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宁波地区腹泻病人中食源性致病菌检测与分析
目的:了解宁波地区感染性腹泻病人中致病菌构成和耐药性,为防控腹泻病提供依据.方法:致病菌检测采用直接分离与增菌分离相结合的方法;细菌鉴定采用生化筛检和API等,鉴定到种、群;致病菌血清分型采用血清凝集法;药敏试验采用K-B法,耐药基因检测采用PCR法.结果:9 256份标本检出8类16种3 473株病原菌,检出率为37.52%,以副溶血性弧菌多,沙门菌次之,气单胞菌第三,且副溶血性弧菌的检出率明显高于其它病原菌,差异有统计学意义(P<0.01);血清分型发现副溶血性弧菌的O∶3群、沙门菌的甲型副伤寒、志贺菌的福氏志贺菌、致病性大肠杆菌O:119为各病原菌的优势菌,检出了福氏1C等志贺菌新亚型;药敏试验显示致病菌对大多数抗生素敏感,但有45株为多重耐药菌,其中气单胞菌23株、志贺菌8株、致泻性大肠杆菌8株、金黄色葡萄球菌3株、变形杆菌2株、沙门菌1株,占总菌数的2.45%,检出了bla-TEM、sull和aacc等3种耐药基因.结论:宁波地区腹泻食源性致病菌构成复杂,副溶血性弧菌是主要的流行病原菌;检出福氏C型志贺菌提示其血清型可能或正在转换,需加强对志贺菌变迁的监测,以预防疾病的暴发;致病性不强的气单胞菌和类志贺邻单胞菌检出率较高,应引起关注;病原菌对多种抗生素敏感,可用于预防和治疗.有2.45%的病原菌为ESBL,涉及多个菌属,说明耐药菌产生的复杂性,采取合理用药是关键,以减少耐药菌的传播和扩散.
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哈尔滨市社会福利院一起痢疾暴发的调查
2005年3月8日,哈尔滨市太平区卫生防疫站在网上接到哈尔滨市社会福利院暴发痢疾的报告,经现场调查核实A栋楼无腹泻病例,B栋楼110人中共39例在3月2-11日出现腹痛、腹泻等相似症状,年龄20~72岁,其中男性36例,女性3例,罹患率35.5%,3月9日采集腹泻患者39份肛拭标本进行细菌学检验.志贺菌属诊断血清为卫生部生物制品研究所产品;生化系列和试纸由法国生物梅里埃中国有限公司提供;药物敏感试验采用WHO(1979)推荐的Kirby-Baller法,药敏纸片购于北京天坛药物技术开发公司,批号200409.细菌的分离和鉴定按照"中华人民共和国卫生部传染病诊断标准及处理原则"进行检验[1],并参考"卫生防疫细菌检验"方法.将39份标本接种于沙门志贺菌属琼脂(SS)、麦康凯琼脂(Mac)培养基,于37℃培养24 h;将39份棉拭直接放GN增菌液中,于37℃18-24 h培养后分离于SS、Mac上.
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福建沿海致病性弧菌调查及抗菌药物敏感性分析
2001年4 ~10月间,我们对福建沿海码头、港口和海边15个点及近海36个点的海水采样进行致病性弧菌的分离和鉴定,并对157株弧菌做了体外抗菌药物敏感性试验,现将结果报告如下.
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安徽(木匆心)木中的芳香类化学成分研究
(木匆心)木Aralia subcapitata Hoo为五加科Araliaceae(木匆心)木属Aralia植物,主产于安徽[1].民间常用于壮肾,散瘀,主治肾病[2].现代药理学研究表明其具有"适应原"样作用,镇痛和抗惊厥作用,加强心肌收缩力和抗局部缺血的作用,降血脂,降血糖和降血压作用,保肝作用,抗酒精中毒和抗癌作用[3].前文报道了从安徽(木匆心)木的根皮中分离得到的3个三萜成分[4] .本研究报道进一步研究得到的4个芳香类化学成分6,7-二甲氧基香豆精(Ⅰ),咖啡酸(Ⅱ),4′-羟基双氢黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)和异甘草苷(Ⅳ)的分离和鉴定.以上化合物均为首次从该种植物中分离得到.
