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免疫磁珠分选与顺铂富集喉癌Hep-2细胞系中肿瘤干细胞的比较
目的 比较免疫磁珠分选(MACS)及化疗药物顺铂(DDP)筛选富集喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞的效果.方法 以CD133MACS、DDP作用两种方法来富集喉癌Hep-2细胞系中的肿瘤干细胞,并以流式细胞术(FCM)榆测处理后CD133+细胞的百分率.同时观察细胞形态学的改变,判断两种方法分选后细胞对后续实验的影响.结果 经FCM检测,MACS分选喉癌Hep-2,CD133+细胞得率为64.33%,不同浓度DDP作用于喉癌Hep-2细胞48 h,FCM检测CD133+细胞有不同的得率,其中质量浓度为4μg/ml时,所得CD133+细胞百分率高,为50.7%.MACS与DDP各组比较差异均有统计学意义(P<0.01);两种方法处理后MACS组细胞的存活状态要好于DDP组.结论 MACS分选纯度较高,对细胞损伤小,适合后续培养;但分选前耗时长,每次分选仅能用于一种Marker.DDP筛选简单易行,符合临床肿瘤干细胞(CSC)抵抗化疗的模式.但阳性细胞得率与细胞毒性成正比.MACS和DDP筛选肿瘤干细胞各有其优势及适用范围,实验中可根据不同目的 来确定所用筛选方法.
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肿瘤干细胞标记物CD133与基质金属蛋白酶-9在乳腺癌组织中的表达及生物学意义
目的 探讨乳腺癌组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及肿瘤干细胞标志(CD133)的表达及其与乳腺癌临床病理参数之间的关系.方法 采用免疫组织化学方法,检测109例乳腺癌组织中的CD133及MMP-9蛋白的表达并对结果进行分析.结果 ①109例乳腺癌组织中MMP-9、CD133蛋白的表达率分别是40.4%(44/109)、46.8%(51/109),随肿瘤直径增大以及肿瘤分期的增加,MMP-9蛋白的阳性表达率也明显增加,差别有统计学意义(P＜0.C15);而乳腺癌组织中CD133+肿瘤干细胞数量则随病理级别的升高而增加(P＜0.05).②109例乳腺癌组织中,CD133+肿瘤干细胞MMP-9的阳性表达随病理分级增加而增加(P＜0.05).结论 低分化乳腺癌组织中,MMP-9蛋白与CD133+肿瘤干细胞存在密切关系,CD133+肿瘤十细胞中MMP-9蛋白的表达可能参与乳腺癌恶性演进,或可成为预后预测的指标之一.
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膳食纤维、肿瘤干细胞和Wnt信号活性的连续谱:结肠直肠癌预防和治疗的可能性
Wnt信号转导参与了人类结肠直肠癌(colorectal cancer, CRC)的发生.尽管Wnt信号转导活性与细胞增殖间的关系已经明了,但也有研究表明,高水平的Wnt活性与细胞凋亡间存在关系.我们分析了10种人类CRC细胞系,结果发现组蛋白去乙酰酶抑制剂(inhibitors of histone deacetylass, HDACis),例如丁酸盐,可通过过度诱导Wnt信号转导而促使CRC细胞凋亡;因此,通过HDACis过度活化Wnt信号转导可作为结肠直肠癌新的预防和治疗措施.我们的研究结果可以解释膳食纤维及其产物丁酸盐对于CRC保护作用的研究结果和丁酸盐的抗肿瘤作用为何相互矛盾.我们认为,体外研究中观察到的Wnt活性水平和CRC细胞凋亡水平的变化表明体内存在CRC细胞亚型,它们对于丁酸盐的反应程度不同.Wnt活性与肠道干细胞的更新和CRC干细胞的转移潜能相关,本文在此基础上讨论HDACis介导的Wnt信号转导调节作为CRC干细胞治疗方法的可能性,认为对Wnt阳性的CRC干细胞进行靶向治疗可作为CRC的基因疗法.
