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COLⅠα1文献资料
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稳定转染COL1A1-EGFP基因的ROS17/2.8细胞株的建立
目的构建稳定表达由COL1A1启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的ROS17/2.8细胞株.方法用PCR方法从大鼠基因组DNA中扩增出长为3.6 Kb的COL1A1(Ⅰ型胶原α1链基因)启动子,并克隆到T载体;然后将COL1A1启动子分段酶切,获得不同长度的启动子片段;与报告基因EGFP相连接,构建成真核表达载体;随后转染ROS17/2.8细胞系,再用G418筛选.结果得到了稳定转染COL1A1-EGFP基因的ROS17/2.8细胞株.结论这些细胞株的建立为研究微重力对COL1A1启动子活性及成骨相关基因表达的影响奠定基础.
