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转染绿色荧光蛋白的神经干细胞移植于半横断脊髓损伤处的体内外分化研究
目的 观察转染绿色荧光蛋白(GFP)的大鼠脊髓神经干细胞移植于半横断脊髓损伤处的体内外分化情况.方法 将表达GFP的慢病毒载体转染胎鼠脊髓神经干细胞,体外用10%胎牛血清诱导分化.转染后的神经干细胞与PLGA支架移植于大鼠半横断脊髓损伤处,术后1个月和3个月取材,行GFAP、NF和CNP免疫荧光染色.结果 转染GFP的神经干细胞球表达强烈的绿色荧光,体外分化可见GFAP/GFP、NF/GFP和CNP/GFP双阳性细胞,GFAP/GFP双阳性细胞明显多于其他两种.移植后3个月,GFP阳性细胞在脊髓内明显减少,可见少数GFAP/GFP和CNP/GFP舣阳性细胞,未见NF/GFP双阳性细胞.结论 转染GFP的神经干细胞可在体外增殖和分化,但大部分分化成胶质细胞.移植于急性期脊髓损伤处的神经干细胞不被诱导分化成神经元样细胞,可被诱导分化成神经胶质细胞.
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重复经颅磁刺激对脊髓半横断大鼠运动功能的影响
目的 研究重复经颅磁刺激( rTMS)对半横断脊髓损伤大鼠运动功能的影响.方法 18只SD大鼠分为正常组、脊髓损伤磁刺激组(磁刺激组)、脊髓损伤对照组(对照组),每组6只.磁刺激组和对照组制作右侧半横断脊髓损伤模型.磁刺激组于手术后24 h开始给予rTMS,频率为10 Hz,阈值刺激,500个脉冲,每天1次,连续4周,对照组给予假刺激.分别于术后第1,7,14,21,28天进行BBB行为学评分,于术后第28天时检测运动诱发电位(MEP).应用苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓组织形态学变化,并应用免疫组织化学法检测神经丝蛋白( NF-200)表达变化.结果磁刺激组BBB评分高于对照组(P＜0.05)；磁刺激组均可引出右下肢MEP,对照组大多引不出MEP;磁刺激组NF-200表达较对照组明显升高(P＜0.05).结论 rTMS可以促进脊髓半横断大鼠运动功能的恢复,其机制可能与促进轴突再生有关.
