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TMPyP4对肝癌细胞HepG2生长抑制作用的研究
目的 TMPyP4是G-四链体的配体,能够诱导形成G-四链体结构并增强G-四链体结构的稳定性,加强G-四链体作为负调控因子抑制MET基因的表达;G-四链体结构的形成可以选择性的抑制肿瘤细胞增殖.本研究旨在分析TMPyP4对肝癌细胞HepG2生长抑制作用的研究,为MET高表达的肿瘤靶向治疗提供新思路.方法 采用CCK 8方法分析HepG2细胞增殖变化,通过Hoechst 33342细胞核染色和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析HepG2细胞凋亡水平,以及利用流式细胞术分析HepG2细胞周期分布的变化.结果 CCK-8分析HepG2细胞增殖显示,与对照组比较,10 μmol/L TMPyP4对HepG2细胞存活率无显著影响,20、50、100和200 μmol/L TMPyP4组HepG2细胞存活率分别为(82.28±1.99)％、(68.88±3.06)％、(55.57±2.76)％和(50.32±5.78)％,F=120.542,P＜0.001,说明高于20 μmol/L的TMPyP4显著抑制细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡不明显,只有高浓度TMPyP4诱导少量HepG2细胞发生了凋亡,并出现了坏死细胞;100和200 μmol/L TMPyP4的实验组细胞经Hoechst 33342染色,有少数HepG2细胞表现出细胞核固缩、致密,形态不规则,染色不均一,呈现凋亡表现;不同浓度的TMPyP4处理HepG2细胞使G0/G1期细胞增加了20％,S期细胞减少,G2/M期细胞也减少,表示HepG2细胞发生了G0/G1细胞周期阻滞.结论 G-四链体的配体TMPyP4显著抑制了肝癌细胞HepG2的细胞增殖,诱导少量HepG2细胞凋亡,并使HepG2细胞发生了G0/Gl细胞周期阻滞.
关键词： TMPyP4 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期阻滞 MET 启动子 G-四链体 -
MET启动子中的G-四链体结构在基因表达调控中的作用
目的 分析原癌基因MET启动子中的G-四链体结构的基因表达调控功能.方法 采用双荧光素酶报告基因系统、荧光定量PCR和蛋白印迹实验分析MET启动子的G-四链体结构的功能.结果 50μM和100μMTMPyP4在双荧光素酶检测系统中能够显著抑制MET启动子活性,而对其突变体没有抑制作用;50μM和100μMTMPyP4显著下调MET mRNA和ME蛋白表达水平.结论 小分子配体TMPyP4能够稳定启动子的G-四链体结构而抑制MET基因的表达,这为肿瘤的靶向治疗提供了新思路.
关键词： TMPyP4 MET启动子G-四链体 基因表达调控 -
阳离子卟啉对膀胱肿瘤细胞端粒酶活性抑制作用的研究
目的 探讨阳离子卟啉TMPyP4[四-(N-甲基-4-吡啶基)]对膀胱肿瘤细胞株T24和BIU87的端粒酶活性的影响.方法 MTT法测定细胞抑制率;流式细胞仪测定细胞凋亡率;PCR-ELISA法测定肿瘤细胞的端粒酶活性;RT-PCR法测定hTERT和c-myc的mRNA表达量.结果 TMPyP4和阿霉素均表现为剂量和时间依赖的细胞抑制作用.低细胞毒浓度的TMPyP4和阿霉素作用于肿瘤细胞后均能使肿瘤细胞的凋亡率增加,端粒酶活性降低,以及hTERT和c-myc mRNA表达量降低;TMPyP4作用时间较长后,上述作用优于阿霉素.结论 低细胞毒浓度的TMPyP4在药物作用时间较长后诱导细胞凋亡的作用优于阿霉素,其作用机制可能与降低hTERT活性和c-mycmRNA表达量有关.
关键词： 膀胱肿瘤 TMPyP4 端粒酶 hTERT/c-my cmRNA