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GC-MS测定超临界流体CO2萃取竹节草挥发油的化学成分
竹节草Polygomun aviculane L.为蓼科植物,主要分布在我国的西北和西南地区.主要用来治疗细菌性痢疾,腮腺炎等症,也可用作妇科止血剂[1].作者在应用水蒸气蒸馏法(SD)提取竹节草挥发油的基础上[2],又用超临界流体CO2萃取法(SFE-CO2),通过加入改性剂来萃取竹节草中的挥发油,并通过GC-MS联用技术和计算机信息检索法,对挥发油的化学成分进行了分离和鉴定,并与水蒸气蒸馏法作了比较.
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马尾松针叶中挥发油化学成分分析
松针Pine needles又名松叶,为松科松属Pinus植物马尾松、马尾松、黄山松、黑松、油松、云南松、红松等的针叶,俗称松毛、山松须、猪鬃松叶等.<本草纲目>曰:"久服令人不老,轻身益气,主治风湿疮,生毛发,安五脏,守中,不饥延年."[1]研究表明:针叶具有活血、祛风,燥湿止痒之功,可用于治疗风湿疥癣等疾病[2].松针叶经分析含多种成分.本文采用超临界CO2提取技术对马尾松针叶中化学成分进行了提取,并应用GC-MS联用技术和计算机信息检索法,对萃取物化学组成进行了分离和鉴定,并确定了相对含量,为开发松针药用资源提供了依据.
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外周血中一种分泌胶原的新型细胞--循环成纤维细胞
由于"循环成纤维细胞"(circulating fibrocytes)在组织损伤、修复重建和基因治疗中的重要功能,自2004年首次命名以来深受人们的关注[1].其实这种细胞早在1994年就被人们发现、分离和鉴定[2].在研究组织创伤修复过程中发现和确认了一种纤维细胞(fibrocytes),并且基于它们的生长特点和独特的细胞膜表型给它们定义为循环成纤维细胞(circulatlng fibrocytes)或游走成纤维细胞(alitofibrocytes).循环成纤维细胞能生成和分泌胶原蛋白和其他基质蛋白,存在于外周血中,具有显示它们造血来源(hematopoetic orgin)的细胞表面标记.这种新的白细胞亚群开始曾被叫作"纤维细胞"(fibrocytes),这个术语是由希腊语"kytos"(细胞)和拉丁语"fiber"(纤维)共同组成.然而,这个定义在解剖学术语中可能导致混淆,如在组织学、病理学中的名词"纤维细胞"(fibrocytes)指的是"成熟"的成纤维细胞(mature fibroblasts).在内耳的解剖组织名词中也有叫作"fibrocytes"的细胞是指毛细胞.所以学者们需要考虑给循环成纤维细胞一个更具特色的名称即循环成纤维细胞(circulating fibrocytes)或游走成纤维细胞(alitofibrocytes),后者词汇中"alitis"在希腊语中表示"流浪者",以强调这些细胞的血源游走性.而循环成纤维细胞则强调它们存在于血循环之中.
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南昌地区流行性感冒的监测
为了掌握流行性感冒(流感)的流行情况,于1999、2000年1~5月收集了急性上呼吸道感染患儿的鼻咽拭子,分离和鉴定流感病毒,现简报如下.
