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海洋硫酸多糖类药物聚甘古酯单克隆抗体的制备及其特性研究
目的制备和纯化聚甘古酯(911)单克隆抗体,为911药代动力学的免疫学方法的建立提供依据.方法用还原胺化法,制备911-BSA和911-HSA复合物,间接ELISA法检测抗体生成.以IsostripTM试剂盒测定抗体亚型,流式细胞仪测定DNA含量.结果获得了一株阳性杂交瘤细胞DD3,腹水效价可达1×105,其抗体亚型为IgG2a(κ),细胞株的DNA含量约为脾细胞和NS-1细胞之和,亲和力常数为2.0×108 L*mol-1.结论本实验制备了特异性针对911的单克隆抗体DD3,且与内源性多糖和褐藻酸无交叉反应,为911药代动力学的免疫学检测提供了依据.
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电泳法检测尿液中海洋硫酸多糖聚甘古酯原型物
目的:建立检测尿液中海洋硫酸多糖类物质聚甘古酯(911)的电泳方法,并用于药代动力学研究.方法:以氯化十六烷基吡啶(cetylpyridinium chloride,CPC)沉淀法提取尿液中911,醋酸锌和醋酸钡两步电泳检测尿液中911,同时测定回收率、电泳测定的检测限.结果:实验证明该电泳法可以用于检测尿样中的911原型物,911在尿液中的回收率约为70%;水样中911的检测限为100μg@L-1,尿液中检测限为250μg@L-1,超滤尿中检测限为500μg@L,大鼠口服给药后可以从其尿液中检测到911原型物.结论:该电泳法是检测尿液中911稳定、灵敏的方法.