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X5文献资料
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重组SARS-CoV未知功能小蛋白X5表达、纯化及抗体制备
将SARS-CoV未知功能小蛋白X5的基因在大肠杆菌中进行诱导表达,获得以包涵体形式存在的重组X5蛋白.通过高浓度尿素变性溶解包涵体,亲和层析法纯化蛋白,然后对其进行尿素梯度透析复性,终得到的蛋白纯度＞95%,终产率93.3 mg·L-1.SDS-PAGE电泳和LC-ESI-MS/MS结果表明,该重组蛋白大小与理论相符,序列与GenBank中注册的X5蛋白序列一致,说明该蛋白为目的蛋白.利用纯化的X5蛋白制备得到多克隆抗体,ELISA检测抗体效价为1:72 900,说明纯化后的蛋白对兔有很强的免疫原性.X5多克隆抗体的成功制备,为将来鉴定X5蛋白的药理学活性奠定了基础.
