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养精胶囊对GC-1细胞增殖、凋亡及caspase-3表达的影响
目的 探讨养精胶囊改善生精功能进而治疗男性不育症可能的作用机制.方法 在GC-1细胞中加入养精胶囊提取液,分为空白组和低、中、高剂量组,在作用24、48、72 h后采用MTT法检测各组的吸光值;作用48 h后,采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡;用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测凋亡相关基因caspase-3的表达.结果 在作用24、48、72 h后,养精胶囊提取液低、中、高剂量组细胞增殖明显加快,其吸光度与同期空白组相比有统计学意义(P＜0.01);养精胶囊提取液低、中、高剂量组作用GC-1细胞48 h后,S期细胞比例逐渐增加,与空白组相比有统计学意义(P＜0.05);细胞凋亡率明显降低,与空白组相比有统计学意义(P＜ 0.01);caspase-3mRNA表达呈下降趋势,中、高剂量组与空白组相比有统计学意义(P＜0.01);caspase-3蛋白表达呈下降趋势,高剂量组与空白组相比有统计学意义(P＜0.01).结论 养精胶囊具有促进GC-1细胞增殖、抑制细胞的凋亡,降低caspase-3的表达水平的作用,且呈剂量依赖性.
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养精胶囊大给药量实验研究
目的:测定养精胶囊一日灌胃给药的小鼠大给药量,以观察其毒性.方法:20只小鼠按8.71 g(生药)/kg,1日3次灌胃给药(临床成人1日口服剂量的249倍),观察其体重变化和死亡情况.结果:给药后小鼠体重未见明显改变,未发现死亡.结论:养精胶囊安全性较大.
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养精胶囊对大鼠精囊分泌功能的影响研究
目的:观察养精胶囊对于老年雄性大鼠精囊腺分泌功能的影响;方法:将老年SD雄性大鼠随机分为空白组、十一酸睾酮对照组、养精胶囊高、中、低剂量组共5组,灌胃30 d后,剖杀大鼠,摘取精囊,将精囊液挤入试管称重,精囊标本放入甲醛固定液进行组织学观察;结果:养精胶囊高剂量组可以明显的改善大鼠精囊的分泌功能,分泌量与空白对照组比较,有极显著统计学差异,中、低剂量组有改善趋势,精囊组织学显示,给药组相对于正常组细胞增殖较活跃,可见较多分裂期细胞,管腔内成熟精子数目较多,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好.结论:养精胶囊可以改善睾丸生精细胞同时提高精子密度与活率.
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养精胶囊通过调控StAR启动子促进睾酮合成的研究
目的 探讨养精胶囊促进睾丸间质(Leydig)细胞合成睾酮(T)功能的具体作用机制.方法 在Leydig细胞(MLTC-1细胞系)中加入不同剂量养精胶囊提取液24 h后,用化学发光法检测细胞上清T浓度;用免疫荧光显微镜分析类固醇快速调节蛋白(StAR)的表达情况;用RT-PCR及Westem blot法测StAR mRNA及蛋白质的表达;用双荧光素酶报告基因实验检测StAR启动子的活性.结果 低、中、高剂量养精胶囊提取液作用24 h后,均可以促进MLTC-1细胞合成睾酮的功能;养精胶囊提取液可以促进MLTC-1细胞StAR免疫荧光的表达;养精胶囊提取液可以促进MLTC-1细胞StAR mRNA和蛋白质的表达;养精胶囊提取液可以提高MLTC-1细胞中StAR启动子的活性.结论 养精胶囊能通过调控Leydig细胞中StAR启动子的活性,促进StAR mRNA和蛋白的表达,进而提高睾酮合成的功能.
