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长链非编码RNA对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡调控研究
目的 长链非编码RNA(LncRNA)在肿瘤的发生发展中起重要的作用,但它们在急性白血病发病和预后中有何功能,仍不清楚.本研究探索LncRNA-ENST0000041 4355对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞增殖和细胞凋亡的调控作用,并初步探索LncRNA-ENST00000414355和急性白血病临床诊断的关系.方法 采用RAN干扰技术对AML细胞系HL-60、K562、THP-1和U937的LncRNA-ENST00000414355进行表达沉默,用MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡.收集2016-01-01-2016-10-30广州市第一人民医院初发未治的10例AML患者和5名正常人的骨髓标本及相关临床资料,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测LncRNA-ENST00000414355在骨髓中的表达.结果 4种白血病细胞系分别被3条si-RNA干扰后,LncRNA-ENST00000414355表达均明显下调.MTT法检测结果显示,RNA干扰72 h后,LncRNA-ENST00000414355干扰细胞组HL-60、K562、THP-1和U937细胞的A值分别为0.706±0.04、0.606土0.005、0.617±0.003和0.808±0.016 6,明显低于阴性对照组的1.260±0.020、1.225±0.053、1.136±0.004和1.088±0.081;而流式细胞术检测显示,siENST00000414355干扰细胞组72 h后HL-60、K562、THP-1和U937的细胞凋亡分别为(21.63±1.130)％、(23.853±2.912)％、(19.13±3.245)％和(22.797±2.165)％,明显高于阴性对照组的(0.041±0.003)％、(0.055±0.002)％、(0.022±0.02)％和(0.01±0.01)％,差异有统计学意义,P＜0.05.人骨髓检测结果显示,急性白血病患者骨髓中LncRNA-ENST00000414355的表达为(50.070±16.633),与正常人的(1.300±0.592)比较,明显上调,差异有统计学意义,P＜0.01.结论 LncRNA-ENST00000414355在白血病骨髓中高表达,它具有调控AML细胞增殖和细胞凋亡的功能.
