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葛花解酲方对乙醇性 HBV 转基因小鼠肝癌癌前病变细胞周期调控因子表达的影响
目的:观察葛花解酲方对乙醇性 HBV 转基因小鼠肝癌癌前病变细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)及 p27细胞周期调控因子蛋白表达的影响,探讨葛花解酲方阻断肝癌癌前病变的作用机制。方法将24只 HBV 转基因小鼠适应性饲养1周后,随机分为对照组、模型组、治疗组,每组8只。各组小鼠于22周末进行取材光镜观察肝组织病理学改变并用免疫组织化学法检测 CyclinD1、CDK4及 p27 KIP1蛋白的表达。结果与模型组比较,给药组肝组织病理形态学得到明显改善;与对照组比较,模型组 CyclinD1和 CDK4阳性表达率显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组 CyclinD1和 CDK4阳性表达率显著下降(P <0.05);与对照组比较,模型组 p27 KIP1阳性表达率显著降低(P <0.05),与模型组比较,治疗组 p27 KIP1阳性表达率显著升高(P <0.05)。结论葛花解酲方可以通过下调癌基因 CyclinD1和 CDK4的表达,上调抑癌基因 p27 KIP1的表达,从而达到保护肝脏损害、逆转肝癌癌前病变的作用。
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转基因 HBV 小鼠急性肝损伤的生物学特性研究
目的:研究四氯化碳(CCL4)诱导转基因乙型肝炎病毒(HBV)小鼠急性肝损伤的生物学特性的改变。方法选取32只健康雄性 C57BL/6小鼠作为空白对照组,实验组:选用32只健康雄性 C57BL/6小鼠作为 CCL4干预组,32只 健 康 雄 性 HBsAg 表达阳性 C57BL/6-HBV 转基因小鼠为 HBV+ CCL4干预组。空白对照组按0.5 mL/kg腹腔注射橄榄油溶液,于0、24、48、72 h 4个时间点取标本。实验组每组各留8只作为空白对照,均按0.5 mL/kg腹腔注射橄榄油溶液,0 h 处死;其余24只各自随机分组,一次性给予0.5 mL/kg 腹腔注射10%CCL4橄榄油溶液,分别于24、48、72 h 每组随机挑选8只小鼠,采集标本,全血用于计数白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT),取血清测定天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)。结果与空白对照组比较,CCL4干预组24 h AST、ALT 明显升高,差异有统计学意义(P <0.01);HBV+CCL4干预组与 CCL4干预组 相 比,AST、ALT 水平在损伤24 h 达到峰值,且 差异有统计学意义(P <0.01);CCL4干预组和 HBV+CCL4干预组24 h 时 WBC 均呈现下降,且两组差异有统计学意义(P <0.05);HBV+CCL4干预组 RBC 在24、48、72 h 均降低,与0 h 比较差异有统计学意义(P <0.05);HBV+CCL4干预组 PLT在48、72 h 均降低,与0 h 比较差异有统计学意义(P <0.05)。HBV 转基因小鼠在 CCL4诱导下24 h AST、ALT显著升高,WBC、RBC、PLT 均降低;ALP、TP、ALB 无明显差异,这些指标的改变符合急性肝损伤模型的标准。结论成功建立 HBV 转基因小鼠急性肝损伤模型,为进一步研究急性肝损伤的发病机制及其他变化提供了可靠的实验平台。