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养精胶囊对老年SD大鼠性功能的影响
目的 观察养精胶囊对老年雄性SD大鼠性功能的影响,并探讨其可能的影响机制.方法 将40只老年雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组给予养精胶囊(0.5g/kg·d-1)灌胃4周,对照组给予等剂量生理盐水灌胃相同时间.4周后通过观察两组大鼠阴茎勃起变化、检测血清睾酮水平和免疫组化方法检测大鼠阴茎海绵体组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及海绵体组织血管中CD34分子表达的变化情况等评价大鼠性功能变化情况.结果 (1)对照组老年大鼠干预后血清总睾酮水平较干预前下降,但组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);养精胶囊组老年大鼠干预后血清总睾酮水平较干预前有所提高,但差异亦无统计学意义(P＞0.05);(2)在老年大鼠性功能指标方面:养精胶囊干预组老年大鼠阴茎勃起次数、勃起潜伏期及勃起维持时间均较对照组有所改善.(3)阴茎海绵体组织HE染色结果提示:养精胶囊组老年大鼠阴茎海绵体组织血管管腔明显扩张,充血,管腔内壁变薄;对照组老年大鼠阴茎海绵体组织内,血管管腔未见明显充盈扩张,管腔内充血不明显,且管腔有大量残留的陈旧性血液.(4)免疫组化结果提示:两组大鼠海绵体组织中,均可见深染的棕褐色阳性颗粒,但深染程度和颗粒分布密度不一.低倍镜(×100)视野下观察,药物干预后实验组大鼠阴茎海绵体组织中eNOS的阳性颗粒的数量明显高于对照组(P＜0.05);(5)微血管密度结果提示:实验组老年大鼠阴茎海绵体组织血管内皮中CD34的表达明显强于对照组,高倍镜下(×400)观察,实验组微血管密度MVD值较对照组升高(P＜0.05).结论 养精胶囊能促进血清睾酮的分泌,增强阴茎海绵体组织内eNOS的表达,这可能是养精胶囊改善大鼠性功能和阴茎勃起的作用机制.
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养精胶囊对Leydig细胞增殖、凋亡和睾酮合成的影响
目的 探讨养精胶囊对Leydig细胞增殖、凋亡和睾酮合成功能的影响.方法 在Leydig中加入不同剂量养精胶囊提取液24h、48h、72h后,用MTT法检测各组的吸光值;用流式细胞仪分析Leydig细胞在加入不同剂量养精胶囊提取液48h后的细胞凋亡率;用化学发光法测定Leydig细胞在加入不同剂量养精胶囊提取液24h后合成T的变化.结果 Leydig细胞在加入中、高剂量养精胶囊提取液48h和72h后,细胞增殖明显加快,其吸光值与空白组相比差异有统计学意义(P＜0.05);在Leydig细胞中加入中、高剂量养精胶囊提取液48h后,细胞凋亡率和死细胞率明显降低,活细胞率明显提高,与空白组相比差异有统计学意义(P＜0.01);在Leydig细胞中加入中剂量养精胶囊提取液24h后,睾酮合成明显增加,与空白组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 养精胶囊可能通过影响Leydig细胞的增殖、凋亡,增强其分泌功能等多途径,而提高睾酮合成的功能,并与时间和剂量有关.这也证实了益肾填精法能直接作用于Leydig细胞而影响睾酮的合成.
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养精胶囊联合锌硒宝对不育患者精子DNA完整性的影响
目的 探讨应用养精胶囊联合锌硒宝治疗男性不育对患者精子DNA完整性的影响.方法 选择60例合并精子DNA完整性异常[DNA片段化指数(DFI)＞10%]的不育患者,随机分为治疗组30例与对照组30例,治疗组口服养精胶囊和锌硒宝,对照组服用维生素E,治疗3个月.分别通过精子染色质结构分析(SCSA)和计算机辅助精液分析(CASA)检测DFI和精液常规参数,并分析治疗前后2组患者各参数的变化.结果 治疗前2组精子密度、活力、正常形态百分率和DFI各项参数差异无显著性(P＞0.05).治疗前60例不育患者DFI与精子活力呈显著负相关(r=-0.58,P＜0.01),而与精子密度和精子正常形态百分率无显著相关性(P＞0.05).治疗3个月后,治疗组的精子密度、活力、正常形态百分率与治疗前相比差异均有显著性(P＜0.05),治疗组的DFI值[(9.4±7.2)%]与治疗前[(22.2±10.3)%]相比显著下降(P＜0.01);对照组上述参数与治疗前相比差异均无显著性(P＞0.05).结论 养精胶囊联合锌硒宝可显著降低不育患者的精子DFI值,提示应用养精胶囊和锌硒宝治疗男性不育可显著改善患者的精子DNA完整性.
