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胶内酶解文献资料
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微波辅助的蛋白质酶解方法
近些年,蛋白质组学研究技术手段不断进步,研究策略不断更新,归纳起来主要分为2种策略:"top-down"策略和"bottom-up"策略."top-down"策略是先对蛋白质混合物进行分离,然后进行蛋白质酶解和质谱鉴定[1-2].将蛋白质混合物通过凝胶电泳分离,从凝胶上切点进行胶内酶解,再通过质谱鉴定蛋白质,这就是常见的 "top-down"策略[3]."bottom-up"策略是指将蛋白质混合物酶解后得到更为复杂的多肽混合物,经多维高效液相色谱分离后进行串联质谱鉴定获得肽段序列信息,再搜索蛋白质数据库确定后的鉴定结果[4].这2种蛋白质组学研究策略都包含了蛋白质酶解这个步骤,虽然目前针对蛋白质分离和鉴定都有一些快速自动化的方法,但是对于蛋白质酶解及质谱上样之前的准备工作仍然步骤繁杂,耗时费力,严重影响了蛋白质大规模鉴定的速度.本文介绍一种快速酶解的方法,通过微波的辅助大大简化了蛋白质酶解步骤,并缩短了酶解所需时间[5-8].
