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基于γ-H2AX生物标志物DNA遗传毒性检测方法的研究进展
DNA双链断裂(DNA double strand breaks,DSBs)是细胞DNA损伤类型中严重的一种.DS-Bs可以激活细胞的DNA损伤应答(DNA damage response,DDR)机制,从而使组蛋白H2AX迅速磷酸化(磷酸化的H2AX组蛋白被称为γ-H2AX).随后,γ-H2AX聚集在双链断裂处,形成由大量γ-H2AX聚集成的灶点(foci).检测细胞中的γ-H2AX灶点数目就可以用于评价DNA双链断裂情况,进而可以用来评价遗传毒性因子的致突变能力.目前,国内外有多种对γ-H2AX灶点的检测方法,包括蛋白质印迹法(Western blotting)、免疫荧光染色显微镜检测法、全细胞酶联免疫反应(Whole-cell ELISA)检测法和流式细胞术检测法等,每种方法各有优缺点.本文将重点阐述近几年国内外γ-H2AX检测方法的新进展,并总结对比不同方法之间的操作步骤、统计参数及优缺点,分析γ-H2AX检测方法在遗传毒理方面的应用前景.
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Ku70的多样性功能及研究展望
Ku70是一种非常丰富的核蛋白,广泛存在于人类、哺乳类动物、线虫、昆虫、酵母、原核生物以及植物体内.现代研究发现,Ku70在DNA双链破裂修复、DNA复制、基因转录调控、端粒结构的维持等多种细胞活动中,均扮演着重要角色.本文主要对Ku70结构、功能及其研究展望作一个简要概述.
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卵母细胞和胚胎发育中的DNA双键断裂损伤
在体细胞中,DNA双键断裂(DNA doubled-strand breaks,DSBs)是目前已知DNA损伤中为严重的一种.进一步的研究发现,DSBs能够引起哺乳动物卵母细胞凋亡,导致生殖能力下降.针对DSBs后机体进行的DNA损伤应答通路的研究在生殖领域也成为热点.但是卵子发生和后期胚胎发育过程中,参与DSBs损伤修复机制的基因,是怎样突破染色体精确结构,终完成DNA修复,维持基因组稳定或启动细胞凋亡过程的,这一复杂调控机制尚不十分明确,亟需进一步研究.
