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白血病/酶学文献资料
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同位素示踪微量法测定白血病细胞DNA-甲基转移酶活性
目的:建立3H标记同位素示踪微量分析法用于白血病细胞MTase活性测定,并评价其准确性、敏感性及可靠性;了解急性白血病患者骨髓细胞MTase活性改变的规律.方法:以Poly[d(I-C)d(I-C)]为甲基受体,3H-SAM为甲基供体,测定骨髓单个核细胞和白血病细胞系的MTase活性.以细胞裂解蛋白作用2 h所得的每分计数值表示酶活性.每次测定设不加Poly[d(I-C)d(I-C)]的阴性对照,以HL-60细胞MTase活性为100%,所测样本值均和其相比,以相对数表示结果.结果:当细胞裂解蛋白质量在0.25～7.5μg之间时,本法线性良好,Y每分计数＝2 864X+142(r＝0.998,P＜0.01).方法灵敏度为2.4×104Bq,批间变异系数11.4%(n＝9),批内变异系数5.9%(n＝4).15例急性白血病MTase活性平均值为(9.1±4.6)%,较11例非恶性血液病对照组[平均(2.1±1.6)%]明显升高.11例缓解期急性白血病MTase活性平均(4.1±2.6)%,和对照组无明显区别.结论:同位素微量分析法测定MTase活性灵敏度高、重复性好.MTase活性增高是急性白血病的高发现象.急性白血病缓解后MTase活性下降.MTase活性测定可能对监测白血病病情变化有一定意义.
