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转基因西洋参冠瘿组织中人参皂苷类成分的分离鉴定
目的 分离鉴定转基因西洋参冠瘿组织中的化学成分.方法 以本研究组转导和培养的西洋参冠瘿组织为实验材料,体积分数为70%乙醇超声提取,硅胶柱色谱分离,用MS,1H-NMR、13C-NMR、HMBC等谱学方法确定结构.结果 分离得到5个化合物,分别为20(S)-人参皂苷Rh1(Ⅰ)、20(S)-人参皂苷Rg3(Ⅱ)、人参皂苷Re(Ⅲ)、20(S)-达玛烷-3β,6α,12β,20,25-五醇6-O-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ)和人参皂苷Rgl(Ⅴ).结论 上述5个成分均为首次从转基因西洋参冠瘿组织培养物中分离得到,化合物Ⅳ为新天然产物.
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转基因西洋参冠瘿组织中多糖的分离和纯化
目的 分离纯化转基因西洋参冠瘿组织中多糖组分,为从该转基因材料中寻找重要生物活性前体多糖药物提供科学依据.方法 用水醇提取法,以DEAE Sepharose FF和Sephacryl S-100柱色谱进行多糖的分离纯化,采用高效液相色谱测定单糖组成,色谱和光谱学方法鉴定其纯度和化学结构.结果 分离得到4个精多糖(PPQ50-1、PPQ50-2、PPQ70-1和PPQ70-2),凝胶色谱法(Sephadex G-200)和旋光法证实了它们为化学均一性多糖;凝胶色谱法测得4种精多糖的相对分子质量分别为4.7×104,2.9×105,7.5×104和1.3×105;对得量较多的PPQ50-2和PPQ70-2进行了结构分析,证明二者均为葡聚糖;并利用NaIO4氧化反应和核磁共振谱等方法对PPQ50-2的化学结构进行了初步的糖基键合分析.结论 首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到4种化学均一性多糖成分,其中PPQ50-2和PPQ70-2均为葡聚糖.
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转基因西洋参冠瘿组织化学成分研究
目的 研究转基因西洋参Panaxquinquefolium冠瘿组织中的化学成分.方法 用大孔树脂、硅胶柱色谱等方法对西洋参冠瘿组织乙醇提取物进行分离,根据其理化性质及波谱数据对分离所得的化合物进行结构鉴定.结果 分离并鉴定了9个化合物.分别为:20(R)-拟人参皂苷-RT5(I)、人参皂苷Rh2(II)、胡萝卜苷(II)、棕榈酸甲酯(IV)、亚麻油酸甲酯(V)、邻苯二甲酸二丁酯(VI)、9,12-十八碳二烯酸(VII)、棕榈酸(VII)和β-谷甾醇(IX).结论 9个化合物均为首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到.
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转基因西洋参冠瘿组织化学成分研究(Ⅱ)
目的 研究转基因西洋参Panax quinquefolium冠瘿组织中的化学成分.方法 采用大孔吸附树脂、硅胶柱等色谱技术对西洋参冠瘿组织乙醇提取物进行分离纯化,并根据理化性质及波谱数据对分离所得的化合物进行结构鉴定.结果 从西洋参冠瘿组织乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为:尿嘧啶核苷(1)、α-D-呋喃果糖甲苷(2)、1-O-β-D-吡喃葡萄糖-(2S,3S,4R,8E)-2-[(2'R)-2'-羟基棕榈酰胺]-8-十八烯-1,3,4-三醇(3,脑苷脂)、豆甾醇(4)、奎酸(5)、奎酸乙酯(6)、十三碳-6-烯(7)、二十四烷醇(8)、邻苯二甲酸二异辛酯(9)、十六酸甲酯(10).结论 化合物3为首次从人参属植物中分离得到,10个化合物均为首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到.
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转基因西洋参冠瘿组织中多糖组分提取条件的优化考察
目的 优化考察转基因西洋参冠瘿组织中多糖提取条件.方法 用正交设计法优选西洋参冠瘿组织中多糖的佳提取工艺,选取提取温度、加水量、提取时间和提取次数四个考察因素.结果 正交实验结果显示:西洋参冠瘿组织中多糖的佳提取工艺:提取温度为70℃,40倍溶剂,提取3次、3 h/次.结论 优选得到的工艺简单易行,稳定性好.
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西洋参冠瘿组织与西洋参药材人参皂苷含量比较研究
目的:比较西洋参冠瘿组织与西洋参药材人参总皂苷含量及各人参皂苷含量的差异,为采用生物技术方法生产人参皂苷提供理论依据.方法:采用香草醛-冰醋酸-高氯酸紫外显色法测定西洋参冠瘿组织与西洋参药材中总皂苷含量;用HPLC法测定西洋参冠瘿组织与西洋参药材中人参皂苷Rb1、Rb3、Rc、Re的含量.结果:(1)培养27 d西洋参冠瘿组织总皂苷积累量达到高,与西洋参药材总皂苷含量相当;(2)西洋参冠瘿组织中人参皂苷Rb1、Re的含量约为西洋参药材的50%,人参皂苷Rc的含量约为西洋参药材的80%,人参皂苷Rb3的含量远远高于西洋参药材,约为西洋参药材的16倍.结论:西洋参冠瘿组织可作为大规模生产人参皂苷的新途径.
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西洋参冠瘿组织悬浮培养及其人参总皂苷的含量测定
目的:在西洋参冠瘿组织固体培养的基础上,进一步考察其悬浮培养条件及人参总皂苷含量,为利用西洋参冠瘿组织大规模生产药用成分提供科学根据.方法:考察固体培养和悬浮培养对西洋参冠瘿组织生长和人参总皂苷累积的影响,并检测悬浮培养液中碳源的消耗.结果:冠瘿组织在悬浮培养中生长速度快,生长量和总皂苷产量分别达到0.776 g DW/flask和19.4 mg/flask,是固体培养的2.11和1.64倍;培养基中蔗糖利用率达到91.8%,远远高于西洋参愈伤组织悬浮培养中的蔗糖利用率.结论:西洋参冠瘿组织悬浮培养既可大大提高生物工程产品的生物量,又能获得较高含量的人参总皂苷,可为大规模生产药用活性物质提供参考.
