首页 > 文献资料
-
Ngn2和Math6在小鼠内耳不同时期表达的初步研究
目的 研究neurogenin2(ngn2)和math6在不同时期小鼠内耳的表达变化,并初步探讨其对螺旋神经元发育的调控作用.方法 本实验选取不同时期健康的BALB/c小鼠,以E12.5、E13.5、E14.5、E17.5、P1、P7和成年为观察时间点,应用real-time PCR、免疫组织化学方法检测ngn2、math6在耳蜗中mRNA和蛋白的表达.结果 (1)real-time PCR结果提示ngn2在E12.5d呈高表达,随后在E13.5d表达量下调,直至成年呈低水平表达；math6在E12.5-P1都呈较高水平表达,其中在P1达到高峰,随后于P7至成年表达量下调.(2)免疫组织化学结果提示,在E13.5、E14.5和P1,ngn2和math6在螺旋神经节处(或螺旋神经元细胞核处)有不同程度的阳性表达；在成年期,math6在细胞核有弱表达,但ngn2几乎不表达,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1)ngn2在E12.5d表达呈高峰,提示其在有增殖能力的神经祖细胞中起作用；math6在E12.5d-P1呈高表达,提示其在神经祖细胞的增殖以及分化中其起重要作用；(2)ngn2和math6在耳蜗中表达的空间和时间模式的重叠和差异,提示它们在调控通路中可能受到共同的分子调控.
关键词： bHLH neurogenin2 math6 螺旋神经节 内耳发育 -
Neurogenin2基因调控许旺细胞转分化为神经元
背景：Neurogenin2(Ngn2)基因调控星形胶质细胞分化为神经元已被实验证实，这提示许旺细胞也可能通过基因调控分化为神经元。
目的：研究Neurogenin2基因调控大鼠许旺细胞向神经元分化的可行性。
方法：体外培养、纯化及鉴定大鼠许旺细胞，然后用含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体系统将Neurogenin2基因转染导入许旺细胞中，后用含碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和脑源性细胞生长因子的无血清DMEM诱导培养许旺细胞2周。显微镜观察细胞形态，免疫细胞化学检测髓磷脂碱性蛋白及神经元特异性烯醇化酶。
结果与结论：许旺细胞转染导入 Neurogenin2基因并诱导分化后，免疫荧光检测发现12.56%的细胞表达神经元标志性蛋白神经元特异性烯醇化酶，而对照组均未发现表达神经元标志性蛋白神经元特异性烯醇化酶。Neurogenin2基因植入可使大鼠许旺细胞表达神经元标志性蛋白神经元特异性烯醇化酶，提示该基因可调控许旺细胞转分化为神经元。关键词： 干细胞 干细胞培养与分化 许旺细胞 neurogenin2 基因 分化 神经元 神经元特异性烯醇化酶 干细胞图片文章 -
再程序化星形胶质细胞的制备及体外定向分化为神经元的研究
目的：探讨再程序化星形胶质细胞制备并在体外诱导其分化为神经元。方法在体外培养大鼠脑皮质来源星形胶质细胞（astrocyte），随后将提纯、鉴定过的第三代星形胶质细胞接种于12孔培养皿中，并分为A、B、C 3组。其中 A 组为带有绿色荧光蛋白（GFP）的慢病毒载体介导 neurogenin2（Ngn2）基因转染的星形胶质细胞，制备再程序化星形胶质细胞；B 组为带有 GFP 基因的空载体病毒转染的星形胶质细胞；C 组为未进行慢病毒介导基因转染的星形胶质细胞；转基因1周后加入含细胞生长因子诱导培养基诱导分化15 d，光镜下观察各组细胞形态变化以及定向神经元分化的差异。结果A 组星形胶质细胞转基因后再诱导15 d，很大部分细胞形态呈神经元样改变，胞体呈梭形或椭圆形，有多个突起伸出且突起较长，表达神经元核蛋白（NeuN）、神经丝蛋白（NF）及神经元特异性烯醇化酶（NSE）的比例大大提高，相比 B 组及 C 组，差异有统计学意义（均 P ＜0．05）；而B 组与 C 组神经元分化比例的差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论慢病毒介导 Ngn2基因体外转染星形胶质细胞可制备出再程序化星形胶质细胞，诱导后具有更强的向神经元定向分化能力。
关键词： neurogenin2 星形胶质细胞 神经元分化 再程序化 -
电针对小鼠脑缺血后Neurogenin2表达和神经功能的影响
目的:探讨电针刺激百会穴对成年小鼠脑缺血损伤后Neurogenin2(Neurog2)的表达和神经功能的影响.方法:成年雄性C57BL/6J小鼠,随机分成4组,对照组,电针+对照组,缺血组,电针+缺血组.结扎双侧颈总动脉构建全脑缺血模型(20 min).电针组于建模后24 h后连续电针刺激百会穴5d,采用Real-time PCR方法,检测脑组织中Neurog2 mRNA的表达情况,并且应用total motor scores (TMS)法评估神经功能,分析电针刺激7d后Neurog2的表达对脑缺血小鼠神经认知的影响.结果:Neurog2基因在脑缺血后3d表达逐渐增加,5d高,7d开始下降,给予电针治疗后,Neurog2的表达较缺血组明显增加,而且电针组的神经行为学评分中也优于缺血组(P＜0.05).结论:脑缺血激活Neurog2基因表达,电针可促进Neurog2表达增加,改善神经功能,这可能是电针治疗脑缺血再灌注损伤的新机制.
关键词： neurogenin2 电针 神经功能 小鼠
