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超声靶向微泡破裂技术联合shRNA质粒沉默Toll样受体4基因
目的 Tol样受体（Tol-like receptor，TLR）4表达水平与脑缺血合并高血糖后的痫性发作及脑梗死预后相关，本文探讨超声靶向微泡破裂（ultrasound-targeted microbubble destruction，UTMD）联合短发夹核糖核酸（short hairpin ribonucleic acid，shRNA）干扰技术沉默TLR4的可行性和应用价值。
方法将32只实验用Wistar大鼠分为4组：空白对照组（NS）、裸质粒组（P）、质粒联合超声辐照组（P+UTMD）、质粒与SonoVue联合超声辐照组（P+S+UTMD），每组各8只。裸质粒组注入质粒，质粒联合超声辐照组注入质粒行超声辐照，质粒与SonoVue联合超声辐照组侧脑室注入质粒和SonoVue微泡并行超声辐照，处理4 d后每组取5只大鼠行Western Blot检测大脑TLR4蛋白表达，取3只大鼠行免疫组织化学染色。
结果质粒联合超声辐照组和质粒与SonoVue联合超声辐照组抑制效果明显（P+S+UTMD：0.223±0.009，P+UTMD：0.277±0.013，t1，3=4.900，P＜0.01；t1，4=8.779，P＜0.01），裸质粒组与空白对照组差异无显著性（NS：0.351±0.030，P：0.339±0.034，t1，2=0.590，P＞0.05），而质粒与SonoVue联合超声辐照组与质粒联合超声辐照组相比抑制效果更好（P+S+UTMD：0.223±0.009，P+UTMD：0.277±0.013，t3，4=7.006，P＜0.05）。免疫组织化学的平均光度值分析显示，质粒联合超声辐照组和质粒与SonoVue联合超声辐照组抑制效果明显（P+S+UTMD：0.026±0.0013，P+UTMD：0.058±0.0014， t1，3=8.334，P＜0.01；t1，4=21.027，P＜0.01），裸质粒组与空白对照组差异无显著性（NS：0.079±0.0048， P：0.077±0.0012，t1，2=0.797，P＞0.05），而质粒与SonoVue联合超声辐照组与质粒联合超声辐照组相比抑制效果更好（P+S+UTMD：0.026±0.0013，P+UTMD：0.058±0.0014，t3，4=33.254，P＜0.05）。
结论超声微泡造影剂联合shRNA质粒可高效稳定沉默TLR4基因。
