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程序冷冻法冷冻精子进行IVF-ET的临床结局分析
目的:探讨程序冷冻法冷冻精子在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的临床结局及安全性.方法:回顾分析在本中心进行IVF-ET治疗的不孕夫妇的372个周期,分为4个组:用程序冷冻法冷冻精子行常规IVF共76个周期(A组),程序冷冻法冷冻精子行ICSI共92个周期(B组),同期新鲜精液行常规IVF周期97例(C组),新鲜精液行ICSI周期107例(D组),分别比较A组与C组、B组与D组的正常受精率、异常受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率、种植率、流产率、多胎率和畸形率.结果:与新鲜精液IVF-ET组相比较,程序冷冻法冷冻精子常规IVF组及ICSI组的正常受精率、异常受精率、卵裂率、妊娠率、种植率、流产率、多胎率和畸形率等方面差异无统计学意义(P＞0.05);但冷冻精子行ICSI组与新鲜精子行ICSI比较,优质胚胎率低且有统计学意义(P＜0.05).结论:用程序冷冻法冷冻精子助孕可以获得与新鲜精子相似的结局,是一种较为安全可靠的精液保存方法,可用于IVF-ET术前精液冷冻保存.
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不同冷冻方案保存人类卵巢组织的活性比较
背景:卵巢组织冷冻保存被认为是保存女性生殖内分泌功能安全、有效的方法,但目前尚无统一确定的方案.目的:探讨3种冷冻方案对人类卵巢组织保存冷冻效果及卵泡活性的影响.方法:采用丙二醇慢速程序冷冻法、二甲基亚砜玻璃化冷冻法、液氮直投法对20例人类卵巢组织进行冷冻保存,复苏后采用细胞存活/死亡荧光分析法计数有活性的细胞,体外培养测定培养液雌二醇浓度及各级卵泡计数,判断3种不同冷冻方案对人类卵巢组织活性的影响.结果与结论:不同冷冻方案冻融后卵巢组织块的活性卵泡率均低于新鲜卵巢组(P＜0.05),二甲基亚砜组低,液氮直投法组与慢速程序冷冻法组差异无显著性意义.体外培养各冷冻组分泌的雌二醇水平比较,第4天时二甲基亚砜组低于液氮直投法组和慢速程序冷冻法组(P＜0.05),至第8天时各冷冻组雌二醇水平与新鲜卵巢组一致.培养14d组织学观察,各组卵巢组织内生长期卵泡比例增多,始基卵泡仍然占主要的.新鲜卵巢组织正常卵泡的总数高于冷冻组(P＜0.05),二甲基亚砜组的正常卵泡数低于液氮直投法组和慢速程序冷冻法组(P＜0.05).提示冷冻保存对卵巢组织卵泡有一定的损伤,但仍能保存大部分始基卵泡的活性,经体外培养后可进一步发育并具有分泌功能,在3种冷冻方案中,慢速程序冷冻法和液氮直投法的冷冻效果优于二甲基亚砜玻璃化冷冻法,液氮直投法操作简便,冷冻效果稳定.
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程序冷冻法、液氮蒸汽法冷冻人类精子的效果比较
目的:比较程序冷冻法和液氮蒸汽法冷冻保存人类精子的效果.方法:用同一批次GYC型冷冻保护剂,分别应用程序冷冻法和液氮蒸汽法对68份精液标本进行冷冻保存,并比较其冷冻复苏率.结果:应用程序冷冻法冷冻的精液标本,其复苏后前向运动精子(a+b级)的冷冻复苏率为66.7%±8.1%,应用液氮蒸汽法冷冻的精液标本,其复苏后前向运动精子(a+b级)的冷冻复苏率为63.9%±7.9%,两组相比无显著差异(p>0.05).结论:采用程序冷冻法和液氮蒸汽法冷冻人类精子,二者冷冻复苏率无显著差异,两种方法均可以用于人类精子库冷冻保存精液标本.
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液氮直投及程序冷冻冻存人卵巢组织的研究
目的 液氮直投法及程序冷冻法冻存人卵巢组织效果的比较研究.方法 采用液氮直投法及程序冷冻法冻存人卵巢组织,解冻后苏木素-伊红染色检测冷冻前后各级卵泡(始基卵泡、初级卵泡和次级卵泡)的组织形态,然后将卵巢组织体外培养3天,检测培养上清雌激素水平.结果 液氮直投法、程序冷冻法始基卵泡形态正常率分别为72.96%、81.87%,差异有统计学意义(χ2=11.27,P<0.05);初级卵泡形态正常率分别为58.62%、34.48%,差异有统计学意义(χ2=6.79,P<0.05).第3天、第6天血清雌激素水平检测,液氮直投法与程序冷冻法比较差异无统计学意义(108.38±9.27 vs 105.15±9.13,151.08±16.64 vs 147.38±20.48,均P>0.05).结论 程序冷冻法以及液氮直投法可有效保存卵巢组织,对卵巢组织和功能的影响较小,而且液氮直投法操作更简便、快捷.
