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胃泌素及其受体拮抗剂作用下胃癌细胞DNMT-1与MMP-2\E-Cadherin甲基化相关性研究
目的:通过检测胃泌素及丙谷胺干预下胃癌MKN45细胞DNMT-1基因表达与E-Cadherin和MMP-2基因甲基化变化的相关性。方法:胃癌细胞株分别在胃泌素和丙谷胺干预下分为空白组、胃泌素组、丙谷胺组和混合组,应用SYBR Green I Q-PCR检测各组DNMT-1基因表达水平;运用RQ-MSP法检测用亚硫酸氢盐修饰后的基因组DNA为模板的各组基因甲基化状态。结果:胃泌素组与空白组相比, DNMT-1表达明显增高,而丙谷胺组则表达明显减低(P<0.05);DNMT-1表达量与E-Cadherin甲基化变化存在明显相关性,而与MMP-2甲基化并无明显相关性。结论:胃泌素可促进DNMT-1表达,DNMT-1可能直接影响E-Cadherin甲基化,而其可能间接影响MMP-2表达模式。
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TCDD暴露对子宫内膜异位症模型小鼠在位内膜组织PR亚型和DNMT-1表达的影响
目的:探讨TCDD暴露小鼠子宫内膜异位症模型在位内膜DNA甲基转移酶-1( DNMT-1)、PR-A、PR-B的表达,以及PR-A、PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度。方法60只C57BL/6雌性小鼠以2∶1与30只C3H雄性小鼠随机合笼交配,根据母鼠妊娠第8天和雌性子鼠出生后21 d所暴露TCDD的剂量(μg/kg )分为5组,0/0组、0/3组、3/0组、3/3组及3/10组。每组均为12只雌性子鼠。以上组别除0/0组外,均于出生后49 d再次暴露TCDD (3μg/kg),出生后第70天给予TCDD(3μg/kg)并实施自体子宫内膜移植术构建小鼠子宫内膜异位症模型,并且于术后3、6、9周各暴露1次TCDD(3μg/kg),术后12周取阴道脱落细胞将处于动情前期雌性子鼠脱臼处死。取其在位内膜制成蜡块,免疫组化SP法检测在位内膜DNMT-1、PR-A、PR-B的表达,以及甲基化特异PCR ( MSP )检测PR-A、PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度。结果(1)DNMT-1在3/3组中的表达显著高于0/0组( P <0í.01),在3/10组中的表达显著高于3/3组( P <0.01);PR-B在0/0组中的表达显著高于3/3组( P <0.01),在3/3组中的表达显著高于3/10组( P <0.01);4组PR-A的表达经比较差异均无统计学意义( P >0.05)。(2)PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度3/3组中的表达高于0/0组( P <0.05),在3/10组中的表达高于3/3组( P <0.05);4组PR-A基因启动子区CpG岛甲基化程度经比较差异无统计学意义( P >0.05)。结论自胚胎期至成年期持续暴露TCDD有可能通过上调在位子宫内膜DNMT-1的表达,从而使PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度增强,致使PR-B表达减弱,促进了内异症的发生与发展。
关键词: 子宫内膜异位症 TCDD DNA甲基转移酶-1 PR-A PR-B -
特应性皮炎患者DNA甲基转移酶-1的表达
目的:检测DNA甲基转移酶-1(DNMT-1)在特应性皮炎(AD)患者中的表达.方法:应用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)结合凝胶图像扫描技术检测培养外周血PBMC的DNMT-1基因.采用电化学发光-酶联免疫测定法检测血清总IgE.结果:AD患者组与正常人对照组DNMT-1基因表达无显著差异(P=0.126).AD患者中血清IgE水平高于5000 IU/mL者的DNMT-1基因表达显著低于正常对照组(P=0.0033),其他组间的表达无差异.DNMT-1基因表达水平与血清IgE水平没有明显的相关性.结论:外周血DNMT-1基因表达水平低下可能与血清IgE水平较高的AD的发病机制有关.
关键词: 特应性皮炎 DNA甲基转移酶-1 DNA甲基化