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Bio-Plex悬浮芯片系统检测两种实验兔白介素基因的差异表达
目的 采用液相悬浮芯片系统同时测定实验兔圆小囊中IL-1β、IL-1R1、IL-8、IL-8RA和IL-15各基因的表达情况,并对该方法进行评价.方法 利用Affymetrix的Panomics QuantiGene Plex 2.0 Assay中bDNA信号放大和多磁珠分析技术,来同时检测两种实验兔圆小囊中多重mRNA并定量.建立实验兔免疫相关白介素基因的液相悬浮芯片检测方法.结果 可同时检测IL-1β、IL-1R1、IL-8、IL-8RA和IL-15各基因的含量,并发现WHBE兔IL-15基因的相对表达量显著高于JW兔(P<0.05),IL-1R1基因的相对表达量显著高于JW兔(P<0.01),IL-8RA基因在WHBE兔中的相对表达量也高于JW兔(P<0.05).结论 建立了实验兔白介素基因的液相悬浮芯片检测方法,WHBE兔的IL-15、IL-1R1和IL-8RA基因表达量较高,可能与WHBE兔独特的免疫学特性有关.
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HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈疾病中的临床应用探讨
目的：探讨人乳头瘤病毒(HPV)癌基因E6/E7 mRNA检测在宫颈病变中的临床应用。方法：收集210例宫颈疾病疑似患者的宫颈分泌物标本行液基细胞学(TCT)检测，同时分别进行实时荧光定量PCR HPV DNA检测及支链DNA(bDNA)HPV E6/E7 mRNA检测，对两组检测结果进行对比。结果：HPV E6/E7 mRNA特异性高于HPV DNA。细胞学病变组的HPV E6/E7 mRNA阳性率和拷贝数均比细胞学正常组增高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：HPV E6/E7 mRNA检测与HPV DNA检测相比具有较高的特异性，HPV E6/E7 mRNA检测对宫颈癌的筛查具有较好的临床应用前景。
关键词： 宫颈病变 HPV E6/E7 mRNA bDNA -
慢性乙肝患者血清HBVDNA检测的临床意义探索
目的寻求HBVDNA和HBeAg、ALT的相关性及其临床意义.方法采用branchDNA法动态检测59例慢性乙肝患者HBVDNA158例次(下称bDNA),同时检测HBeAg、ALT.结果 (1)bDNA＞2000MEq/ml仅8例次,占5.1%,而bDNA＜2000MEq/ml150例次,占94.9%.(2)HBeAg阳性时,bDNA＞10MEq/ml,肝功能多数异常(85.5%);反之,肝功能多数正常(62.3%).(3)HBeAg阴性时,bDNA＞10MEq/ml,肝功能全部异常(100%);反之,肝功能多数正常(82.8%).结论 (1)不同bDNA值反映患者不同感染程度和自身清除能力的代数和.(2)HBeAg阳性,bDNA持续波动在10MEq/ml以上,患者处于隐性或显性活动状态,反之处于稳定期.(3)HBeAg阴性,bDNA＜10MEq/ml且ALT正常提示处于稳定期;反之可能是变异株感染或是抗HBeAg正在转换中.前者仍需抗病毒治疗,后者应动态观察.(4)动态观察HBeAg阳性、ALT升高未予特殊治疗13例患者,其bDNA波动亦十分明显.因此反复检测、动态观察bDNA的变化,方能正确评估其价值.
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NASBA法定量检测HIV病毒载量42例结果分析
定量检测HIV病毒载量,是观察和了解AIDS病情发展的常用的方法.目前国际上检测HIV病毒载量主要有三种方法,即逆转录核酸扩增法(RT-PCR法)、核酸序列扩增实验(NASBA法)及分支DNA杂交实验(bDNA法),采用多的是NASBA法和bDNA法,我院采用NASBA法对42例HIV确诊患者检测HIV病毒载量,现将结果报道如下.
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bDNA定量检测HIV-1RNA的质量控制应注意的问题
总结分析影响bNDA(核酸分支信号放大技术)检测质量的检测前、检测中及检测后的各种因素,提高检测质量.检测前要做好技术培训、仪器准备,要保持检测方法 、样本种类的一致性.检测中必须根据bNDA试验特点及试剂的特殊性规范操作.检测后要注意分析试验成立的各个条件,所有条件在控时方可发出检测报告.
