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跨膜蛋白CMTM2在人睾丸和精子中的表达及定位
目的:通过研究跨膜蛋白CMTM2在睾丸和精子中的表达来探讨CMTM2蛋白在男性生殖系统中潜在的功能.方法:Western blot方法检测CMTM2在人睾丸及精子中的表达,免疫组织化学及组织免疫荧光方法检测CMTM2在人睾丸组织中的定位,TRITC-CMTM2及FITC-Hoechst免疫荧光双染法检测CMTM2在人精子顶体反应前后的定位.结果:CMTM2在人睾丸及精子中均有表达,在睾丸组织中CMTM2定位于各级生精细胞的细胞膜,睾丸组织冰冻切片免疫荧光检测的结果与免疫组织化学一致,进一步证实CMTM2存在于睾丸各级生精细胞的细胞膜,在精子中则定位于核后区附近.以TRITC-CMTM2及FITC-Hoechst免疫荧光双染法检测CMTM2在人精子顶体反应前后的定位,在顶体反应前后,CMTM2在人精子的定位及表达量未发生改变.结论:CMTM2在人睾丸和精子中均有表达,其表达定位具有细胞特异性和区域特异性,提示其可能在人睾丸精子发生和精卵融合过程中发挥作用,是男性不育研究的靶基因.CMTM2在男性生殖系统中的表达呈现细胞与生精区域的特异性,提示其高度参与生精功能,但目前针对CMTM2在男性生殖系统与精子生成过程中的作用仍未明确,今后可以采用体外受精-胚胎移植等技术进一步研究CMTM2的作用.
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CMTM2改善环磷酰胺致转基因小鼠模型生殖毒性作用并影响StAR蛋白的表达
目的:探讨在转基因小鼠模型中CMTM2能否改善环磷酰胺(CP)引起的生殖毒性作用以及其对固醇合成快速调节蛋白(StAR)表达的影响. 方法:随机选取CMTM2转基因小鼠20只分成2组:CMTM2+ CP[CMTM2转基因小鼠腹腔内连续7d注射50 mg/(kg,d)CP]组和CMTM2+NS(CMTM2转基因小鼠腹腔内连续7d注射等量生理盐水)组,另取同源野生型C57BL/6J小鼠20只分成2组:WT +CP[野生型C57BL/6J小鼠腹腔内连续7d注射50 mg/(kg,d)CP]组和WT+NS(野生型C57BL/6J小鼠腹腔内连续7d注射等量生理盐水)组.30 d后各组小鼠处死取相应标本,放免法检测血清睾酮水平,分析各组小鼠精子浓度、精子活动率差异,Western印迹检测睾丸StAR蛋白表达. 结果:对比CMTM2+ NS组,CP能够降低CMTM2+ CP组小鼠的血清睾酮含量[(42.98±3.25)nmol/L vs(46.74±3.38)nmol/L]、精子浓度[(16.89±1.17)×106/ml vs (24.68±0.95)×106/ml]以及精子活动率[(72.75±1.25)％ vs (85.14±1.12)％] (P＜0.05),表现出明显的生殖毒性；对比WT+CP组,CMTM2+CP组小鼠血清睾酮[(42.98±3.25) nmol/L vs (37.97±4.17) nmol/L]、精子浓度[(16.89±1.17)×106/ml vs(12.75±1.02)×106/ml]以及精子活动率[(72.75±1.25)％ vs (50.52±1.37)％]下降程度均明显减弱(P＜0.05),而CMTM2+ CP组的StAR蛋白表达水平则较高(1.16±0.07 vs 0.69±0.08,P＜0.05).结论:CMTM2可能通过调节StAR蛋白表达对抗CP引起的生殖毒性,从而在生殖系统中发挥一定的保护作用.
