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  • 沉默 PKM2对人肺腺癌细胞系及移植瘤的放射增敏研究

    作者:王欢欢;曾宪亮;孟茂斌;钱东;应国光;赵路军;袁智勇;王平

    目的:研究沉默丙酮酸激酶 M2型(PKM2)对人肺腺癌细胞系(A549细胞)的放射敏感性及移植瘤的放射协同作用,并探索相关机制。方法将 PKM2基因干扰质粒 pshRNA?PKM2稳定转染至 A549细胞,同时设立空载质粒转染组和未转染组。采用蛋白印迹法检测 A549细胞 pshR?NA?PKM2的沉默效率及微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达水平,克隆形成实验、移植瘤生长延迟法检测沉默 PKM2后对 A549细胞、移植瘤放射增敏效应,透射电镜观察 A549细胞及移植瘤自噬形成,免疫组化法检测移植瘤中 PKM2的表达水平。行 Student′s t 检验组间差异,裸鼠体重及移植瘤体积采用连续变量的方差分析。结果成功获得转染 pshRNA?PKM2的 A549稳定细胞株。 pshRNA?PKM2组可显著下调细胞和移植瘤 PKM2的蛋白表达水平(P=0.001、0.000),对 A549细胞的 SER 为1.47,移植瘤的 SER 为2??00。干扰 PKM2可增加放射所诱导的自噬形成并增加 LC3?Ⅱ/Ⅰ的比值( P=0.0001)。结论沉默 PKM2调节自噬可能提高 A549细胞及移植瘤的放射敏感性,其有望成为NSCLC 有效放射增敏靶点,但有待进一步研究确认。

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