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泛素-蛋白酶体系文献资料
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二苯乙烯苷对基因转染PC12细胞α-突触核蛋白过表达和泛素-蛋白酶体系统的影响
目的 观察何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)在体外实验中对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)过表达的影响及其作用机制.方法 不同浓度的TSG与α-Syn基因转染PC12细胞共孵育24 h,应用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶漏出法确定该药对培养细胞的无毒范围,RT-PCR法检测细胞中α-Syn mRNA含量的变化,蛋白质印迹(Western blotting)法检测α-Syn、泛 素化蛋白羧基端水解酶( UCH-L1)和parkin蛋白的表达,观察TSG对它们的影响.结果 TSG对培养细胞的无毒范围为6.25～100 μmol·L-1.在此剂量范围内的TSG与α-Syn基因转染PC12细胞孵育24 h,能够明显减少模型细胞α-Syn mRNA含量,抑制α-Syn蛋白表达和聚集,增强UCH-L1和parkin蛋白表达.结论 TSG在体外对基因转染细胞的αr-Syn过表达和聚集有明显抑制作用,其作用机制与抑制α-Syn合成和增强α-Syn降解有关.