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养精胶囊在男性生殖领域的临床应用
男性性功能障碍(MSD)和精子异常是临床上常见的男科疾病,严重影响夫妻性生活的质量和家庭和谐.中医学认为"肾藏精,主生殖","肾者作强之官,伎巧出焉",因此,中医补肾法是治疗MSD和精子异常的基本治法.养精胶囊[由南京军区南京总医院制剂科生产提供,院内批准文号为:院临(2004)第01002号]是根据"肾藏精"理论,秉承"阴成形,阳化气"的理念设计而成,由淫羊藿、熟地、生黄芪、黄精、紫河车、当归等中药组成.方中淫羊藿有益肾助阳之功,熟地黄甘温质润入肾,善滋补肾阴,填精益髓,为补肾阴之要药,两者合用有补肾填精、补阴益阳的作用,共为君药;黄精补肾健脾,除了补益肾精外,更能以后天之精养先天之精,紫河车系血肉有情之品,能补肾益精,沙苑子与黄芪共用补气固精,当归养血活血,取精血同源、养血填精之功,共为臣药;煅牡蛎收敛固精,恢复"肾藏精"的功能,且能补充精子生长发育所需多种微量元素,为佐药.全方共奏补肾生精,补气养血之效.前期的研究表明,养精胶囊能够提高性欲,改善勃起功能和射精功能;可以提高少、弱精症患者的精子质量,在改善MSD和提高男性生育力方面均有良好的疗效.本文旨在整理前期养精胶囊在男性生殖领域的应用研究,现综述如下.
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HPLC法测定养精胶囊中淫羊藿苷的含量
目的:建立测定养精胶囊中淫羊藿苷含量的高效液相色谱方法.方法:采用Phenomenex C18柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(30∶70);流速:0.8ml/min;检测波长:270 nm.结果:淫羊藿苷在122.2～611.0 ng范围呈良好线性关系,r=0.999 6,平均回收率98.2%,RSD 1.33%.结论:本法简便可行,准确性高,重现性好,适用于该制剂含量控制.
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养精胶囊对老年大鼠精囊超微结构的影响
目的:观察养精胶囊对老年雄性大鼠精囊超微结构的影响,探讨其促进精囊分泌功能的作用机制.方法:老年SD雄性大鼠50只,18～ 20月龄.随机分为空白对照组、十一酸睾酮组(4 mg/kg)、养精胶囊高(1.26g/kg)、中(0.63g/kg)、低(0.315g/kg)剂量组共5组,每组10只.分别灌胃30 d后,摘取精囊,将精囊液挤入试管称重,测定各组精囊液果糖浓度,双侧精囊分别放入甲醛固定液和戊二醛中行组织学观察. 结果:大鼠精囊腺脏器系数(g/g×106)、精囊液重量(g)及果糖浓度(mg/ml)分别为:空白对照组1 164.5±212.6、0.83±0.30、4.35±0.31;十一酸睾酮组1 510.5±313.1、0.82±0.25、5.35±0.71;养精胶囊高剂量组1 484.3±262.7、1.14±0.18、5.30±0.45;养精胶囊中剂量组1 396.6±268.9、0.83±0.24、4.71±0.41;养精胶囊低剂量组1 475.0±305.2、0.74±0.28、4.50±0.23.养精胶囊高剂量组能显著促进精囊液的分泌(P＜0.05),养精胶囊中、低剂量组有改善趋势.苏木素伊红染色后镜下观察,养精胶囊组相对于空白对照组,上皮细胞增生更为活跃,细胞层次增多,细胞胞质丰富透明,内含有较多分泌颗粒、脂肪滴及脂褐素,腺腔腔缘模糊,腔内嗜伊红分泌物,其中结构改变以高剂量组为显著.养精胶囊组分泌颗粒的面数密度与体密度与空白组比较具有统计学差异(P＜0.05). 结论:养精胶囊可以通过改善精囊腺主细胞的分泌功能,进而促进精囊腺的分泌.