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干细胞分化抗原和细胞增殖抗原在人胶质瘤细胞株中的表达
研究表明肿瘤组织中存在肿瘤干细胞(tumor stem cells,TSC).TSC具有自我更新、无限增殖和多向分化等干细胞的生物学特性,并且表达多种干细胞分化抗原[1].这些干细胞抗原在胶质瘤组织中也大量表达[2].通过建立在干细胞分化抗原基础上的肿瘤细胞亚群分离技术,已经在胶质瘤组织和胶质瘤细胞株中分离和鉴定出TSC[3-4],但各种干细胞分化抗原在胶质瘤细胞株中的表达状况尚不清楚.我们在本研究中检测人胶质母细胞瘤细胞株中干细胞分化抗原和细胞增殖抗原的表达,为进一步研究TSC打下基础.
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外周血中血管内皮前体细胞的分离和鉴定
新血管的形成主要有两种方式,一是血管形成(vasculogenesis),即造血血管母细胞(hemangioblast)原位分化成内皮细胞并形成原始毛细血管丛的过程[1,2];二是血管新生(angiogenesis),指由已存在的血管以出芽的方式形成新血管的过程[3,4].一直以来,人们认为血管形成只发生于胚胎发育时期,在出生后并不存在.1997年,Asahara等[5]发现在人的外周血中存在血管内皮前体细胞(endothelial progenitor cells, EPC),该种细胞可参与出生后的多种病理和生理过程中的新血管形成[6],此现象同胚胎时期的血管形成相类似,故称作出生后血管形成(postnatal vasculogenesis).我们采用外周血作为材料来源,建立了一种稳定可重复的分离、鉴定末梢血液EPC的方法,为进一步研究EPC在生理和病理过程中的作用提供重要的实验基础.
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沈阳地区肺炎支原体分离株P1蛋白基因限制性酶切图谱分型研究
采用P1基因PCR扩增产物酶切图谱分析方法对沈阳地区分离的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)菌株进行分型,以便了解本地区MP的流行情况,为临床诊断提供依据。 MP临床分离株的分离和鉴定:取临床诊断为肺炎支原体肺炎患儿的咽拭子标本放3ml支原体肉汤培养基置37℃培养7~10?d,分别转种于支原体肉汤培养基和支原体固体培养基,用血球吸附实验和MP生长抑制试验鉴定分离株。结果:6株临床分离株血吸附实验结果阳性。用MP感染阳性患者的血清做MP生长抑制实验,6株分离株亦均呈现阳性结果。
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液相色谱-质谱联用技术及其在医院药学中的应用
液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术是当代强有力的分离和鉴定分析系统之一.近年来,LC-MS技术在医院药学领域得到了广泛应用,本文就LC-MS技术的特点及其在医院药学工作中的应用作一简要综述.
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CRP和WBC联合检测在儿童急性感染性疾病中的应用
急性感染性疾病是小儿常见的疾病,细菌和病毒是造成儿童急性感染的主要病原体,正确鉴别细菌和病毒感染对临床意义重大[1].目前,在大多数情况下,尚无完善、实用、快速的病原学诊断技术以实现对细菌和病毒的快速分离和鉴定,临床多用WBC计数及分类作为诊断和鉴别感染类型的常规指标.
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黏液罗氏菌的分离和鉴定方法及临床意义分析
黏液罗氏菌(rothia mucilaginosa)是存在于人类鼻咽、口咽和上呼吸道的正常菌群,从鼻咽腔和支气管分泌物中均可分离到,人们对本菌了解不多,国外的Vitek、Vitek 2、APIStaph 32 version 2.0鉴定系统均未包括该菌的鉴定,只有ATB ID 32 Staph、BBL Crystal(Becton Dickinson)可以鉴定此菌,所以临床送检标本中不易鉴定出此菌.
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抑制性消减杂交技术与基因克隆化
近年来,随着分子生物学技术的迅猛发展及人类基因组计划的实施,当今分子生物学的研究热点已转向利用新技术研究生物学、医学乃至动植物领域中基因的功能及调控作用,如个体的生长、发育和死亡等许多问题的产生与细胞间基因表达的关系研究,尤其是分离和鉴定与危害人类健康疾病(如恶性肿瘤、心脑血管疾病及一些原因不明的慢性疾病等)的发生、发展密切相关的基因,分离、鉴定这些差异表达的基因,可为揭示生命活动的规律、探索疾病发生机制及寻找诊断及治疗的靶基因提供强有力的依据.
