首页 > 文献资料
-
miR-15a下调BCL-2和BCL2L2对下咽鳞癌FaDu细胞凋亡影响
目的： miR-15a在许多癌症中均发现有表达异常，但其在下咽鳞状细胞癌的作用不清。本研究通过miR-15a抑制BCL-2和BCL2L2表达，探讨在将miR-15a对下咽鳞癌细胞凋亡的影响。方法通过Lipofectamine2000将miR-15a mimics转染入下咽鳞癌FaDu细胞中。RT-PCR检测BCL-2和BCL2L2 mRNA的表达；Western Blotting检测BCL-2和BCL2L2蛋白的表达；流式细胞术检测检测miR-15a的对细胞凋亡的影响。结果 BCL-2和BCL2L2在FaDu细胞中表达较强；转染miR-15a mimics后的FaDu细胞中，BCL-2和BCL2L2蛋白和mRNA 的表达水平逐渐下调；同时转染miR-15a mimics后，FaDu细胞凋亡明显增加。结论 miR-15a可以下调BCL-2和BCL2L2的表达，促进下咽鳞癌细胞凋亡。
-
miR-378对骨髓增生异常综合征细胞凋亡及增殖的影响
目的 研究miR-378对骨髓增生异常综合征SKM-1细胞凋亡和增殖的影响.方法 我们分别用miR-378重组慢病毒和阴性对照病毒感染SKM-1细胞.然后采用CCK-8检测miR-378对SKM-1细胞生长的影响,流式细胞仪检测各实验组细胞凋亡和周期情况,并用Western blot检测凋亡过程中的关键因子cleaved-caspase-3蛋白的表达.用生物信息学方法预测miR-378可能的靶基因,用PCR和Western blot进行初步验证.结果 miR-378慢病毒转染组的细胞增殖活性明显降低,流式细胞术检测miR-378组的细胞凋亡率为(12.90±3.72)％,明显高于阴性对照病毒转染组和空白对照组[(3.21±1.91)％、(2.78±1.04)％,P＜0.01];miR-378组的G0/G1期细胞增多,S期细胞减少.同时,Western blot结果显示miR-378过表达引起了cleaved-caspase-3的表达升高.用生物信息学方法预测抗凋亡蛋白基因BCL2L2为miR-378潜在的靶基因,并发现miR-378可以抑制BCL2L2蛋白的表达.结论 miR-378可以通过引起细胞凋亡和细胞周期阻滞来抑制SKM-1细胞的增殖,并降低BCL2L2蛋白的表达.
-
胃癌组织中miR-497表达及其生物学意义
目的 检测胃癌组织和癌旁组织中miR-497的表达差异,寻找其下游作用靶点.方法 选取2010～2013年期间在中国医科大学附属第一医院胃肠外科手术切除的94例胃癌及其癌旁组织.用RT-PCR法定量检测miR-497在其中的表达;在线软件预测miR-497靶基因,用阴性对照及miR-497-mimics转染SGC-7901细胞系,RT-PCR及Western检测胃癌细胞miR-497过表达后靶点基因mRNA及蛋白水平的改变;MTT法检测miR-497-mimics组(miR-497过表达)细胞株与阴性对照组间对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗的敏感性.结果 ①miR-497表达量在胃癌组织中明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.01).②BCL2L2被预测为miR-497的靶基因,miR-497在胃癌SGC-7901细胞中过表达后BCL2L2蛋白表达在miR-497-mimics组细胞中明显弱于阴性对照组细胞,BCL2L2 mRNA在2组细胞中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).miR-497-mimics组细胞对5-FU的IC50值明显低于阴性对照组细胞(P=0.004 6).结论 miR-497在胃癌组织中低表达,BCL2L2为miR-497的靶基因,miR-497过表达可提高胃癌细胞对5-FU的敏感性,这为进一步研究miR-497与BCL2L2在胃癌中的作用及治疗提供了新的方向.