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养精胶囊对老年大鼠阴茎海绵体P-Erk1和P-Akt1表达的影响
目的:通过观察养精胶囊对老年大鼠阴茎海绵体中P-Erk1和P-Akt1表达的影响,探讨其可能的作用机制. 方法:将40只24月龄老年雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组20只.用药前实验组和对照组各取10只用于eNOS表达测定.实验组(n=10)给予养精胶囊[0.5 g/(kg·d)]灌胃,对照组(n=10)给予等剂量的生理盐水灌胃.4周后,处死所有大鼠,留取大鼠阴茎海绵体组织,HE染色,采用RT-PCR和免疫组化方法检测eNOS、P-Erk1及P-Akt1在阴茎海绵体组织中的表达. 结果:HE染色结果显示实验组老年大鼠阴茎海绵体组织血管较对照组明显充盈,管径明显增大.免疫组化结果显示,对照组大鼠阴茎海绵体组织中eNOS的表达干预前(19.35±1.50)和干预后(18.15±1.98)无显著性差异(P＞0.05)；实验组老年大鼠阴茎海绵体组织中eNOS的表达干预后(24.10±2.40)较干预前(18.80±2.04)显著增强(P＜0.05)；而干预后老年大鼠阴茎海绵体组织中eNOS的表达,实验组较对照组明显增强(P＜0.05)；大鼠阴茎海绵体组织中P-Erk1的表达,实验组明显低于对照组(实验组P-Erk1表达量为0.71±0.13,对照组P-Erk1的表达量为0.83±0.17,P＜O.01).而在同等内参GAPDH条件下,两组大鼠间P-Akt1的表达强度未见明显差异(实验组P-Akt1的表达量为0.58±0.17,对照组P-Akt1的表达量为0.48±0.13,P＞0.05). 结论:P-Erk1和P-Akt1在老年大鼠阴茎海绵体组织中均有表达,养精胶囊能改善老年大鼠勃起功能,作用机制可能与阴茎海绵体中P-Erk1的低表达相关.
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养精胶囊联合小剂量他达拉非治疗功能性不射精临床观察
目的:探索功能性不射精的有效治疗方法. 方法:55例患者随机分为治疗组30例和对照组25例.治疗组养精胶囊,5粒,每日3次；他达拉非5 mg,隔日1次,睡前1h服用；结合性刺激,减少性交次数,戒除手淫.对照组给予麻黄素片25 mg,睡前口服.两组治疗后1～3个月观察疗效. 结果:治疗组30例患者,痊愈11例,显效8例,好转6例,无效5例；2例治疗期间,女方怀孕,总有效率为83.34％.对照组25例患者,痊愈4例,显效3例,好转3例,无效15例,总有效率40.00％.两组经x2检验,P＜0.05,有统计学意义. 结论:应用养精胶囊联合小剂量他达拉非是治疗功能性不射精安全有效的可行性疗法.
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养精胶囊治疗弱精子症的临床观察
目的 探讨养精胶囊治疗弱精子症的疗效与安全性.方法 245例弱精子症患者随机分为治疗组195例与对照组50例,治疗组口服养精胶囊,对照组服用五子衍宗丸,治疗90天后评定疗效.结果 治疗组总有效率为88.68%,对照组总有效率71.11%,2组总有效率有显著性差异(P＜0.01).治疗组治疗后前向运动精子的比例逐渐增加,与治疗前比较有显著性差异(P＜0.01);对于合并少精子症,精子密度大于500万/mL,养精胶囊能增加精子密度,与治疗前比较有显著性差异(P＜0.01);增加精浆果糖的含量,与治疗前比较有显著性差异(P＜0.01).2组治疗期间均无严重不良事件发生.结论 养精胶囊治疗弱精子症疗效显著,对于精子密度大于500万/mL的少弱精子症,能显著增加精子密度,无严重不良反应.
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加味红白皂龙汤合养精胶囊治疗功能性不射精
[目的]探讨功能性不射精的治疗方法及其可能机制.[方法]以中药"红白皂龙汤"为主方,加大理气活血通络之品,并且联合养精胶囊口服.[结果]2例患者分别于用药后78d、10d成功射精,其中1例2月后配偶怀孕.[结论]中药加味红白皂龙汤联合养精胶囊治疗功能性不射精有较好的临床疗效,其可能机制为其独特的一"通"一"冲"之功.
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养精胶囊对环磷酰胺模型小鼠免疫功能的影响
目的 观察养精胶囊对于KM小鼠非特异性与特异性免疫功能的影响.方法 将青年KM小鼠随机分为空白对照组、模型组、左旋咪唑对照组、养精胶囊高、中、低剂量组共6组.灌胃7d,给药第3日开始,空白对照组每日皮下注射灭菌生理盐水0.1ml/10g,其余各组皮下注射环磷酰胺40 mg/kg,连续5d,5日后每组分别进行碳粒廓清实验、迟发型超敏反应实验(DTH)、鸡红细胞溶血素实验.结果 养精胶囊能明显对抗环磷酰胺对小鼠吞噬功能的抑制作用,使低下的DTH升高,同时可以回升环磷酰胺所致的免疫低下小鼠的溶血素水平.结论 养精胶囊可以从特异性和非特异性两方面增强小鼠的免疫功能.
