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不同激活方法对小鼠卵母细胞孤雌激活的实验观察
目的建立合适的小鼠卵母细胞孤雌激活方法.方法取不同卵龄小鼠卵母细胞,运用不同浓度的氯化锶和不同强度的电脉冲对其进行活化,观察小鼠卵母细胞激活率和体外发育状况.结果①14、16和18 h卵龄组卵母细胞经10 mmol/L SrCl2处理后,三组的激活率随卵龄的增长而提高,分别为21.1%、41.8%和73.7%,组间差异有统计学意义(P＜0.05);卵母细胞离体后在激活前体外培养3 h也能提高其激活率,但当卵龄达到一定时(18h),体外培养激活率不再提高.②5.0、10.0、15.0 mmol/L三种浓度的SrCl2均能有效地激活小鼠卵母细胞,激活率分别为58.5%、68.95和70.9%,与对照组和1.6 mmol/L组相比差异有统计学意义(P＜0.05).③卵母细胞的激活率随处理时间的延长而提高,30、60、120、240 min SrCl2处理时间的激活率分别为44.9%、56.1%、68.9%、77.0%,相隔两组之间差异有统计学意义(P＜0.05).④1.5 kV/cm,160μs和1.0 kV/cm,320μs脉冲刺激下的卵母细胞激活率显著高于1.8 kv/cm,90μs脉冲刺激组(58.5%vs27.1%、69.1%vs27.1%,P＜0.05),前两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论小鼠卵母细胞孤雌激活率与卵龄和激活方案有关;氯化锶浓度、作用时间和电脉冲强度对小鼠卵母细胞的活化有明显影响.
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不同卵龄对小鼠卵母细胞孤雌激活的影响
孤雌生殖一词早是由Oven于1849年提出,所谓孤雌生殖是通过人工刺激模拟受精过程,使卵母细胞在无精子条件下被激活,即无雄性配子的任何作用,由雌性配子产生胚胎,不论其是否发育成个体均称为孤雌生殖,又称为孤雌激活[1].
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电脉冲对不同卵龄的MⅡ期卵母细胞激活影响
目的 研究电脉冲对不同卵龄小鼠MⅡ期卵母细胞电激活影响,寻找小鼠体细胞克隆避免电激活的适宜卵龄的卵母细胞.方法 在180V/mm,9 s,1个电脉冲(1p) 下,比较了注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后13,16h卵母细胞经体外培养(IVC)4h的激活率、碎裂+死亡率.结果 hCG后13h和16h的MⅡ期卵母细胞相比,激活率分别是6.2%和29.5%,两者间差异有极显著性意义(P<0.01).碎裂+死亡率两组间没有显著性差异.结论 注射hCG后13h 的卵母细胞为适宜的小鼠核移植的受体细胞,在一定程度上可以有效的避免电激活重构胚.
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电脉冲对不同卵龄的MⅡ期卵母细胞激活影响
定程度上可以有效的避免电激活重构胚.
