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BCA法测定猪肺表面活性物质及其冻干粉中的表面活性蛋白质
目的:建立肺表面活性物质及其冻干粉中表面活性蛋白质的含量测定方法.方法:采用BCA试剂盒测定.结果:蛋白质在10～80 μg范围内,线形关系良好,r=0.9998;在猪肺表面活性物质及其制剂中回收率分别为98.19%及98.41%;精密度(RSD)为0.61%;磷脂及辅料对测定无干扰.结论:本方法可简单快速地测定猪肺表面活性物质及其冻干粉中表面活性蛋白质的含量,专属性强、准确度高.
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BCA法定量蛋白质浓度的不确定度评定
用BCA法定量我实验室制备的免疫治疗蛋白LTT的蛋白含量,对测定过程的各不确定分量进行了分析与评定,测量的不确定度主要来源于样品的称量、标准曲线的拟合,评定结果表明,当蛋白浓度为14.88%时,其扩展不确定度为0.028%.
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4种常用蛋白浓度测定方法的比较
目的 比较4种常用蛋白浓度测定方法的准确性及各自的影响因素. 方法 采用Lowry法、BCA法、磺基水杨酸沉淀法、Bradford法等4种常用蛋白浓度测定方法对几种样品进行对比试验. 结果 研究了蛋白质样品中的添加物对不同方法的影响.采用BCA法测定PEG-IL-6的蛋白浓度以及采用Bradford法测定变性液中的蛋白浓度不仅准确而且重复性好. 结论 确定PEG-IL-6的佳蛋白浓度测定方法为BCA法,而包涵体变性液中的蛋白浓度只能用Bradford法测定.
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EGCG对体外培养的胚鼠皮层神经细胞的保护作用
目的 研究表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对FeSO4和H2O2诱导神经细胞损伤的保护作用.方法 采用FeSO4和H2O2作用产生自由基的方法诱导离体培养的小鼠胚鼠大脑皮层神经细胞损伤建立模型.倒置相差显微镜进行神经元形态学观察,中性红比色法和MTT法测定神经细胞的存活数量和活性,TBARS法和BCA法分别测定神经细胞中丙二醛(MDA)的水平和总蛋白合成的能力.结果 与FeSO4和H2O2损伤组进行比较,EGCG增加了神经细胞的存活数量和活性,降低MDA的含量和提高了总蛋白的合成能力.EGCG显示出较强的抗氧化能力.结论 EGCG对FeSO4和H2O2诱导神经细胞损伤有明显的保护作用,其作用机制可能源于EGCG清除自由基和抑制脂质过氧化过程.
关键词： 表没食子儿茶酚没食子酸酯 还原型谷胱甘肽 神经元 保护 BCA法 -
一种快速简便测定奶粉中蛋白质的方法
目的 尝试建立一种快速准确地测定奶粉中蛋白质含量的方法.方法 使用三氯乙酸沉淀蛋白质后,运用BCA(二喹啉甲酸)法,在570 nm波长处,分别测定标准蛋白质应用液与样品稀释液的吸光度值,基于测定液中蛋白质含量与其吸光度值呈正比关系,计算出样品中蛋白质的含量.结果 待测溶液中蛋白质浓度在0~250 μg/ml 范围内标准曲线呈线性关系,其回归方程为:Y=301.12X-73.42,相关系数r=0.998,平均回收率为100.2%.结论 结合三氯乙酸沉淀的BCA法适用于奶粉中蛋白质的快速检验和掺伪检验.
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抗体的系统性检测方法
21世纪随着现代生物技术、信息技术在生物医学工程学等研究领域的不断深入,以细胞工程技术和基因工程技术为主体的抗体工程药物近年来取得了突破性进展,其应用已涉及医学、农业、食品、环境等众多领域.当前生物医药正在成为发展潜力无限的产业,而生物医药领域中发展快的是抗体工程药物,在基础研究、蛋白纯化、环境与食品监测、疾病诊断预防及治疗和优生优育等方面均有不可替代的重要作用.虽然抗体的制备技术日趋完善,但用于诊断和治疗的抗体必须符合高纯度、高效价、高可用性的要求,对抗体的制备、分离和鉴定就显得尤为重要.本文简要阐述了抗体工程药物制备中对抗体成分的系统性检测方法,包括纯度检测、特异性检测、亲和力检测、效价检测等,并对抗体这种特殊蛋白的常用定量检测方法进行了比较.
