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脂质体和脂质微泡对细胞膜的声孔作用比较
目的 研究两种脂质载体--脂质体和脂质微泡对细胞膜的声孔作用.方法 应用体外培养的乳腺癌细胞SK-BR-3,考察脂质体和脂质微泡在低频超声条件下,对SK-BR-3细胞膜的声孔作用,应用原子力显微镜观察超声后即刻和24 h的SK-BR-3细胞表面变化.结果 超声可使细胞丧失贴壁性能,形态变圆,脂质微泡的加入明显增强这种作用.原子力显微镜观察表明,对照组(正常细胞单纯超声照射)细胞膜表面孔道暂时增大,部分细胞膜表面孔道直径大于1 μm.2%和5%脂质体+超声照射组和对照组无明显差别.脂质微泡+超声照射组对细胞膜结构有明显影响,2%脂质微泡+超声照射组产生的细胞膜表面孔道直径在1～3 μm,24 h内可以恢复.5%脂质微泡+超声照射组产生的细胞膜孔道直径2～4 μm,24 h内不能完全恢复.结论 2%脂质微泡可以产生较强的声孔作用,使细胞膜上出现可逆性孔道,有利于药物或基因递送到细胞内.
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不同脉冲超声参数及培养方式对细胞活力和细胞膜声孔作用的影响
目的 探寻不同脉冲超声(PUS)辐射策略及细胞培养方式对宫颈癌细胞(Hela)活力和细胞膜声孔作用的影响.方法 以2种不同的方式(悬浮培养或贴壁培养)培养Hela细胞,改变声强(0.4 W/cm2、1.0 W/cm2、1.6 W/cm2和2.2 W/cm2)、占空比(10%、20%、50%)以及辐射时间(1 min、3 min)等参数,对He-la细胞进行辐射,运用流式细胞术行细胞活力分析,应用显微镜和扫描电镜观察细胞形态变化及细胞膜表面的超微结构,比较不同参数组合方案的影响.结果 低声强和低占空比辐射未造成明显细胞死亡,高声强(1.6 W/cm2和2.2 W/cm2)和高占空比(50%)辐射显著降低细胞存活率(P<0.01),导致细胞脱离.析因设计分析可知,细胞培养方式和3种超声参数均有显著的交互作用(P<0.01),对细胞活力有很大的影响.电镜结果 显示,适当条件的超声辐射能导致细胞表面出现可逆性孔道.通过优化可获得合理的平衡,细胞存活率大于80%.悬液培养的细胞经1.0 W/cm2、20%占空比的PUS辐射3 min后,声孔作用强,出现的孔洞多.结论 对培养方式和超声参数进行优化后可减少细胞损伤,产生较强的声孔作用,增加细胞膜通透性,有利于大分子物质的胞内输送.
