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IL-6对超排卵后小鼠受精卵发育的影响
目的 探讨IL-6对超排卵后小鼠受精卵发育到两细胞的影响.方法 本实验分为3个部分.①IL-6添加实验:80只ICR雌鼠采用随机数字表法分为7组,包括超排卵组(n=60),正常自然周期组(即对照组,n=20).其中超排卵组再按照超排卵后体外培养液中添加IL-6浓度的不同分为超排卵对照组(0pg/ml IL-6组)、1pg/ml IL-6组、5pg/mlIL-6组、10pg/ml IL-6组、25pg/mlIL-6组和50pg/mlIL-6组,每组10只.②IL-6受体抗体(RA)添加实验:90只ICR雌鼠采用随机数字表法分为7组,包括超排卵5组(n=50),正常自然周期2组[包括对照组(n=20)和IL-6受体抗体(100pg/ml)组(n=20)].其中超排卵组按照超排卵后体外培养液中添加不同浓度IL-6及IL-6受体抗体分为超排组、1pg/ml IL-6+RA组、5pg/ml IL-6+RA组、10pg/ml IL-6+RA组、25pg/mlIL-6+RA组,每组10只.对照组小鼠正常自然受孕,超排组小鼠超排卵后受孕,收集受精卵体外培养1d至两细胞,显微镜下观察两细胞形成率.以上两部分实验重复3次.③IL-6免疫荧光表达实验:10只ICR雌鼠采用随机数字表法分为对照组和超排组,每组5只,应用免疫荧光共聚焦法检测对照组和超排组受精卵中IL-6的表达.结果 IL-6添加实验结果显示,超排对照组,1pg/mlIL-6组、25pg/ml IL-6组及50pg/mlIL-6组两细胞形成率明显低于对照组,差异有统计学意义(P=0.023、P=0.026、P=0.000、P=0.000).IL-6受体抗体(RA)添加实验结果显示,与正常对照组比较,超排组两细胞形成率下降(P=0.017);添加IL-6受体抗体的各组两细胞发育率也下降,差异有统计学意义(P=0.000).IL-6免疫荧光表达实验结果显示,超排组受精卵中IL-6表达明显低于对照组.结论 控制性超排卵能够降低受精卵中IL-6的表达,可能是超排卵影响胚胎发育的机制之一.
