胶质瘤细胞系SHG44细胞,然后用电镜、流式细胞仪等技术对细胞形态、生长及细胞周期进行观察.结果:酶切电泳和斑点杂交显示p21WAF1/CIP1基因成功的转染至SHG44细胞.转染p21WAF1/CIP1基因的细胞光镜及电镜下可见凋亡产生;生长速度明显慢于亲代细胞,其倍增时间约是对照细胞的二倍;细胞周期发生明显改变,G1期明显增多,S期明显减少.结论:外源性p21WAF1/CIP1基因对SHG44细胞的生长和细胞周期有明显的抑制作用,并可诱导细胞凋亡产生.
关键词： p21waf1/cip1基因 神经胶质瘤 细胞周期 脱噬作用 -
p21WAF1/CIP1基因及p53蛋白在大肠癌的表达及意义
用免疫组织化学方法对42例大肠癌组织p21WAF1/CIP 1基因及p53蛋白的表达进行检测.结果表明:p21WAF1/CIP1阳性率42.9%,p53蛋白阳性率64 .1%;两者与大肠癌的组织分化、淋巴结转移及术后生存率之间有关,并随着肿瘤恶性程度的增加,p21WAF1/CIP1阳性率下降,p53蛋白阳性率增加.推测p21WAF1/CIP1及p53之间存在着一定的负性相关关系,同时检测p21WAF1/CIP1基因及p53蛋白的表达情况,有助于判断大肠癌的生物学行为及患者的预后.
关键词： 大肠癌 p21waf1/cip1基因 P53蛋白 免疫组织化学 预后 -
细胞周期素D1和P21WAF1/CIP1蛋白在肺癌组织中的表达
目的研究细胞周期素(Cyclin)D1和P21WAF1/CIP1在肺癌组织中的表达及其与肺癌临床分期、组织类型、分化程度及转移和预后的关系.方法用免疫组化法检测癌旁肺组织及肺癌组织中CyclinD1和P21WAF1/CIP1蛋白的表达.结果①CyclinD1和P21WAF1/CIP1在癌旁肺组织中不表达或很少表达,而在癌组织中有较高的表达率,其阳性表达率分别为60.4%(29/48)和27.08%(13/48).②Cyclin D1和P21WAF1/CIP1蛋白表达与肿瘤的病理类型和临床TNM分期无关;与肺癌组织分化程度有关,其中Cyclin D1阳性率越高,肺癌的分化程度越低(P＜0.05),P21WAF1/CIP1蛋白阳性率越高,肺癌的分化程度越高(P＜0.05).③P21蛋白阳性表达者转移率低于阴性表达者(P＜0.05),并且其存活期长(P＜0.05).④Cyclin D1和P21WAF1/CIP1蛋白的表达呈显著负相关(P＜0.05).结论①Cyclin D1和P21WAF1/CIP1蛋白的表达与肿瘤的组织分化有关;②P21蛋白表达和肿瘤的转移及预后有关.
关键词： 肺癌 细胞周期蛋白D1 p21waf1/cip1基因 免疫组织化学
