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重组人粒细胞刺激因子测活方法中几种常见显色方法的对比分析
目的 分析重组人粒细胞刺激因子生物学活性检测中,以NFS-60细胞为测活基础的几种常见显色/裂解/检测方法,所得检测结果是否一致.方法 应用NFS-60细胞/MTT染色法、NFS-60细胞/MTS染色法、NFS-60细胞/CCK-8染色法、NFS-60细胞/化学发光法等检测重组人粒细胞刺激因子生物学活性,并对结果进行统计分析.统计分析了NFS-60细胞/MTT法双波长(570 nm检测,630 nm参比)、单波长(570 nm检测和630 nm检测)结果.分析比较了NFS-60细胞/MTS动态检测法、NFS-60细胞/CCK-8动态法检测结果.结果 各生物学活性检测方法的检测结果差别不显著(P＞0.05);NFS-60/MTT法双波长、单波长检测结果差别不显著(P＞0.05).NFS-60细胞/MTS动态检测法、NFS-60细胞/CCK-8动态法与NFS-60细胞/MTT染色法检测结果间差别不显著(P＞0.05).结论 以NFS-60细胞为测活基础的几种常见的显色/裂解/检测方法,所得检测结果一致,为各实验室(应用不同显色/裂解/检测方法)给出的数据是否可以综合利用提供依据,为2015年版《中国药典》中重组人粒细胞刺激因子生物学活性检测方法的扩充提供支持,也为其他细胞因子生物学活性检测方法的扩充提供借鉴.
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用噬菌体随机肽库筛选刺激细胞生长的活性小肽
目的筛选刺激NFS-60细胞生长的活性小肽.方法以G-CSF依赖细胞系NFS-60为靶细胞,筛选随机6和15肽库,经3轮筛选后,随机挑取60个噬菌体克隆进行生物学活性和结合活性鉴定.结果得到6个刺激NFS-60细胞生长的阳性噬菌体克隆.经细胞ELISA检测,这6个小肽都可与NFS-60细胞结合,并且这6个小肽与细胞结合的量,都与所加入的噬菌体的量成正比,经测序未找到共同序列.结论从随机噬菌体肽库中筛到的活性小肽,可以模拟某些生长因子的活性部位,来刺激靶细胞的生长.
关键词： NFS-60细胞 噬菌体肽库 粒细胞集落刺激因子(G-CSF) 筛选
