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  • 新型脑组织特异性基因LRRC4的功能研究

    作者:范松青;王洁如;黄河;熊炜;肖炳燚;欧阳珏;曹莉;谭琛;李桂源

    目的研究LRRC4基因的抑瘤作用,探讨LRRC4基因对U251细胞的生物学功能影响.方法将转染LRRC4基因的U251细胞、转染空白载体PcDNA3.1(+)的U251细胞和阴性对照的U251细胞分别进行HE染色、DNA染色和核仁组成区嗜银蛋白(AgNORs)染色,并采用图像分析系统分别进行平面形态参数、DNA含量、DNA倍体、细胞周期和AgNORs定量分析,流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期分布,MTT检测各组细胞的增殖活性.结果转染LRRC4基因U251细胞的面积为(100.6±7.6) μm2,周长为(42.4±2.0) μm,细胞直径为(9.0±1.2) μm,平均DNA含量为(46.8±8.7) pg,AgNORs平均颗粒数为(1.2±0.4)个,AgNORs平均面积为(16.9±2.0) μm2,均显著低于转染空白载体和阴性对照细胞,DNA异倍体也显著低于转染空白载体和阴性对照细胞.转染LRRC4基因的U251细胞的G0/G1期百分比明显增高,而S期和G2/M期细胞减少.转染LRRC4基因的U251细胞增殖活性显著低于转染空白载体和阴性对照细胞(P<0.01).结论 LRRC4基因通过抑制细胞的DNA复制,减少细胞核仁组成区相关蛋白质的合成,使细胞停滞于G0/G1期,抑制细胞的增殖活性,进而发挥抑瘤功能.形态定量检测技术结合流式细胞检测、MTT检测等实验,能更加全面地阐明新基因的生物学功能.

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