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2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英对BRL-3A细胞增殖、凋亡及胰岛素样生长因子2表达的影响
目的 探讨2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英(TCDD)对大鼠肝BRL-3A细胞增殖、凋亡以及胰岛素样生长因子2(IGF2)表达的影响.方法 培养BRL-3A细胞,TCDD5,10,15和20 nmol·L-1作用24h,MTT 法检测细胞存活.BRL-3A细胞紫外线照射2min或经无血清培养后,加入TCDD 10 nmol·L-1,流式细胞计数方法检测细胞凋亡.荧光定量PCR方法检测TCDD 10 nmol·L-1对BRL-3A细胞Igf2 mRNA表达的影响,Western印迹法检测IGF2蛋白表达.结果 TCDD 5,10,15和20 nmol·L-1作用24h,BRL-3A细胞的存活率分别为(107.3±0.9)％,( 122.6±1.2)％,(115.2±0.4)％和(112.3±1.1)％,明显高于正常对照组(P＜0.05),TCDD 10 nmol· L-1对BRL-3A细胞增殖促进作用强.紫外线照射2 min的溶剂对照组BRL-3A细胞的凋亡率为(26.4±5.0)％,加入TCDD 10 nmol·L-1细胞凋亡率明显降低为(12.2±3.2)％(P＜0.05)；无血清培养的溶剂对照组72和120 h BRL-3A细胞的凋亡率分别为(49.6±7.6)％和(51.6±9.1)％,加入TCDD 10 nmol·L-1组的细胞凋亡率显著降低,分别为(22.0±5.1)％和(31.0±5.5)％(P＜0.05).与溶剂对照组相比,TCDD 10 nmol·L-1组Igf2基因的表达随作用时间逐渐增高,TCDD作用24h细胞Igf2 mRNA的表达增加了1.67倍,蛋白的表达增加了2.6倍(P＜0.05).结论 TCDD具有刺激BRL-3A细胞增殖和抑制该细胞凋亡的作用；TCDD 可能通过上调BRL-3A细胞中IGF2的表达,调节细胞的增殖和凋亡.
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二噁英对小鼠异位子宫内膜中IL-1β表达的影响
目的 探讨二噁英致子宫内膜异位症发病可能的作用机制.方法 ①60只小鼠建立子宫内膜异位症模型,分别给予二噁英(TCDD)灌胃染毒,每21天1次,于建模术后3、6、9周处死,鉴定异位病灶的形成,测量异位病灶面积;②按处死时间随机分为3周组、6周组、9周组,每组20只;每组再随机分成4个剂量组,分别是:对照组(给玉米油)、低剂量染毒组(1μg/kg TCDD)、中剂量染毒组(3μg/kg TCDD)和高剂量染毒组(10μg/kg TCDD);③采用半定量逆转录-聚合酶链反应检测不同染毒剂量组小鼠模型子宫内膜异位症异位病灶中白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达水平.结果 ①随TCDD染毒时间的延长和染毒剂量的增加,小鼠子宫内膜异位病灶面积相应增加,F值分别为107.349和171.408,均P<0.05;②小鼠子宫内膜异位病灶中白细胞介素-1β mRNA表达的上调,随TCDD染毒时间延长,F值分别为10.600、10.656和12.182,均P<0.05;随染毒剂量的增加,中剂量组和高剂量组F值分别为10.332和11.347,均P<0.05).结论 TCDD染毒促进了小鼠子宫内膜异位症模型异位病灶的发展,白细胞介素-1β表达上调可能是TCDD促异位病灶发展的作用机制之一.
