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抗半乳糖抗体相关疾病及其临床应用进展
抗半乳糖( Gal)抗体是人体丰富的天然抗体,与多种免疫疾病密切相关。 Gal抗原在甲状腺细胞表面的异常表达导致了Graves病;病原体携带或分泌的Gal抗原,可引发机体出现“类自身免疫性疾病”的炎症反应;抗Gal抗体也是异种器官移植的免疫屏障。在抗病毒、细菌和肿瘤疫苗中表达Gal表位,可提高疫苗的免疫原性;注射Gal脂多糖还可将肿瘤细胞转变为自体抗肿瘤疫苗,而Gal纳米颗粒可加速切口愈合和组织修复。
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人α-半乳糖苷酶的表达抑制NIH 3T3细胞主要异种抗原表位Galα(1,3)Gal的生成
目的:检测人α半乳糖苷酶在NIH3T3细胞系中对Gal抗原表位生成的抑制作用.方法:流式细胞术比较G抗原、H抗原和人天然抗体(IgG和IgM)的表达水平.Western blot检测G抗原糖蛋白的表达.四唑盐(M T T)比色试验检测NIH3T3细胞在人血清介导的裂解作用下的活力.结果:克隆了人α-半乳糖苷酶并在NIH3T3细胞上建立了永久细胞系.Western blot结果表明,在表达人α-半乳糖苷酶的NIH3T3细胞中,人的天然抗体与细胞表面糖蛋白的结合能力显著降低,甚至完全消失.同时凝集素Gs-IB4结合分析也进一步证明人α半乳糖苷酶的稳定表达能有效地抑制NIH3T3细胞上Gal抗原表位的生成.流式细胞检测结果则表明,由Gal抗原表位与人IgG,IgM和3C3c介导的异种反应性分别降低了73.4%,22.3%和47.9%,随后发生的细胞裂解反应也被显著抑制.结论:人α-半乳糖苷酶能够有效抑制鼠成纤维细胞NIH 3T3细胞表面Gal抗原表位的生成以及Gal抗原表位与人天然抗体共同介导的免疫排斥.