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RADA-16自组装多肽的合成表征及负载BMP-2的细胞相容性研究
目的 将RADA-16、珊瑚和BMP-2组成复合材料体系,研究其超微结构及与BMSCs细胞相容性.方法 将RADA-16溶解于10%无菌蔗糖溶液中,浓度为1%(10 mg/mL,m/v),将RADA-16再用等体积细胞培养基DMEM/F12溶液触发多肽自组装,浸润珊瑚,进行电镜扫描.等比例混合RADA-16与BMP-2溶液后,把珊瑚在混合液中浸没,用相同体积的DMEM/F12培养基触发自组装的发生,扫描电镜检测.分离培养兔BMSCs,细胞活性染色观察细胞相容性.结果 RADA-16自组装能够形成凝胶,在50倍电镜下观察珊瑚呈多孔状结构,大小均匀,孔隙在200~500μm范围内,且孔隙紧密排布;130倍扫描电镜下观察,RADA-16自组装多肽凝胶均匀附着于珊瑚孔隙中;1000倍扫描电镜显示,RADA-16自组装形成片层与网状结构,其直径从几微米到几十微米不等;10000扫描电镜显示,在珊瑚孔隙中BMP-2黏附于RADA-16,成功合成复合材料体系(RADA-16、珊瑚、BMP-2),BMSCs培养过程中,实验1组(RADA-16、珊瑚、BMP-2)、实验2组(RADA-16、珊瑚)与对照组(珊瑚)中BMSCs都未见明显死亡细胞,差异无统计学意义(P>0.05).结论 多肽RADA-16在特定的条件下可以自组装复合材料体系(自组装多肽、珊瑚、BMP-2),与BMSCs有良好的相容性,可以作为骨修复组织工程的生物支架材料.
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冬虫夏草真伪鉴别
冬虫夏草常见伪品有亚香棒虫草、凉山虫草、珊瑚虫草等,鉴别如下。
1 冬虫夏草
麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis (BerK.) Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体[1]。由虫体与从虫头部长出的真菌子座相连而成。虫体似蚕,长3~5cm,直径0.3~0.8cm。表面深黄色至黄棕色,有环纹20~30个,近头部的环纹较细,头部红棕色。足8对,中部4对较明显;尾如蚕尾[2]。质脆,易折断,断面略平坦,淡黄白色。子座细长圆柱形,长4~7cm,直径0.3cm。表面深棕色至棕褐色,有细纵皱纹,上部稍膨大;质柔韧,断面类白色。气微腥,味微苦。 -
珊瑚复合盖髓剂的细胞毒性评价
目的 采用MTT法评价珊瑚复合盖髓剂的细胞毒性.方法 选用L929小鼠成纤维细胞为靶细胞,同时对珊瑚复合盖髓剂及其各主要成分浸液进行毒性检测,计算细胞相对增殖率,用6级毒性分类法评级. 结果 培养期各组细胞大量增殖,毒性级为0级.结论 珊瑚复合盖髓剂具有良好的细胞生物相容性.
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BMP珊瑚植于下颌骨表面后的早期组织学表现
目的研究复合BMP的珊瑚人工骨贴附移植于下颌骨表面后局部成骨及与下颌骨的结合情况.方法12只杂种犬被随机分为4组,每组3只.将复合rhBMP-2的珊瑚块植于下颌骨表面,用钛钉将其固定,令其与下颌骨表面尽量贴合.术后于不同时间点取材,制作组织学切片,光学显微镜观察.结果1W,脱钙后局部残留大量空隙,材料周围包绕纤维结缔组织,组织内可见细胞增生聚集,间充质细胞增殖分化,大量炎细胞浸润.2W,材料内部细胞增生聚集更加明显,血管成分增多,可见新生骨样组织形成.3W,大量新生骨样组织形成,并有片状钙化的新骨沉积,编织骨形成.6W,珊瑚内大量成骨,新骨融合生长并改建成成熟的板层骨,与颌骨形成完全的骨界面.结论复合BMP的珊瑚人工骨贴附移植于下颌骨表面后早期即可成骨,并可以与下颌骨形成骨结合.
关键词: 珊瑚 移植 表面贴附 重组人骨形态发生蛋白-2