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肿瘤基因识别与肿瘤蛋白标志物的统一
1990年,随着大规模人类基因组计划(the human genome project)的实施,生命科学研究在21世纪初进入了全新的功能基因组学研究时代,即分离和鉴定在细胞中所有表达的蛋白质,并对其功能进行深入的研究,以回答临床和基础医学研究中众多的生物学问题.于是,以蛋白质组学(proteomics)、转录本组学(transcriptomics)和生物信息学(bioinformatics)相结合的研究便成为当前生命科学研究前沿的热点.
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肾上腺髓质原前体肽段(22-41)(PAMP)的研究进展
1993年日本学者Kitamura等人在人的嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma,PC)中发现并分离和鉴定了一种新的生物活性肽,因其首先从肾上腺髓质的PC组织中被分离出来,并且大量存在于正常肾上腺髓质和PC组织中,故命名为肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM).
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高迁移率族蛋白B-1的肿瘤生物学效应研究进展
高迁移率族蛋白B-1(high-mobility group box-1,HMGBl)是一种几乎存在于所有真核细胞内的染色质非组蛋白核蛋白,富含酸性和碱性氨基酸,早由Ellerman等[1]在小牛胸腺中分离和鉴定.1999年,学者们发现HMGB1可以作为一种炎性介质被分泌到细胞外[2].此后,HMGB1的功能多样性逐渐被人们熟知.在细胞核内,HMGB1可以调节基因转录;在细胞外,HMGB1参与炎症反应、细胞分化、增殖、迁移以及肿瘤免疫反应[3-4].近年来,HMGB1在肿瘤中的作用日渐受到关注,本文就HMGB1在肿瘤发生、发展、免疫及治疗中的研究作一综述.
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神经干细胞特性及其在神经疾病治疗中的应用
神经干细胞是具有增殖、分化潜能且能增殖自身的细胞.神经干细胞分离、培养、鉴定及应用是神经科学研究的前沿领域,为探讨神经细胞发生、迁移、分化和治疗多种神经系统疾病提供了全新的思路.长期以来,人们一直认为,成年哺乳动物脑内不存在神经干细胞,神经细胞不具备更新能力,一旦受损乃至死亡,再生是不可能的,因为成熟神经细胞是不能分裂的,这种观念使人们对神经系统发生和神经疾病治疗的认识受到了很大局限.近10年来,神经生物学的重要进展之一是发现神经干细胞的存在及特征,特别是成体脑内神经干细胞的分离和鉴定具有划时代意义.
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微波辅助的蛋白质酶解方法
近些年,蛋白质组学研究技术手段不断进步,研究策略不断更新,归纳起来主要分为2种策略:"top-down"策略和"bottom-up"策略."top-down"策略是先对蛋白质混合物进行分离,然后进行蛋白质酶解和质谱鉴定[1-2].将蛋白质混合物通过凝胶电泳分离,从凝胶上切点进行胶内酶解,再通过质谱鉴定蛋白质,这就是常见的 "top-down"策略[3]."bottom-up"策略是指将蛋白质混合物酶解后得到更为复杂的多肽混合物,经多维高效液相色谱分离后进行串联质谱鉴定获得肽段序列信息,再搜索蛋白质数据库确定后的鉴定结果[4].这2种蛋白质组学研究策略都包含了蛋白质酶解这个步骤,虽然目前针对蛋白质分离和鉴定都有一些快速自动化的方法,但是对于蛋白质酶解及质谱上样之前的准备工作仍然步骤繁杂,耗时费力,严重影响了蛋白质大规模鉴定的速度.本文介绍一种快速酶解的方法,通过微波的辅助大大简化了蛋白质酶解步骤,并缩短了酶解所需时间[5-8].