首页 > 文献资料
-
幼羊颅骨缺损模型中颅骨组织Dlx2基因的表达及意义分析
目的 检测Dlx2基因在小尾寒羊颅骨缺损模型颅骨组织中的表达,探讨其对颅骨缺损的意义.方法 选取10只1月龄小尾寒羊,建立颅骨缺损模型,对缺损部位的新生颅骨组织及邻近缺损部位的原生颅骨组织进行取材,应用Real?time PCR和Western blot技术检测Dlx2的mRNA和蛋白表达水平.结果 与邻近缺损部位的原生颅骨组织比较,缺损部位的新生颅骨组织Dlx2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05).结论 Dlx2基因表达增加可能对颅骨缺损修复有重要意义.
-
Dlx2在MC3T3-E1细胞成骨分化过程中的作用
目的:探讨Dlx2(distal-less homeobox 2)基因过表达对体外培养的小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1 向成骨方向分化的影响.方法:构建Dlx2过表达的反转录病毒载体,测序验证.体外病毒转染MC3T3-E1后,以嘌呤霉素行抗性筛选稳定细胞株,以RT-PCR和Western印迹检测转染后细胞中Dlx2的表达.应用实时定量PCR(RT-PCR)检测Dlx2过表达对部分成骨相关基因(ALP、OCN、Runx2、Msx2)表达的影响.以碱性磷酸酶(ALP)活性测定和茜素红染色法检测Dlx2过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响.采用SAS 6.04软件包对数据进行随机设计的方差分析.结果:本实验成功构建Dlx2过表达的反转录病毒载体,测序正确.体外转染后筛选出Dlx2稳定高表达细胞株MC3T3-E1-Dlx2,其mRNA和蛋白表达量显著高于对照组.在成骨诱导过程中,MC3T3-E1-Dlx2细胞ALP值在第4、7、14d均高于对照组细胞,茜素红染色显示实验组较对照组和空白组染色深.Dlx2过表达在成骨诱导早期能显著促进ALP和Msx2的表达(P<0.05),晚期则上调OCN表达(P<0.05),而Runx2表达无明显变化(P>0.05).结论:Dlx2过表达上调AIP、OCN等成骨相关基因的表达.促进MC3T3-E1细胞的成骨分化.
关键词： Dlx2基因 成骨分化 MC3T3-E1细胞系 同源盒基因 -
实时荧光RT-PCR检测DLX2基因在小鼠前脑中的表达
目的探讨DLX2基因在小鼠前脑神经干细胞的增殖、迁移及向多巴胺能神经元分化过程中的作用及意义.方法在小鼠胚胎16 d(E16)、生后1 d(P1),7 d(P7)、21 d(P21)4个时间点,分别取室管膜前下区(SVZa)、嘴侧迁移流(RMS)及嗅脑(OB)3个部位,应用SYBRGreenI实时相对定量荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测DLX2基因在小鼠前脑中的表达情况,以DLX2基因相对表达值(Ratio)值大于1.4为差异表达.结果从部位看,OB区E16的表达较其他3个时间点低,RMS区P21的表达较其他3个时间点低,SVZa区E16及P1的表达较P7及P21高.从时间点看,在E16时间点3个部位的表达无差异,另3个时间点中OB较RMS及SVZa高表达.结论DLX2参与了小鼠前脑中神经干细胞的增殖、迁移及分化过程,其关系具有时间及部位特异性.
