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前-Sl蛋白文献资料
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乙型肝炎病毒前-S1蛋白反式激活蛋白5基因的克隆化研究
目的克隆乙型肝炎病毒(HBV)前-S1蛋白反式激活新基因PS1TP5的cDNA,并应用生物信息学技术初步探讨其结构及功能.方法应用聚合酶链反应(PCR)技术以HepG2细胞的cDNA为模板扩增PS1TP5,以pGEM-T载体进行TA克隆,通过PCR、限制性酶切分析及测序进行鉴定,再将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM 3.1/myc-His A,通过PCR、限制性酶切分析进行鉴定,并应用生物信息学技术初步分析其物理化学性质、蛋白质结构和功能.结果 PCR成功扩增出PS1TP5基因,并将其分别克隆进pGEM-T和pcDNATM 3.1/myc-His A载体,经PCR、限制性酶切鉴定后测序证实.因其可以被前-S1 蛋白反式激活, 故命名为前-S1反式激活蛋白5 (PS1TP5) , 已在GenBank 中注册, 注册号: AY427953.生物信息学分析确定其ORF为438个核苷酸(nt),编码产物为145个氨基酸残基(aa).结论发现了HBV前-S1蛋白反式激活新基因PS1TP5,构建了 pcDNATM3.1/myc-His A真核表达载体,为进一步研究其生物学功能及慢性乙型肝炎发病机制创造了条件.
