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人N-甲基-D-门冬氨酸受体1文献资料
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人NR1靶片段的原核表达
目的:克隆人N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDAR, NR)靶片段cDNA,构建其原核表达载体并建立相应的表达体系.方法:用常规RT-PCR法从脑肿瘤切除组织中克隆人NR1 靶片段cDNA,测序鉴定后构建其原核表达载体, 并在大肠杆菌DH5α中升温诱导表达, 表达产物通过SDS-PAGE分析及免疫印迹分析进行鉴定.结果:成功克隆了人NR1 靶片段489bp长cDNA,测序结果与文献报道一致,原核表达载体在宿主菌中诱导表达后得到了NR1蛋白靶片段的高效表达产物,占全菌体15%～30%.SDS-PAGE及免疫印迹分析与预计相同.结论:人NR1靶片段可通过改构设计在原核体系中获得高效表达.
关键词： 人N-甲基-D-门冬氨酸受体1 基因克隆 原核表达
