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雄激素非依赖性前列腺原位癌动物模型建立及Pim-1表达研究
目的 建立雄激素非依赖性前列腺原位癌动物模型,研究Pim-1基因及蛋白在该动物模型的表达.方法 采用原位种植包埋法和外科手术去势技术,分别建立雄激素依赖、去势3d和雄激素非依赖性前列腺原位癌动物模型.分别采用基因芯片技术、酶联免疫法和免疫组织化学等实验方法,研究3组肿瘤组织中pim-1基因和蛋白表达的变化.结果 Affymetrix表达谱芯片技术检测结果显示,雄激素非依赖组Pim-1表达高于雄激素依赖组,差异有统计学意义,差异倍数为2.307 71;去势3d组与雄激素依赖组之间差异无统计学意义,差异倍数为1.108 67.ELISA检测结果显示,去势3d组血清睾酮浓度为(2.27±0.035)ng/mL,与雄激素依赖组的(9.02±0.99)ng/mL比较,差异有统计学意义,t=19.28,P＜0.01;雄激素非依赖组为(0.29±0.068)ng/mL,与雄激素依赖组比较,差异有统计学意义,t=24.87,P＜0.01;空白对照组为(9.23±0.78)ng/mL,与雄激素依赖组比较,差异无统计学意义,t=0.45,P=0.998.去势3d组PSA浓度为(0.17±0.032)ng/mL,与雄激素依赖组的(0.48±0.025) ng/mL比较,差异有统计学意义,t=21.82,P＜0.05;雄激素非依赖组为(0.87±0.023)ng/mL,与雄激素依赖组比较,差异有统计学意义,t=31.53,P＜0.05;空白对照组为0 ng/mL,与雄激素依赖组比较,差异有统计学意义,t=41.80,P＜0.01.免疫组织化学结果显示,雄激素非依赖组Pim-1蛋白表达量为0.024±0.001 9,明显高于雄激素依赖组的0.017±0.002 1,差异有统计学意义,t=8.27,P＜0.05;去势3d组为0.018±0.001 3,与雄激素依赖组比较,差异无统计学意义,t=1.17,P=0.252.结论 成功建立雄激素非依赖性前列腺原位癌动物模型,Pim-1与雄激素非依赖性前列腺癌有高度相关性.
关键词： 雄激素非依赖性前列腺癌 雄激素依赖性前列腺癌 Pim-1 动物模型 原位种植 免疫组织化学 -
血管生长素的差异表达对鉴别前列腺癌雄激素依赖性和非依赖性的临床意义的研究
目的:研究雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌中血管生长素(ANG)的差异性表达的临床意义,以了解雄激素非依赖性前列腺癌的发病机制.方法:研究时间为2013年7月至2015年7月,采用体外培养的方式分别培养雄激素依赖性(LNCaP细胞)和非依赖性(PC-3细胞)前列腺癌细胞株,并与正常健康人群进行对比;分别在细胞和组织水平上对ANG水平和表达情况进行分析归纳.结果:前列腺癌患者ANG阳性表达率显著高于正常健康人群(P＜0.05);雄激素依赖性前列腺癌患者各分期中ANG水平明显低于非依赖性患者,P＜0.05,统计学具有显著差异意义.结论:ANG在雄激素依赖性前列腺癌向非依赖性前列腺癌转化中具有主导作用,ANG可能成为肿瘤的标记物.
关键词： 雄激素依赖性前列腺癌 雄激素非依赖性前列腺癌 血管生长素 差异表达 -
淫羊藿苷对BALB/c-nu裸小鼠雄激素依赖性前列腺癌雄激素受体信号转导通路的影响
目的 研究淫羊藿苷对BALB/c-nu裸小鼠雄激素依赖性前列腺癌雄激素受体信号转导通路(P13K/Akt)的影响.方法将40只雄性BALB/c-nu裸小鼠随机均分为对照组、模型组、抑制剂组和实验组(n=10),除对照组外均采用前列腺内注射人前列腺癌细胞株(LNCaP)悬液(2×107个/mL)的方法建立LNCaP模型,2周后,4组均采用尾静脉注射相应药物的方法治疗28 d.采用Western blotting法检测前列腺癌变组织雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)、磷酸化蛋白激酶(p-Akt)和磷酸化雄激素受体(p-AR)蛋白表达;FITC-CY3法检测钙黏蛋白E(E-cadherin)和降钙素(Calcitonin)阳性率.结果与模型组比较,实验组p-Akt及p-AR蛋白均低表达(P<0.05),而Calctionin及AR-V7的阳性率均明显降低(P<0.05),E-cadherin的阳性率明显升高(P<0.05).结论淫羊藿苷通过调控P13K/Akt信号转导通路相关因子表达而抑制LNCaP侵袭和转移.
