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S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉安对巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶的影响
目的 观察S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉胺(SNAP)对RAW 264.7诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨NO在动脉粥样硬化(炎症)过程中的作用.方法 以RAW 264.7巨噬细胞为研究对象,分为空白对照组、SNAP组,采用不同浓度(30、100、300、400、500μmol/L)的SNAP对巨噬细胞进行干预24 h,应用RT-PCR法检测RAW 264.7巨噬细胞iNOS mRNA的表达,采用Western blotting技术检测iNOS蛋白的表达.结果 与空白对照组比较,不同浓度SNAP(30、100、300、400、500 μmol/L)组iNOS mRNA的表达比空白对照组均明显降低(P＜0.05),不同浓度SNAP(30、100、300 μmol/L)组iNOS蛋白表达明显低于空白对照组(P＜0.05).结论 NO可以抑制巨噬细胞自身iNOS mRNA基因转录,降低iNOS的合成而发挥负反馈作用.
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S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉胺对RAW264.7巨噬细胞亚型分化的影响
目的:探讨S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉胺(SNAP)对巨噬细胞亚型分化的影响及其机制.方法:以RAW264.7巨噬细胞为研究对象,分为空白对照组、SNAP组、SNAP+PBA(4-苯基丁酸)组,采用不同浓度(30、100、300、400、500 μmol/L)的SNAP或300μmol/L SNAP+20 mmol/L PBA对巨噬细胞进行干预24h,应用RT-PCR法检测RAW264.7巨噬细胞亚型分化标志物M1(iNOS,CD86)、M2(Arg-Ⅰ,MR)及CHOP mRNA的表达,应用Western blot技术检测iNOS及ERS通路中相关蛋白CHOP、P-PERK的表达.结果:与空白对照组比较,SNAP组iNOS、CD86、CHOP mRNA的表达均明显降低(P＜0.05),Arg-Ⅰ mRNA表达明显升高(P＜0.05),而MR mRNA表达升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);与300 μmol/L SNAP组比较,300 μmol/L+PBA组iNOS、CHOP mRNA均无明显变化(P＞0.05),CD86 mRNA升高,Arg-Ⅰ、MR mRNA均明显降低(P＜0.05).SNAP组CHOP、iNOS、p-PERK蛋白表达均明显低于对照组(P＜0.05),300 μmol/L SNAP+20 mmol/L PBA组与300 μmol/L SNAP组比较iNOS蛋白、p-PERK、CHOP蛋白表达升高(P＜0.05).结论:NO可能通过内质网应激机制抑制巨噬细胞向M1亚型分化.
