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松胞素阻滞微核法检测鼻咽癌细胞株放射敏感性的研究
目的:探讨用松胞素阻滞微核法来预测鼻咽癌细胞株放射敏感性价值.方法:用松胞素阻滞微核法微核率、微核细胞率检测鼻咽癌高分化鳞癌细胞株CNE1及低分化鳞癌细胞株CNE2,在不同X线剂量照射下染色体断裂或缺失程度的差异,与经典的克隆形成法存活分数比较.结果:CNE1、CNE2的微核率、微核细胞率在照射剂量0、0.5 Gy时,差异无统计学意义,P＞0.05;但在剂量1、2、4、6和8 GY时,CNE2的微核率、微核细胞率明显比CNE1大,P＜0.05.CNE1、CNE2的微核率、微核细胞率与照射剂量间呈线性正相关,其斜率CNE2明显比CNE1大.微核率、微核细胞率与细胞株的存活分数明显负相关.结论:松胞素阻滞微核法微核率、微核细胞率敏感检测出CNE1、CNE2放射敏感性差异,与克隆形成法检测结果一致.松胞素阻滞微核法是一种检测鼻咽癌细胞株放射敏感性准确、简便和有效的方法.
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骨髓间质干细胞的胞质体制备及其活性
背景:细胞质在细胞分化过程中起着决定作用,但目前的实验很难获得大量的、有活性的胞质体.目的:分析影响大鼠骨髓间质干细胞胞质体制备的因素,并观察胞质体活性,以期为细胞重组提供实验依据.设计、时间及地点:以细胞为观察对象的多因素设计实验,于20016-09/2007-01在南京医科大学基础医学院卫生部抗体技术重点实验室完成.材料:选用1月龄SD大鼠,用于分离骨髓间充质干细胞.方法:骨髓间质干细胞经分离培养、扩增后,用松胞素B、秋水仙碱结合离心术制备胞质体.主要观察指标:应用苏木精-伊红、Alexa-Flour(R)488anti-rat CD106及Bis-Benzimide染色进行形态学观察,计算胞质体纯度;应用Rhodamine123标记后用流式细胞仪检测胞质体中线粒体膜势能.结果:①胞质体纯度可达95%.80%的胞质体在一两个小时内恢复原来形态,但其生活力不会超过18 h.胞质体活性随时间延长而F降.②骨髓间质干细胞的胞质体制备与松弛素B、秋水仙碱剂量、离心速度、离心时间,特别是离心温度有关.结论:骨髓间质干细胞的胞质体制备可受多因素影响.当胞质体具有活性,具有有核细胞的一些行为特征时,可以进行细胞重组.