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雄激素依赖性和雄激素非依赖性前列腺癌差异膜抗原的筛选
目的:探讨雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞差异表达膜蛋白的筛选方法.方法:提取雄激素依赖性前列腺癌(androgen dependent prostate cancer,ADPC)细胞株LNCaP和雄激素非依赖性前列腺癌(androgen independentprostate cancer,AIPC)细胞株PC-3膜蛋白作为抗原,采用免疫共沉淀方法,与ADPC和AIPC患者的血清各3例交叉孵育,行Western印迹检测,比较、识别杂交后差异表达蛋白条带,串联质谱分析鉴定,细胞免疫荧光和组织免疫组织化学方法验证.结果:共获得1 1个差异表达的膜蛋白(Neural-Cadherin precursor,ER60 precursor,Claudin-4等)；细胞免疫荧光结果显示Claudin-4在LNCaP和PC-3细胞存在明显差异,在ADPC组织中阳性表达率(34.3％)低于AIPC组织中阳性表达率(72.4％,P＜0.05).结论:本研究所采用的方法筛选前列腺癌差异表达膜蛋白具有可行性；Claudin-4可能在雄激素非依赖性前列腺癌的发生和发展中发挥重要的作用.
关键词： 雄激素依赖性前列腺癌 雄激素非依赖性前列腺癌 膜蛋白 -
雄激素受体对IgG蛋白表达及前列腺癌细胞增殖和迁移的影响
目的 研究前列腺癌细胞中雄激素受体(AR)对免疫球蛋白lgG表达的影响,及对前列腺癌细胞增殖、迁移的作用.方法 (1)Western blot检测雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCap与去势抵抗性前列腺癌细胞株PC-3中AR、IgG蛋白的表达;(2)AR基因(pCDNA3.1+)转染PC-3构建AR过表达的PC-3-AR细胞,沉默LNCap中AR基因表达构建LNCap-siAR细胞;Westernblot检测AR及IgG表达量;Q-PCR检测细胞株中IgG mRNA表达量;四氮甲基唑氮、细胞划痕方法检测细胞的增殖及迁移能力.结果 LNCap细胞与PC-3细胞相比较,AR高表达,IgG低表达(P＜0.05).PC-3-AR细胞lgG降低表达(P＜0.01),细胞增殖及迁移能力减弱;LNCap-siAR细胞IgG增高表达(P＜0.01),细胞增殖及迁移能力增强.结论 AR调控IgG蛋白表达呈负相关并与前列腺癌细胞增殖、迁移能力相关.
关键词： 前列腺癌 雄激素受体 免疫球蛋白IgG 雄激素依赖性前列腺癌 去势抵抗性前列腺癌 -
miR-21与p57～(kip2)在雄激素依赖性前列腺癌中表达及意义分析
目的 分析在雄激素依赖性前列腺癌中miR-21与p57～(kip2)的表达及其意义.方法 本研究于2015年9月至2017年9月这个时间内选取在我院进行手术的雄激素依赖性前列腺癌患者25例进行研究,对其实施实时荧光PCR检测,分析不同分化前列腺癌中miR-21的表达以及癌组织和增生组织的p57～(kip2)mRNA表达对比.结果 结果数据表明,不同分化前列腺癌中miR-21的表达水平存在统计学差异,且在前列腺癌中的p57～(kip2)mRNA表达率明显高于增生组织,具有统计学差异P<0.05.结论 在雄激素依赖性前列腺癌中miR-21与p57～(kip2)的表达具有特殊性,可以有助于对其提供治疗依据.
关键词： miR-21 p57～(kip2) 雄激素依赖性前列腺癌
