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  • STAT-3基因腺病毒介导感染ARIP、AR42J细胞的表达

    作者:王雪岷;Kim YJ;Sherwin RS

    目的:探测4种腺病毒液在胰腺源ARIP、AR42J细胞中的表达,为基因改造干预干细胞分化治疗糖尿病的进一步研究提供基础.方法:①扩增、纯化STAT-3 WT、STAT-3 DN、STAT-3 CA、STAT-3 GF4种质粒;脂质体转染法转染质粒进入人胚肾293腺病毒包装细胞系,Hela细胞作为包装细胞的对照细胞.②生产含4种基因组合的腺病毒,腺病毒检测、鉴定.③常规与盖玻片法ARIP、AR42J等细胞培养;含目的基因的腺病毒液感染目标细胞.④荧光显微镜观察感染后细胞的基因表达.结果:STAT-3腺病毒基因载体生产了较高滴度(病毒滴度为6 X 106pfu/ml)的腺病毒,用含目的基因的腺病毒对靶细胞感染3 d后,荧光显微镜观察到ARIP等细胞中绿色荧光蛋白成功、高效的阳性表达报告.结论:腺病毒介导STAT-3 WT、STAT-3 DN、STAT-3 CA、STAT-3 GF进入ARIP细胞的良好表达为STAT-3基因改造病毒感染干预干细胞分化的进一步相关研究提供了重要依据.

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