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RNA干扰抑制大鼠肌腱细胞中V型胶原基因的表达*
目的：利用RNA干扰技术（RNAi）下调肌腱细胞中V型胶原蛋白的表达，拟为后续探讨V型胶原在损伤肌腱修复过程中的作用提供可行的试验方法。方法：分别设计干扰大鼠V型胶原[COL5（1）2（2）]两个亚基COL51和COL52表达的siRNA序列，转染大鼠肌腱细胞。通过实时荧光定量PCR和免疫荧光法检测V型胶原在基因和蛋白水平的表达。结果：转染特定的siRNA后，V型胶原两个亚基的基因表达被抑制约70%，蛋白表达也被明显抑制。结论：RNAi法可有效地抑制大鼠肌腱细胞中V型胶原的基因和蛋白水平表达。为进一步研究V型胶原在肌腱损伤修复过程中的作用提供了可行的试验方法。
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RNA干扰抑制肌腱细胞V型胶原表达对胶原纤维形成的影响
目的:利用RNA干扰技术(RNAi)下调肌腱细胞中V型胶原基因的表达,探讨V型胶原在损伤肌腱修复过程中的作用.方法:分别设计干扰大鼠V型胶原2个亚基COL5α1和COL5α2表达的siRNA序列,转染大鼠肌腱细胞.检测V型胶原在基因和蛋白水平的表达,检测组织工程肌腱的胶原含量和胶原原纤维直径.结果:转染特定的siRNA后,V型胶原2个亚基的基因和蛋白表达被明显抑制.抑制COL5α1和COL5α2亚基对胶原纤维形成的影响不同.结论:本实验探究了V型胶原对胶原纤维生长自聚的影响,为肌腱损伤修复提供有用的基础生物学信息.
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PDLLA / nano-HA复合板固定下颌骨骨折愈合过程中V型胶原的表达
目的观察采用混旋聚乳酸/纳米羟基磷灰石(PDLLA / nano-HA)复合板(以下简称复合板)固定对下颌骨骨折愈合的影响.方法对18只新西兰兔两侧下颌骨体部截骨,分别采用复合板和纯PDLLA板固定.术后2、3、4、6、12、24周采用免疫组织化学方法观察骨折愈合过程中V型胶原的表达.结果术后2～4周,复合板侧骨痂中成骨细胞、成纤维细胞及骨细胞周围基质中V型胶原高水平表达,呈强阳性着色,第4周时达到高峰.6周时阳性信号明显减弱,第12周、24周成骨细胞、破骨细胞减少,基质呈微弱阳性着色,V型胶原基本无表达.PDLLA板侧2～4周时与复合板侧相似,着色较浅,从第4～24周阳性信号逐渐减弱,第12周、24周仍可见骨痂改建征象,基质弱阳性着色.结论复合板侧骨痂中V型胶原的表达强弱变化与下颌骨骨折正常愈合过程基本相符,复合板对骨痂的形成和改建无不利影响.
关键词： PDLLA / nano-HA 下颌骨骨折 V型胶原 免疫组化
