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反应性氮代谢产物对NK细胞抗K562细胞活性的影响
目的 探讨外源性、内源性反应性氮代谢产物(RNM)及其清除剂硫普罗宁(TIP)、还原型谷胱甘肽(GSH)、二氢氯组胺(DHT)对NK细胞抗K562细胞活性的影响.方法 体外合成外源性ONOO-,在NK+K562细胞培养体系中,观察外源性ONOO-及其清除剂对K562细胞抑制率(KIR)、肿瘤坏死因子β(TNF-β)和干扰素γ(IFN-γ)的含量及NK细胞活性影响.以白细胞介素2(IL-2)+植物血凝素(PHA)激活单核细胞(MO)呼吸爆发产生内源性RNM,在MO+NK+K562细胞培养体系中,观察内源性RNM对NK细胞活性的影响,然后加入RNM清除剂观察RNM和NK细胞活性的变化.结果 在NK和K562细胞培养体系中加入外源性ONOO-后,NK活细胞率从(93.17±2.57)%下降到(71.87±1.02)%(P＜0.01),KIR从(67.47±2.64)%下降到(43.44±2.87)%(P＜0.01);加入TIP、GSH和DHT后,NK活细胞率分别升高至(91.13±3.67)%(P＜0.05)、(88.03±1.46)%(P＜0.05)和(73.60±2.76)%(P＞0.05),KIR上升至(61.58±1.89)%(P＜0.05)、(60.68±2.07)%(P＜0.05)和(45.26±3.31)%(P＞0.05).以IL-2+PHA+NK+K562为对照,在NK+K562+MO混合培养体系中加入IL-2+PHA,RNM含量从(82.10±6.60)μmom/L增至(193.65±5.95)μmom/L(P＜0.01),KIR从(90.64±3.06)%下降至(61.29±2.22)%(P＜0.01);加入TIP、GSH和DHT后,RNM含量分别降低至(91.32±6.81)μmom/L(P＜0.05)、(84.66±5.99)μmom/L(P＜0.05)和(188.92±5.00)μmom/L(P＞0.05),KIR上升至(84.31±4.56)%(P＜0.05)、(81.65±3.09)%(P＜0.05)和(72.20±4.10)%(P＜0.05).结论 外源性ONOO-和MO呼吸爆发产生的RNM均可使NK细胞的抗K562细胞活性下降.TIP和GSH可通过清除RNM保护NK细胞,提高NK细胞抗K562细胞活性.
