首页 > 文献资料
-
全长型脾酪氨酸激酶基因转染对人喉鳞癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用
目的 探讨全长型脾酪氨酸激酶[full-length spleen tylosine kinase,SYK(L)]基因转染对人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 建立人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,分为SYK(L)重组质粒转染组、阴性对照质粒转染组和生理盐水组,分别向瘤体内注射SYK(L)重组质粒pIRES2-EGFP-SYK (L)及脂质体混合物、阴性对照质粒plRES2-EGFP及脂质体混合物和生理盐水,观察肿瘤生长情况.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time fluorescence polymerase chain reaction,Q-RT-PCR)、Western blot法检测各组瘤体内的SYK (L) mRNA及蛋白表达水平.结果 SYK(L)重组质粒转染组的肿瘤平均体积为367.61±81.23mm3,明显小于阴性对照质粒转染组900.20±131.41mm3及生理盐水组930.71±143.73mm3,差异有统计学意义(F=99.91,P＜0.01);Q-RT-PCR结果显示SYK(L)重组质粒转染组瘤体内mRNA相对表达量为2.268±0.075,明显高于阴性对照质粒转染组(1.212±0.025)及生理盐水组(1.175±0.031) (F=102.01,P＜0.01);Western blot法检测结果显示SYK(L)重组质粒转染组瘤体内相对蛋白含量(0.834±0.021)明显高于阴性对照质粒转染组(0.243±0.041)和生理盐水组(0.301±0.039),差异有统计学意义(F=104.13,P＜0.01).结论 全长型脾酪氨酸激酶基因转染对人喉鳞癌裸鼠移植瘤有明显的生长抑制作用,有望成为基因治疗喉癌的新靶点及途径.
-
MS-HRM技术定量检测喉鳞癌Syk(L)基因启动子甲基化的方法及意义
目的 利用MS-HRM技术建立Syk(L)基因启动子甲基化定量检测的方法,并探讨其甲基化程度与喉鳞癌临床病理参数的相关性.方法 提取48份喉鳞癌组织及20份癌旁正常喉黏膜组织DNA并进行甲基化修饰.用MS-HRM技术定量检测Syk(L)基因启动子甲基化水平,并分析评价其与喉鳞癌临床病理参数的相关性.结果 MS-HRM检测Syk(L)基因启动子甲基化结果为20份癌旁正常喉黏膜组织均位于0％区域;喉鳞癌组织中6份位于0％区域,8份位于0％ ～ 30％区域,20份位于30％～70％区域,14份位于70％～100％区域.Syk(L)基因启动子甲基化水平与喉鳞癌临床分型差异无统计学意义(P＞0.05),但与临床T分期、病理组织学分级、颈淋巴结转移差异有统计学意义(P＜0.05),且Syk(L)甲基化水平随临床T分期及病理组织学分级增高而增高.结论 MS-HRM定量检测Syk(L)基因启动子甲基化有望成为喉鳞癌进展评估分子指标检测的有效手段.
-
全长型脾酪氨酸激酶在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系
目的 通过检测口腔鳞状细胞癌(Oscc)组织中全长型脾酪氨酸激酶[SYK(L)]的表达、与淋巴结转移的相关性分析,探讨SYK (L)对OSCC发生发展和转移的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫印迹(Western blot)、免疫组织化学法检测SYK(L)在27例OSCC及其癌旁组织中表达的差异,并采用14例正常口腔黏膜作为对照,探讨其与OSCC发生及转移的关系.结果 OSCC组织中SYK (L)表达量明显低于正常牙龈组织(P＜0.0l),同一患者癌组织中SYK (L)表达量比癌旁组织低(P＜0.05);淋巴结转移组患者的SYK (L)表达量普遍低于未转移组患者(P＜0.05).结论 SYK (L)可能与OSCC的发生和发展有关,作为抑癌基因在肿瘤的淋巴结转移过程中起至关重要的作用.
